专利名称：一种高效鸡粪发酵剂及制备方法与应用的制作方法目前，鸡粪主要用作农作物肥料，不仅浪费了资源，还对环境造成了污染。也有将鸡粪作为家畜饲料的一些物理、化学等方法，这些方法存在的主要缺点是耗能多，成本高，效果差。鸡粪中限制动物采食的主要因素有有害微生物(细菌总数、大肠杆菌、沙门氏菌等)、鸡粪的臭味、寄生虫、铵态氮等，针对这些因素，本发明选择能够安全应用于动物饲料的微生物菌株，利用菌株之间的共生、协作等关系，选择需氧和厌氧互补，能利用产生臭味物质、能通过降低发酵混合物酸度从而抑制氨气释放、在发酵过程中能产生令人愉快气味、能消除或极大降低鸡粪中有害微生物的菌种。将选择的菌种通过扩大培养后有效组合，成为高效鸡粪发酵剂，能够有效发酵鸡粪成为能够安全应用于家畜的饲料。目前尚未见到专门针对发酵鸡粪饲料的鸡粪发酵剂的制备方法及其应用的报道。
本发明的目的提供一种高效鸡粪发酵剂及制备方法在于克服现有技术中存在的缺陷，生产一种高效、操作简单、成本低廉的鸡粪发酵剂，通过使用该发酵剂，使鸡粪能够简单、安全、经济的成为鸡粪发酵饲料。本发明技术方案如下—种鸡粪发酵剂，以扩大培养基培养混合物或已有成品重量百分比计，组成如下黑曲霉CGMCC3. 31630-35% ；产朊假丝酵母CICC31395 35-40% ；枯草芽胞杆菌CICC20037 25-30% ；市售白酒干酵母1-3% ；市售饲料用嗜酸乳杆菌 O. 2-0. 5 %。鸡粪发酵剂中效活菌数含量分别为黑曲霉> 2.0X107cfu/g，产朊假丝酵母彡5. 0X107cfu/g，枯草芽胞杆菌彡5. 0X107cfu/g，酿酒酵母菌彡I. OX 107cfu/g，嗜酸乳杆菌> I. O X 105cfu/g。鸡粪发酵剂中的黑曲霉CGMCC3. 316、产朊假丝酵母CICC31395、枯草芽胞杆菌CICC20037的固体培养基制备方法(I)黑曲霉CGMCC3. 316，固体培养基配制比例是麸皮55 %、玉米25 %、豆柏粉15 %、草粉(或揉碎的玉米秸杆)5 %，每千克加水510ml，混合，静置2h后，O. IMpa灭菌30mino(2)产朊假丝酵母CICC31395，固体培养基制备方法为米糠30%、麸皮40%、玉米粉20%、揉碎的草粉7%、豆柏粉3.0%，每千克加I : 10过磷酸钙浸液15ml，每千克加水500ml,混合，静置 2h 后,O. IMpa 灭菌 30min。(3)枯草芽胞杆菌CICC20037，固体培养基制备方法为揉碎的草粉15%、玉米粉20 %、麸皮50%、豆柏粉15%，每千克加KH2PO4IOg,加水800ml，混合，静置2h后O. IMpa灭菌 30min。鸡粪发酵剂中效活菌数含量分别为黑曲霉> 2.0X107cfu/g，产朊假丝酵母 彡5. 0X107cfu/g，枯草芽胞杆菌彡5. 0X107cfu/g，酿酒酵母菌彡I. OX 107cfu/g，嗜酸乳杆菌> I. O X 105cfu/g。发酵剂的组成为黑曲霉CGMCC3. 316、产朊假丝酵母CICC31395、枯草芽胞杆菌CICC20037、市售白酒干酵母、市售饲料用嗜酸乳杆菌。各菌株的作用及扩大培养方法①黑曲霉3. 316，本发明利用其产纤维素酶和能够产酸特性。本发明中黑曲霉3.316固体培养基扩大培养方法为将菌种活化后用三角瓶马铃薯培养基斜面培养，0-4°C保存备用；按照比例麸皮55%、玉米25%、豆柏粉15%、草粉(或揉碎的玉米秸杆)5%，每千克加水510ml，混合，静置2h后，O. IMpa灭菌30min ;待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，28°C培养箱培养，4-6天即可。②产朊假丝酵母CICC31395，利用其能使无机氮转化为有机氮的性能。本发明中该菌株的固体培养基扩大培养方法为将菌种活化后用麦芽汁琼脂培养基于250ml三角瓶斜面培养，0-4°C保存备；按照比例米糠30%、麸皮40%、玉米粉20%、揉碎的草粉7%、豆柏粉3.0%，每千克加I 10过磷酸钙浸液I. 5ml，每千克加水500ml，混合，静置2h后，O. IMpa灭菌30min ;待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，25-28 °C培养5-7天。③枯草芽胞杆菌CICC20037，本发明利用其生长过程中能产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性抑菌物质，并能产生乳酸等有机酸类，间接抑制其他致病菌生长的性能。本发明中该菌株的固体培养基扩大培养方法为将菌种活化后，用营养肉汁加葡萄糖培养基于250ml三角瓶斜面培养，0-4°C保存备用；揉碎的草粉15%、玉米粉20%、麸皮50%、豆柏粉15%，每千克加KH2PO4IOg,加水800ml，混合，静置2h后O. IMpa灭菌30min ；待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，28-30°C培养3-4天。④市售白酒活性干酵母，本发明主要使用其能够产酸和产生醇香味的特点。