专利名称：降血糖组合物，其制备方法及具有降血糖功能的保健食品的制作方法安全与健康是21世纪世界关注的焦点问题。糖尿病(diabetes mellitus)是继肿瘤、心脑血管疾病之后排在第三位，严重危害人类健康的慢性疾病之一。它是一种因机体胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗等导致的一系列糖类、脂类、蛋白质代谢紊乱综合征。目前， 国内外对II型糖尿病的主要治疗方法是人工注射胰岛素或口服降糖药物。这些治疗方法存在给患者造成的痛苦大、毒副作用强、有剂量依赖性等一系列问题，因此寻找可用于治疗糖尿病的天然生物活性物质是当前国内外糖尿病治疗研究的重要热点问题之一。蜂胶是工蜂从植物的新生枝条、叶、芽或树皮等组织上采集到树脂状分泌物后混入其上颚腺等腺体的分泌物和蜂蜡等加工而成的芳香性胶状物，包含有类黄酮、萜烯类、醌类、酯类、醇类、酚类、醚类、有机酸和大量的氨基酸、酶类、维生素类以及矿物质类等，是一种天然的活性物质。近年来的一些药效实验和临床实验研究表明，蜂胶具有降糖降脂的功效。另有研究表明，花色素和苦瓜提取物中的苦瓜素(苦瓜苷)、巢菜碱(巢菜核苷、蚕豆嘧啶葡萄苷)、多肽P具有降糖功效，其结构类似于动物胰岛素，能够发挥类似于胰岛素的作用、抑制肝脏糖质新生、促进肝脏糖原合成和外围葡萄糖的氧化。中国发明专利ZL200910147621. 1公开了一种具有辅助降血糖、辅助降血脂功能的保健食品及其制备方法，其中保健食品由蜂胶800-1200份、苦瓜提取物200-300份、银杏叶提取物200-300份，吡啶甲酸铬2-4份以及橄榄油3000-3500份制成。实验证明，该保健食品的辅助降血糖、降血脂功效较好，然而，该保健食品的成本较高，制备较复杂。因此仍需要对现有的配方进行不断改进，以获得效果更好，成本更低且安全性好的组合物。本申请人在国家科技支撑计划项目(代谢综合征的食源活性物质制备、评价及应用关键技术研究O012BAD33B05))的支持下，经过大量实验研究，解决了上述问题，完成了本发明。发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种降糖效果显著且安全性好的降糖组合物， 其可用作辅助降血糖的保健食品。本发明同时还要提供一种降糖组合物的制备方法，该方法简单，且所得降糖组合物的安全性好，无毒副作用且降糖效果显著。为解决以上技术问题，本发明采取的一种技术方案是一种降血糖组合物，其含有如下重量份的成分蜂胶300 600份、柚皮素300 600份、花色素60 120份、苦瓜多肽0. 5 1. 5份、维生素D3O. 001 0. 01份、维生素H 0. 001 0. 1份、维生素E 8 15份、铬元素0. 01 0. 2份以及锌元素1 20份。
优选地，所述组合物含有如下重量份的成分蜂胶400 500份、柚皮素450 550份、花色素80 110份、苦瓜多肽0. 8 1. 2份、维生素D3O. 002 0. 008份、维生素H 0. 01 0. 05份、维生素E 10 15份、铬元素0. 02 0. 1份以及锌元素2 15份。更优选地，所述组合物含有如下重量份的成分蜂胶450 500份、柚皮素500 550份、花色素90 105份、苦瓜多肽1. 0 1. 2份、维生素D3O. 004 0. 006份、维生素H 0. 02 0. 04份、维生素E 10 15份、铬元素0. 02 0. 1份以及锌元素5 15份。根据本发明组合物的一个典型配方，其中含有蜂胶500份、柚皮素513份、花色素100份、苦瓜多肽1. 1份、维生素D3O. 005份、维生素H 0. 03份、维生素E 14份、铬元素0. 04 0. 05份以及锌元素12份。本发明采取的又一技术方案是一种上述的降血糖组合物的制备方法，其是将含有上述各成分的各原料混合即得所述降血糖组合物，具体如下取蜂胶、含柚皮素90wt% 以上的柚皮素原料，含花色素20wt%以上的欧洲越橘提取物原料，含苦瓜多肽10衬％以上的苦瓜提取物、维生素03、维生素H、维生素E、可食用含铬化合物以及可食用含锌化合物，混合均勻，即得所述组合物。