专利名称：类胡萝卜素与表叶黄素的组合的制作方法类胡萝卜素是广泛分布在自然界中的黄色、红色和橙色色素。尽管已在各种水果 和蔬菜、鸟类羽毛、蛋黄、家禽皮肤、甲壳类动物和黄斑眼区域中已鉴定出具体的类胡萝卜素，但它们在万寿菊花瓣、玉米和叶用蔬菜中特别地丰富。膳食类胡萝卜素和人血清和血浆中发现的类胡萝卜素之间的关系说明，仅有经选择的类胡萝卜素进入人血流以发挥其作用。类胡萝卜素在可见光谱的400_500nm区域中吸收光线。此物理特性使得色素具有黄色/红色颜色。类胡萝卜素包含由异戊二烯单元组成的共轭的骨架，其通常在分子中心颠倒，使其具有对称性。与双键有关的几何构型的变化导致存在许多顺式异构体和反式异构体。哺乳动物物种不合成类胡萝卜素，因此其不得不获自膳食来源例如水果、蔬菜和蛋黄。近年来，类胡萝卜素已被认为具有若干健康益处，其包括对严重的健康疾病的预防和保护。类胡萝卜素是非极性化合物，其被分为两个亚类，即被称为叶黄素(xanthophyll)或氧合类胡萝卜素的较具极性的化合物，以及如_胡萝卜素、番茄红素等的非极性烃胡萝卜素。两个亚类都具有至少9个共轭双键，其是造成类胡萝卜素的特征颜色的原因。叶黄素(xanthophyll)在共轭的双键链的末端具有包含极性官能团例如羟基或酮基团的环结构。叶黄素(xanthophyll)的实例包括黄体素(lutein)、玉米黄质(zeaxanthin)、辣椒黄素、角黄素、￠-隐黄质、虾青素等。近年来，作为天然着色剂，并且对于它们在人类健康中的作用，包含黄体素(lutein)和玉米黄质(zeaxanthin)的叶黄素(xanthophyll)已吸引了生物医学、化学和营养学领域中的科学家和研究人员的注意。黄体素(lutein)和玉米黄质(zeaxanthin)分别赋予黄色和橙黄色颜色。黄体素(lutein)和玉米黄质(zeaxanthin)可以以游离形式(非酯化形式)和以酯的形式存在于植物原料中。黄体素(lutein)以游离形式存在于如菠菜、羽衣甘蓝、和花椰菜的绿色叶用蔬菜中，以及如芒果、橙子、木瓜、红辣椒、藻和黄玉米的水果中。这些来源通常包含其酯等形式的黄体素(lutein)。在人体中，黄体素(lutein)还存在于血流和各种组织中，特别是眼的斑、晶状体和视网膜中。本质上，游离形式的黄体素酯和黄体素(lutein)是获自万寿菊花的商业上重要的保健食品。在新鲜的万寿菊花中，黄体素酯以反式异构形式存在，而对热、光、氧、酸等的暴露催化由反式-黄体素(lutein)几何异构体形式向顺式黄体素(lutein)几何异构体形式的异构化。作为保健食品和食品添加剂，黄体素(lutein)的反式异构形式是优选的，这是由于与相应的顺式异构形式相比较较好的生物利用度和较深的黄色颜色。人类血浆中存在各种类胡萝卜素，但在视网膜中仅发现大量的叶黄素(xanthophyll):黄体素(lutein)和玉米黄质(zeaxanthin),在视网膜黄斑(小窝中心的黄色斑点)中发现特别高的量。视网膜黄斑区域中的视网膜和视网膜色素上皮细胞的变性导致眼疾病，例如老年黄斑变性(AMD)。在人类视网膜黄斑中，黄体素(lutein)和玉米黄质(zeaxanthin)是主要的类胡萝卜素。流行病学数据暗示了富含黄体素(lute in)的膳食摄入的增加可以减少AMD和有关系的或相关的疾病的风险。因此，在人血浆中，特别是在视网膜黄斑中，需要增加的叶黄素(xanthophyll)例如黄体素(lutein)和/或玉米黄质(zeaxanthin)的摄入。简要说明本发明提供了包括类胡萝卜素和表叶黄素的组合物，以及增加类胡萝卜素的体内生物利用度的方法。本发明还提供了上述组合物在食品、饮料和保健食品中的应用。本发明还提供了预防/治疗/改善眼障碍/病症/疾病例如老年黄斑变性、白内障发生、黄斑变性、结膜黄斑等的方法。使用本文中所述的表叶黄素组合，与等量的不含表叶黄素的类胡萝卜素相比较，可以获得较高的生物利用度。基于实验数据，认为在存在类胡萝卜素的情况下，表叶黄素的存在可以增加类胡萝卜素的血浆浓度。