一种可随身携带的凝血酶及其制法制作方法

刘立建

2002年9月4日

2002年1月23日

2002年1月23日

武汉大学

A61P7/00GK1367019SQ0211545

凝血酶 随身携带 制法

1.一种可随身携带的凝血酶，其特征是通过化学键的连接将凝血酶固定到棉纤维载体上而得到的凝血酶2.根据权利要求1所述的凝血酶，其特征是凝血酶为经冻干处理得到的白色或类白色块状物或粉末3.根据权利要求1所述的凝血酶，其特征是凝血酶为凝血酶溶液4.根据权利要求1或2或3所述的凝血酶，其特征是棉纤维载体为表面有可反应的化学基团氨基或羧基的脱脂棉、棉纱或棉纱布5.权利要求1所述的凝血酶的制法，其特征是通过化学键的连接将凝血酶固定到棉纤维载体上6.根据权利要求5所述的方法，其特征是通过交联法或缩合法将凝血酶与表面有可反应的化学基团氨基或羧基的棉纤维载体进行交联反应或缩合反应固定到棉纤维载体上7.根据权利要求6所述的方法，其特征是交联反应所用交联剂为二元醛，缩合反应所用缩合剂为水溶性碳二亚胺8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征是凝血酶与棉纤维的结合反应在缓冲溶液中进行，缓冲溶液的pH值为5-10，反应温度为0-50℃9.根据权利要求8所述的方法，其特征是缓冲溶液的pH值为7-8，反应温度为20-25℃

本发明涉及一种可随身携带的凝血酶及其制法本发明提供的技术方案是一种可随身携带的凝血酶，该凝血酶通过化学键的连接将凝血酶固定到棉纤维载体上而得到所用凝血酶为经冻干处理得到的白色或类白色块状物或粉末也可直接使用冻干前的凝血酶溶液上述棉纤维载体为表面有可反应的化学基团氨基或羧基的脱脂棉、棉纱或棉纱布本发明还提供了上述凝血酶的制法，即通过化学键的连接将凝血酶固定到棉纤维载体上本发明可通过交联法或缩合法将凝血酶与表面有可反应的化学基团氨基或羧基的棉纤维载体进行交联反应或缩合反应固定到棉纤维载体上上述凝血酶可通过交联剂与表面带有氨基的棉纤维结合，交联剂为二元醛，如戊二醛、对苯二甲醛等上述凝血酶也可通过缩合剂与表面带有羧基的棉纤维结合，所用缩合剂为水溶性碳二亚胺上述凝血酶与棉纤维的结合反应在缓冲溶液中进行，缓冲溶液的pH值为5-10，最好为7-8；反应温度为0-50℃，最好为20-50℃用本发明得到的凝血酶热稳定性好，可在50℃以下环境中长期存贮，且具有优良的止血功效这种凝血酶制品可以随身携带、随时使用，特别适用于意外事故、交通事故及战争中受到伤害的现场急救取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例2将相当于1000活力单位的凝血酶溶于20毫升pH5.0的缓冲溶液中，加入1克表面氨基化的棉纤维，于0℃下边搅拌边滴加戊二醛溶液，滴加完毕后继续搅拌70分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例3相当于1000活力单位的凝血酶溶于20毫升pH10.0的缓冲溶液中，加入1克表面氨基化的棉纤维，于50℃下边搅拌边滴加戊二醛溶液，滴加完毕后继续搅拌30分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例4将相当于2000活力单位的凝血酶溶于20毫升pH7.0的缓冲溶液中，加入1克表面氨基化的棉纤维，于25℃下边搅拌边滴加对苯二甲醛溶液，滴加完毕后继续搅拌60分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例5冻干前的凝血酶溶液(约100活力单位/毫升)20毫升，加入1克表面氨基化的棉纤维，于40℃下边搅拌边滴加对苯二甲醛或戊二醛溶液，滴加完毕后继续搅拌40分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例6将相当于1000活力单位的凝血酶溶于20毫升pH7.0的缓冲溶液中，加入1克表面羧基化的棉纤维，于20℃下边搅拌边滴加水溶性碳二亚胺溶液，滴加完毕后继续搅拌50分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固取上述固定化凝血酶2克，在30℃下存放3个月，体外凝血试验结果表明，其凝血效果和存放前相当实施例7冻干前的凝血酶溶液(约100活力单位/毫升)20毫升，加入1克表面羧基化的棉纤维，于25℃下边搅拌边滴加水溶性碳二亚胺溶液，滴加完毕后继续搅拌60分钟取出固载有凝血酶的棉纤维，用缓冲液洗净棉纤维上的非化学键附着物，再经室温真空干燥即得以棉纤维为载体的固定化凝血酶体外凝血试验结果表明，该固定化凝血酶可在2分钟内使血凝固