根据本发明，所述可食用含铬化合物包括但不限于多聚烟酸铬、三氯化铬、烟酸铬、吡啶甲酸铬以及铬酵母等；所述可食用含锌化合物包括但不限于硫酸锌、甘氨酸锌、柠檬酸锌以及葡萄糖酸锌等。添加在组合物中的可食用含铬化合物和可食用含锌化合物可以是一种或多种，没有特别限制，其中优选吡啶甲酸铬和葡萄糖酸锌。根据本发明，制备组合物所用的原料均可通过商购获得。本发明还特别涉及上述的降血糖组合物在具有降血糖功能的保健食品中的用途以及包含有上述的降血糖组合物的保健食品。由于采取以上技术方案，本发明与现有技术相比具有如下优点本发明将蜂胶、苦瓜多肽、柚皮素、花色素以及各种维生素等组合，其中柑橘属植物提取物中黄酮类化合物有很多都具有治疗糖尿病的功效，如柚皮素(naringenin)、橙皮苷(hesperidin)及花色素苷(anthocyanin)等，柚皮素(naringenin)广泛存在于葡萄柚皮中，是柚皮苷的苷元形式，体内试验证明柚皮素具有类胰岛素特性；另有研究表明，花色素和苦瓜提取物中的苦瓜素(苦瓜苷)、巢菜碱(巢菜核苷、蚕豆嘧啶葡萄苷)、多肽P具有降糖功效，其结构类似于动物胰岛素，能够发挥类似于胰岛素的作用、抑制肝脏糖质新生、 促进肝脏糖原合成和外围葡萄糖的氧化。此外，维生素D、维生素H、维生素E等维生素类化合物以及铬、锌等矿质元素对糖尿病的预防具有一定的作用，而且有助于改善糖尿病及其综合征。本发明将上述各种成分有机组合，各组分之间产生了良好的协同作用，降血糖功效显著，且原料易得，制备简单，成本相对较低。此外，组合物的成分均为天然生物活性物质，安全性好，无毒副作用，特别适于作为辅助降血糖的功能食品，用于对糖尿病患者的辅助治疗。


图1显示了各组小鼠实验后空腹葡萄糖含量(其中*表示差异达显著性水平，μ 表示差异达极显著性水平)；
图2显示了各组小鼠实验前后血糖下降百分比(其中*表示差异达显著性水平，* *表示差异达极显著性水平)；
图3为葡萄糖耐量实验中葡萄糖含量随时间变化图(其中*表示差异达显著性水平，μ表示差异达极显著性水平)；
图4显示了实验后小鼠体重值；
图5显示了为各组小鼠体重下降百分比。

下面结合具体的实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明不限于以下实施例。以下实施例中，所用的原料来源如下
原料柚皮素(95% )购自Sigma公司；原料欧洲越橘提取物(含25%花色素)和苦瓜提取物(含10%苦瓜多肽)购自陕西嘉禾植物化工有限公司；蜂胶购自美国VITAMIN WORLD公司，维生素D3、维生素H、维生素E、吡啶甲酸铬及葡萄糖酸锌购自陕西嘉禾植物化工有限公司。
实施例1
本实施例提供一种降血糖组合物，其含有如下重量份的成分蜂胶461. 5份、柚皮素475份、花色素92. 5份、苦瓜多肽1份、维生素D3O. 0046份、维生素H 0. 0027份、维生素 E 13份、铬0. 0466份以及锌1. 57份。
含有上述组分的降血糖组合物的制备方法如下取蜂胶461. 5份、原料柚皮素 (95% )500份、欧洲越橘提取物(含25%花色素)370份、苦瓜提取物(含10%的苦瓜多肽)10份、维生素D3O. 0046份、维生素H 0. 0027份、维生素E 13份、吡啶甲酸铬0. 375份以及葡萄糖酸锌11份，将它们混合均勻，即得降血糖组合物。
以下使用上述的降血糖组合物，通过实验考察其对小鼠的降血糖功效。实验具体如下。
材料和方法
一、材料
1、实验动物及饲料C57BL/6J SPF级雌性小鼠40只，体重18_25g。实验动物购自上海斯莱克实验动物中心，SPF级动物环境饲养。用于饲喂小鼠的基础饲料购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。
2、实验药品与试剂用于建立高血糖小鼠模型的四氧嘧啶购自SIGMA公司，用时 PBS缓冲溶液稀释至浓度。小鼠复方低、高剂量组分别以人体推荐剂量的5和10倍配成，具体分别为 1365. 9mg/(kg. bw) >2731. 8mgmg/(kg. bw)。其中