⑤市售饲料用嗜酸乳杆菌，利用其在生长过程中能产生有机酸、细菌素和类细菌素，可以抑制有害微生物生长繁殖，能杀死有害细菌如白色念珠菌、大肠杆菌、沙门氏菌，并能产生多种维生素和有机酸。⑥培养好的各菌种有效菌活菌数为黑曲霉> 5. OX 108cfu/g，酵母菌彡 I. 0X108cfu/g，枯草芽胞杆菌彡 4. 0X108cfu/go鸡粪发酵剂的制备将培养好的各菌种培养物在40°C以下烘干，粉碎，过40目筛备用。将各组分按照重量比例黑曲霉30-35%、产朊假丝酵母35-40%、枯草芽胞杆菌25-30%、白酒酵母菌1-3%、嗜酸乳杆菌O. 2-0. 5%充分混合即为成品。制备鸡粪发酵剂中有效菌数含量为黑曲霉彡2.0X107cfu/g，产朊假丝酵母彡5.0X107cfu/g，枯草芽胞杆菌彡5. O X 107cfu/g,酿酒酵母菌彡1.0X107cfu/g，嗜酸乳杆菌彡1.0X105cfu/g。用本发明制备的高效鸡粪发酵剂，经过多次发酵试验及绵羊、肉牛饲养试验，应用效果很好。本发明的有益效果是I、该鸡粪发酵剂所用菌种都是针对鸡粪中主要限制动物采食的因子而选择的，发酵试验结果表明该鸡粪发酵剂能显著改善鸡粪气味，极大的减少或消灭鸡粪中有害微生物；2、该鸡粪发酵剂所选用的菌株都为非致病菌，是可以直接应用于饲料添加剂的有 益菌株；3、该鸡粪发酵剂成本低、制作方法简单。图I :是本发明的技术流程图。
黑曲霉培养物30kg
产朊假丝酵母培养物 40kg枯草芽胞杆菌培养物 28. 8kg
安琪酿酒高活性干酵母 I. Okg嗜酸乳杆菌冻干粉(哈尔滨美华生物技术股份有限公司生产)0. 2kg它是按照以下步骤制备的(I)将黑曲霉CGMCC3. 316、产朊假丝酵母CICC31395、枯草芽胞杆菌CICC20037按
照上述组分含量活化后于三角瓶培养；(2)用廉价的原料制备扩大培养基，将三角瓶培养好的菌种接种相应培养基培养后，40°C烘干，粉碎，过40目筛备用；(3)将培养好的培养物和安琪酿酒干酵母、嗜酸乳杆菌冻干粉按照上述组分含量充分混合即为成品。本实施例中的各组分有效活菌数含量为黑曲霉> 2.0X107cfu/g，产朊假丝酵母彡5. OX 107cfu/g枯草芽胞杆菌彡5. OX 107cfu/g、酿酒酵母菌彡1.0X 107cfu/g、嗜酸乳杆菌> I. O X 105cfu/g。实施例2制备IOkg各种菌种培养物的方法(I)黑曲霉3. 316，固体培养基扩大培养方法为①将菌种活化后用马铃薯培养基于250ml三角瓶斜面培养4瓶，0-4°C保存备用取麸皮5. 5kg、玉米粉2. 5kg、豆柏粉I. 5kg、草粉(或揉 碎的玉米秸杆)0. 5kg，水5100ml，静置2h后O. IMpa灭菌30min，待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。③将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，28°C培养箱培养5天即可。②产朊假丝酵母CICC31395，①将菌种活化后用麦芽汁琼脂培养基于250ml三角瓶斜面培养4瓶，0-4°C保存备用取米糠3. 0kg、麸皮4. 0kg、玉米粉2. 0kg、0. 7kg揉碎的草粉、豆柏粉O. 3kg、l 10过磷酸钙浸液150ml，加水5000ml，静置2h后O. IMpa灭菌30min,待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。③将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，28°C培养箱培养6天。③枯草芽胞杆菌CICC20037，固体培养基扩大培养方法为①将菌种活化后用营养肉汁加葡萄糖培养基于250ml三角瓶斜面培养4瓶，0-4°C保存备用；②揉碎的草粉
I.5kg、玉米粉 2. 0kg、麸皮 5. 0kg、豆柏粉 I. 5kg，加 KH2PO4IOOg,加水 8000ml,静置 2h 后
O.IMpa灭菌30min，待温度降至40°C，接入已经培养好的菌种。③将接种后的扩大培养基分装于搪瓷盘，30°C培养箱培养4天。本实施例中的各组分有效活菌数含量为黑曲霉> 5.0X108cfu/g、酵母菌≤ I. OX 108cfu/g、枯草芽胞杆菌彡 4. 0X108cfu/go实施例3根据鸡粪性状，选择米糠、麸皮、玉米粉、草粉作为鸡粪发酵辅料，混合物比例依次为15%、5%、3%、5%，调节混合物水分含量60%，在环境温度为15°C时，按照O. 2%的比例加入鸡粪发酵剂。将混合物充分混合后，放入发酵池发酵，发酵20天。检测鸡粪发酵前后营养成分、PH值、细菌含量。同时做空白对照试验。试验结果见表I、表2所示。表I鸡粪发酵前后营养成分、pH值、细菌测定结果比较


本发明公开了一种高效鸡粪发酵剂及制备方法与应用，鸡粪发酵剂由黑曲霉、产朊假丝酵母、市售白酒干酵母、枯草芽胞杆菌、嗜酸乳杆菌五种菌种组成，经扩大培养后有效组合而成；本发明还公开了使用廉价易得的农、副产品扩大培养部分菌株的固体培养基和培养方法。本发明能显著改变鸡粪气味，消除或极大的减少鸡粪中有害微生物，能够有效发酵鸡粪成为能够安全应用于家畜的饲料。