尽管公开了多个实施方案，但由以下的详细描述，本发明的其他实施方案对于本领域技术人员而言将变得显而易见。显然，本发明能够在各个明显的方面进行改变，其全部不脱离本发明的精神和范围。因此，所述详细描述本质上应被认为是说明性的而不是限定性的。图I显示含/不含表叶黄素的黄体素的降解。图2显示含/不含表叶黄素的玉米黄质的降解。图3是本发明中制备的分离的表叶黄素的HPLC色谱图。图4提供了处理I后第7天观察的黄体素的血浆水平(n = 5)。图5提供了处理I后第7天观察的黄体素和表叶黄素的血浆水平(n = 5)。图6提供了处理I和处理II (n = 5)后观察的黄体素的比较血浆水平。图7分别是处理I和处理II后黄体素、黄体素/表叶黄素之合的血浆水平的比较结果。图8提供了相应的处理第7天观察的黄体素的血浆水平，修正计量为0. Img黄体素/kg体重，n = 5。图9提供了第7天观察的3’ -氧代黄体素的血浆水平(相对比较)，n = 5。图10提供了第7天观察的黄体素-二环氧化物片段(5，6-epoxy-3-hydroxy-12’ -旦，e -carotene-12’ _al)的血衆水平(相对比较),n = 5。详细描述本发明涉及类胡萝卜素，例如黄体素和/或玉米黄质，与表叶黄素的组合。已出人意料地发现，表叶黄素对血浆中类胡萝卜素的摄取和保留有作用。因此，所述类胡萝卜素对于递送至视网膜中区组织有更好的生物利用度。在说明书和权利要求中，术语“包括”和“包含”是开放式的术语，并且应理解为是指“包括，但不限于……”。这些术语涵盖更具限定性的术语“实质上由……组成”和“由……组成”。应注意，当用于本文和所附的权利要求中时，单数形式“一”包括复数个引用，除非上下文明确另有所指。此外，本文中术语“一”、“一个或多个”和“至少一个”可以互换使用。还应注意的是，术语“包含”、“包括”、“其特征在于”和“具有”可以互换使用。 除非以另外方式限定，否则在这里使用的所有技术和学术术语，与本发明所属领域的普通技术人员的普遍理解一样，具有相同的含义。在这里明确提到的所有出版物和专利，都通过引证的方式，出于全部目的，被合并为一个整体；这些目的包括描述和披露在可能与本发明有联系的出版物上被报道的化学制品、仪器、统计分析和方法。本说明书引用的所有参考文献都将被用作指示所述领域的技术水平。在这里没有任何内容被推论为承认本发明没有资格预料由于在先发明公开的所述内容。类胡萝卜素是一类烃(胡萝卜素)，其相应的氧化的衍生物为叶黄素。它们由8个类异戊二烯单元组成，所述类异戊二烯单元以某种方式连接，使得在分子的中心处类异戊二烯单元得以保留，使得两个中心的甲基基团为1，6_位置关系，且其余的非末端甲基基团为1，5_位置关系。所有的类胡萝卜素都可以通过(I)氢化、(2)脱氢、(3)环化或(4)氧化或这些过程的任意组合而自具有共轭双键的长中心链的无环的C4tlH56结构(I)(化合物I)形成。所述类还包括源自碳骨架(I)(番茄红素)的特定重排或降解的化合物，条件是保留两个中心的甲基基团。I Ij Ij Ii I I I IItII I I I t I I I
I已从天然来源分离了约600种类胡萝卜素。这些类胡萝卜素及它们的俗名和半系统名称已列举在 Key to Carotenoids (Pfander, 1987)和 Appendix of Carotenoids,Volume lA(Kull&Pfander 1995)中，其也包括有关它们的光谱性质和其他性质的参考文献。许多类胡萝卜素的结构(包括立体化学归属)仍然是不确定的。在结构不确定的情况下，需要使用现代光谱方法(包括高解析核磁共振光谱法)进行解析，随后进行结构阐述。约370种天然存在的类胡萝卜素是手性的，具有I个至5个不对称的碳原子，且在大多数情况下，在自然界中，一种类胡萝卜素仅以一种构型存在。类胡萝卜素的所有具体名称都基于主干名称胡萝卜素，其对应于如化合物11(胡
萝卜素)所示的结构和编号。


本发明描述了用于治疗各种眼疾病的类胡萝卜素和表叶黄素组合物的制备和应用。