小鼠复方低剂量的组合物的制备方法为取蜂胶461.5份、原料柚皮素 (95% )500份、欧洲越橘提取物(含25%花色素)370份、苦瓜提取物(含10%的苦瓜多肽)10份、维生素D3O. 0046份、维生素H 0.0027份、维生素E 13份、吡啶甲酸铬0. 375份以及葡萄糖酸锌11份，将它们混合均勻，即得。该剂量中含有蜂胶461. 5mg、柚皮素475mg、 花色素92. 5mg、苦瓜多肽lmg、维生素D3 0. 0046mg、维生素H 0. 0027mg、维生素E Umg、铬 0. 0466mg 以及锌 1. 57mg。
小鼠复方高剂量的组合物的制备方法为取蜂胶923份、柚皮素(95% ) 1000份、欧洲越橘提取物(含25%花色素)740份、苦瓜提取物(含10%的苦瓜多肽)20份、维生素 D3O. 0092份、维生素H 0.0054份、维生素E 26份、吡啶甲酸铬0. 75份以及葡萄糖酸锌22 份，将他们混合均勻，即得复方高剂量。该剂量中含有蜂胶923mg、柚皮素950mg、花色素 185mg、苦瓜多肽 2mg、维生素 D3O. 0092mg、维生素 H 0. 0054mg、维生素 E 26mg、铬 0. 0932mg 以及锌3. 14mg。二、实验方法1、急性毒理实验选取昆明种小鼠，20_25g，雌雄各10只，以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验，实验前所有小鼠禁食不禁水15h后，然后按照人体推荐剂量的30倍剂量给药，连续观察两个星期，观察小鼠的状态及大小便情况。2、高血糖小鼠模型的建立将C57BL/6J SPF级雌性小鼠禁食16小时后，对实验小鼠腹腔注射1 %四氧嘧啶200mg/kg/d，连续5天后，将小鼠禁食6小时，检测小鼠血糖值，当小鼠血糖值在15-30mmol/L时，认为造模成功。3、灌胃实验选取高血糖模型成功的小鼠共30只，按血糖值随机分为3组，每组 10只，各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验。实验前记录小鼠的空腹血糖值和体重值，并对各组小鼠禁食不禁水10小时，A组(模型组)给予蒸馏水，B 组(低剂量组)，C组(高剂量组)分别给予复方低、高剂量，45天后，记录小鼠的体重值， 并将各组小鼠禁食5小时后进行葡萄糖耐量实验。4、空腹血糖实验实验对各组禁食5小时后，检测各小鼠的空腹血糖值并进行分析。此外，对各组实验前后空腹血糖下降百分率进行了统计学分析，观察实验各剂量组血糖下降百分率相对对照组是否表现出统计学差异。5、葡萄糖耐量实验葡萄糖耐量实验(Glucose Tolerance Test，GTT)是一种葡萄糖负荷试验。当胰岛β细胞功能正常时，机体在进食糖类后，通过各种机制使血糖在2 3小时内迅速恢复到正常水平，这种现象称为耐糖现象。利用这一试验可了解胰岛β细胞功能和机体对糖的调节能力。根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》相关要求，将各组实验小鼠禁食5小时后，经口给予葡萄糖2. Og/ (kg. bw)，测定给葡萄糖后0，30，60，90， 120分钟时的血糖值，做出葡萄糖耐量曲线，并对各组小鼠给葡萄糖后各时间点血糖曲线下面积的变化进行分析，确定受试样品是否具有改善葡萄糖耐量的作用，其中血糖下降百分比和血糖曲线下面积的计算公式如下血糖下降百分比=(实验前血糖值-实验后血糖值)/实验前血糖值X 100% ；血糖曲线下面积=0. 25X (0小时血糖值+4X0. 5小时血糖值+3X2小时血糖值)。6、降体重实验I型糖尿病是由于胰岛素绝对缺乏导致的糖代谢异常，且胰岛素是这类患者治疗的唯一选择。近年来，不少学者发现某些I型糖尿病患者合并存在代谢综合征，他们的治疗和预后也受到代谢综合征的影响。贾兆通等对144例I型糖尿病患者的患病特点及可能原因进行了研究，实验结果发现，I型糖尿病病程越长，糖尿病患者腰围及体重指数越大，对于患病期较长的I型糖尿病患者来说，仅仅通过使用胰岛素达到经低血糖的目的已经远远不够，还需使用一些其他手段减轻患者的并发症症状，如减轻体重等。在降体重实验中，我们在实验前记录小鼠的体重，并计算各组的平均体重。灌胃45天后，对各组小鼠的体重变化进行了检测与分析，并搜集各小鼠的脂肪垫，计算出体脂百分比，观察受试样品各剂量组均能减轻四氧嘧啶诱导的I型糖尿病小鼠的体重并降低体脂百分比，其中体重下降百分比和体脂百分比的计算公式如下
