专利名称：对多种害虫具有强杀伤作用的极地与深海生境放线菌及代谢产物的制作方法人类的农业生产总是伴随着对有害生物防治，而长期使用化学农药又带来环境污染的副作用，因此，解决栽培植物化学农药污染问题，一直是世界性关注的热点。我国是农 业大国，农产品出口在国民经济中占据重要的比例，近几年来，国际上对农药残留问题日益重视，禁用限用的农药越来越多、残留标准不断提高，毎年因化学农药残留问题造成中国农产品出口的直接和间接损失都达几十亿以上。目前，国内的农药生产大多以仿造国外作为主导产品，我国加入WTO后，对具有自主产权的农药的要求也日益提高，而从天然产物中开发高效低毒的新先导化合物是创制新农药的关键。与其他生物源农药相比，微生物源农药以其开发费用低、更容易实现产业化的优势，成为国内外开发新农药的首选资源，寻找微生物源的新结构活性物质或已有化合物的新功能是生物农药创制的重要途径。为解决陆地生境微生物发现新化合物的几率越来越低的现状，与陆地完全不同的海洋环境尤其是海洋极端环境生存的放线菌受到广泛关注，但受资源限制，有关极地与深海环境微生物产生杀虫物质的研究很少。楚科奇海是北冰洋的边缘海,位于北极圈内，多暴风雪，深水海域同时具备极地和深海2种生境，恶劣的气候迫使生存的生物能产生较为特异的药用物质。海洋生物产生的11引哚咔唑化合物(Staurosporine)曾报道用于抗动物肿 瘤，从未有人做过杀虫尝试。
本发明的目的是提供一株对多种害虫具有强杀伤作用的极地与深海生境放线菌及代谢产物。发明提供了该放线菌的特征及培养基配方，常规分离获得上清液和菌丝体及分离获得吲哚咔唑(StauiOsporine)代谢产物，其人工培养浓缩液或菌丝体与菌液分别经丙酮和こ酸こ酯粗提取，都对小菜娥、菜青虫、蚜虫、美国白蛾等对农业造成较大损失的害虫具有很强的杀伤作用。菌丝体粗提物再经甲醇丙酮(I I)提取，获得I个吲哚咔唑化合物Staurosporine,该化合物对上述4种害虫也有很强的杀伤作用，上述粗提物与化合物对害虫的杀伤均为胃毒活性。本发明的目的是由以下技术方案实现的，研制了ー种对多种害虫具有强杀伤作用的极地与深海环境放线菌，其特征在于该菌株从楚科奇海深水区沉积物分离获得，分类属于硝孢链霉菌Streptomyces nitrosporeus,菌株编号CQT14_24,保藏号为CGMCCNo. 4607，该菌株的形态特征为(I)菌落特征菌落正面灰白色，反面灰色，不透明，与培养基结合紧密，蔗糖硝酸盐琼脂气丝丰茂，粉状，白色至浅灰黄色，葡糖天冬素琼脂气丝浅灰色，基丝浅黄色，无可溶色素，葡萄糖营养琼脂气丝白色至黄灰色，基丝淡灰色，反面浅褐色，可溶色素浅褐色，葡萄糖酵母麦芽汁琼脂浅灰黄褐色，基丝灰黄色，反面浅黄褐色至浅褐色；(2)形态和培养特征孢子丝直、柔曲，成簇或丛，孢子椭圆形至卵圆形，表面光滑，气丝黑灰色，基丝淡黑灰色；(3)生理生化特征明胶液化，牛奶不凝固，淀粉水解，硝酸盐还原，不产生类黑色素，利用阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、蔗糖、鼠李糖、棉子糖、肌醇、半乳糖、乳糖；不利用山梨醇、D-甘露醇。所适合的培养基为可溶性淀粉12-15g，玉米浸汁6-7ml，海泥浸汁300_350ml，KNO3 l-2g, K2HPO4 O. 5-0. 6g, MgSO4 O. 5-0. 6g, NaCl 10_15g，KCl 0. 03-0. 05g, MgCl20.23-0. 25g，水 700-750ml, pH 7. 0-8. 0，19_23°C，140_150rpm，培养 14-15 天，常规分离获 得上清液和菌丝体。所述的菌株发酵物即上清液和菌丝体的粗提物对小菜娥、菜青虫、蚜虫、美国白蛾害虫均有强杀虫活性，由发酵物分离纯化获得卩引哚咔唑化合物(Staurosporine),对上述害虫也有杀虫活性。所述的卩引哚咔唑化合物(Staurosporine)通式(I)为本发明提供一种对多种害虫具有强杀伤作用的极地与深海生境放线菌，其特征在于它属于硝孢链霉菌Streptomyces nitrosporeus，CQT14-24，该菌株从楚科奇海深水区沉积物分离获得，其保藏号为CGMCC No.4607，该菌株的形态特征为菌落正面灰白色，反面灰色，不透明，与培养基结合紧密，孢子丝直、柔曲，成簇或丛。孢子椭圆形至卵圆形，表面光滑。气丝黑灰色。基丝淡黑灰色。应用效果CQT14-24菌株发酵物菌液、菌丝均有很强的杀虫活性，获得的化合物只是菌丝提取物其中的一个，还可再分离到其它杀虫化合物，菌株本身具有很好的农药开发潜力。由菌株已获得的吲哚咔唑化合物在发酵物中含量高，杀虫活性强，较容易开展后续的研究工作，有望在短期内创制成一种新杀虫剂。