体重下降百分比=(实验前体重-实验后体重)/实验前体重X 100% ；
体脂百分比=脂肪垫重量/体重X 100%。
结果与讨论
1、急性毒理实验小鼠给药后连续观察两个星期，未见任何异常情况，根据国家标准试验中急性毒理实验的判定，可知该复方不会产生任何副作用。
2、高血糖小鼠模型的建立实验将C57BL/6J SPF级雌性小鼠禁食16小时后，对实验小鼠腹腔注射1 %四氧嘧啶200mg/kg/d连续5天后，将小鼠禁食6小时，检测小鼠血糖值。实验结果表明，各小鼠平均血糖值达到《保健食品检验与评价技术规范(2003)》相关要求，为15. 24mmol/L，因此，造模成功。灌胃实验前，我们将小鼠中血糖值达到要求的30小鼠进行随机分成3组，并记录各小鼠体重值及血糖值。
3、空腹血糖实验参见图1，实验结果表明，相对于对照组小鼠，高剂量组和低剂量组小鼠的空腹血糖均得到降低，并达到显著性水平，其中高剂量组降低效果达到极显著水平，空腹血糖值为对照组的62. 7%。此外，我们对各组实验前后空腹血糖下降百分率进行了统计学分析，参见图2，结果表明，实验各剂量组血糖下降百分率相对对照组均表现出统计学差异，其中高剂量组降低效果最为显著，为38. 98%，达到极显著水平(F<=0.0. 1)； 低剂量组为28. 43%，达到显著水平(F <= 0. 05)。根据《保健食品检验与评价技术规范 (2003)》相关要求，受试样品剂量组与对照组比较，空腹血糖实测值降低与血糖下降百分率均表现出统计学意义，因此，我们可判定两个剂量组受试样品降空腹血糖实验结果为阳性。
4、受试样品葡萄糖耐量实验参见图3，对各组小鼠进行的葡萄糖耐量实验结果表明，低剂量组在给予葡萄糖30、90、120分钟后血糖值均明显下降，并在90分钟时达到极显著水平。据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》相关要求，受试样品剂量组与对照组比较，在给葡萄糖后各时间点表现出统计学意义，因此，我们可判定低、高剂量组受试样品降空腹血糖实验结果为阳性。
5、受试样品降体重实验参见图4和5，相对于对照组小鼠，高、低剂量组小鼠的平均体重均有所降低，其中以低剂量组效果最好。实验结果表明，受试样品各剂量组均能减轻四氧嘧啶诱导的I型糖尿病小鼠导致的体重的增加。
综上所述，本发明复方低、高剂量组与对照组比较，空腹血糖实测值降低与血糖下降百分率均表现出统计学意义，并且在给葡萄糖后各时间点复方低剂量组也表现出统计学意义。根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)》相关要求，本实验受试样品降空腹血糖实验结果为阳性。另外，本发明复方对四氧嘧啶诱导的1型糖尿病的并发症具有一定的缓解作用，如可降低实验小鼠体重等，但由于实验小鼠为四氧嘧啶诱导的1型糖尿病小鼠模型，个体间差异较大。
上述实验证明，本发明的降糖组合物具有显著的降糖功效，且全部原料均为天然生物活性物质，安全性好，无毒副作用，可以作为辅助降血糖的功能食品，用于对糖尿病患者的辅助治疗。
实施例2 6实施例2 6为成分相同但含量不同的组合物。它们含有的有效成分的组成和含量参见表1。实验证明，实施例2 6的组合物也具有优异的降糖功效。表3实施例2 6的组成


本发明涉及降血糖组合物，其制备方法及具有降血糖功能的保健食品，组合物含有如下重量份的成分蜂胶300～600份、柚皮素300～600份、花色素60～120份、苦瓜多肽0.5～1.5份、维生素D3 0.001～0.01份、维生素H0.001～0.1份、维生素E 8～15份、铬元素0.01～0.2份以及锌元素1～20份。降血糖组合物可通过将含有上述成分的原料直接混合制得。本发明将上述各种成分有机组合，各组分之间产生了良好的协同作用，降血糖功效显著，且原料易得，制备简单，成本相对较低。此外，组合物的成分均为天然生物活性物质，安全性好，无毒副作用，特别适用作为对糖尿病患者的辅助治疗的保健食品。