对象物分选装置以及对象物分选方法[0002]以往，在各种领域中，为了根据大小以及外形(以下，有时这些单指形状)分选出粒子而使用筛选装置。作为被分选的粒子，大的可列举出药片、胶囊、制成粒子的颗粒等，小的可列举出生物相关技术和医药领域中使用的来自生物体的细胞等。[0003]如上所述，如果例如分选出细胞并使其形状一致，则在使用该细胞的各种试验中，能够减小试验条件的偏差。分选后的细胞能使用于高通量筛选(high-throughputscreening (HTS))等。[0004]但是，不仅药片和胶囊，而且从各种形状的多个细胞中只分选出适于试验的形状的对象物的作业是非常困难的。[0005]鉴于此种问题，在专利 文献I中公开了制作具有多个贯穿孔的所需厚度的板(platen)的方法。专利文献I的板具有多个贯穿孔，通过使细胞等支撑于该贯穿孔，由此进行细胞的分选。此外，专利文献2公开了分选被染色剂染色的胶囊的分选装置。专利文献2的分选装置包括:具有配置胶囊的网眼的保持容器；以及只对满足条件的胶囊施加水流使其通过网眼，或通过吸引来分选的移液管(pipette)。[0006]现有技术文献[0007]专利文献[0008]专利文献1:日本专利公表公报特表2009-504161号
[0009]专利文献2:日本专利公开公报特开平5-103658号
[0010]但是，当用分选用吸嘴吸引被支撑在专利文献I记载的具有贯穿孔的板中的细胞或被支撑在专利文献2记载的网眼上的胶囊时，存在细胞或胶囊的一部分被吸嘴吸引而变形或有时被破坏的问题。尤其细胞等具有柔软的性状的来自生物体的对象物，有可能因变形而性状发生变化，一部分成为死细胞。


[0011]本发明鉴于此种以往的问题而作出，其目的在于提供一种能够从形状各异的对象物的集合中，在不让分选对象物变形或破坏的情况下，仅分选出指定形状的分选对象物的对象物分选装置以及对象物分选方法。
[0012]本发明一方面涉及对象物分选装置，从包含分选对象物的对象物的集合中分选出分选对象物，该对象物分选装置包括:容器，用于存积液体，并且具有内底部；盘，具有上表面和底面，被浸溃于存积在所述容器的所述液体中，且在所述分选对象物的支撑位置具有贯穿孔；判定单元，判定被支撑在所述支撑位置的对象物的良否；以及除去单元，除去由所述判定单元判定为不良的对象物。
[0013]本发明另一方面涉及对象物分选方法，从包含分选对象物的对象物的集合中分选出分选对象物，包括以下工序:浸溃工序，在容器内浸溃盘，其中，所述容器具有内底部且存积有液体，所述盘用于支撑分选对象物且具有上表面和底面；沉降工序，从所述盘的上表面方向向所述液体添加包 含分选对象物的对象物的集合，并使所述对象物的集合沿重力方向沉降于贯穿孔，其中，所述贯穿孔形成在所述盘上，且被排列在支撑分选对象物的支撑位置；排列工序，从在所述贯穿孔内沉降的所述对象物的集合中，将所述分选对象物支撑在所述支撑位置；判定工序，使用判定单元判定支撑在所述支撑位置的对象物的良否；以及除去工序，使用除去单元除去由所述判定单元判定为不良的对象物。
[0014]本发明的目的、特征以及优点，通过以下的详细说明和附图而更明确。



[0015]图1是说明本发明的第一实施方式的对象物分选装置的结构的说明图。
[0016]图2是说明本发明的第一实施方式的贯穿孔的立体图。
[0017]图3是说明在本发明的第一实施方式的对象物分选装置中分选对象物被分选的情况的说明图。
[0018]图4是说明分选对象物被支撑在本发明的第一实施方式的盘的状态的立体图。
[0019]图5是本发明的第一实施方式的压出机构动作的情况的说明图。
[0020]图6是本发明的第二实施方式的压出机构动作的情况的说明图。
[0021]图7是本发明的第三实施方式的压出机构动作的情况的说明图。
[0022]图8是本发明的第四实施方式的抽出机构动作的情况的说明图。
[0023]图9是本发明的第四实施方式的抽出机构的另一例动作的情况的说明图。
[0024]图10是本发明的对象物分选方法的各工序的说明图。
[0025]图11是歪曲形状(distorted shape)的细胞凝集块的显微镜照片。
[0026]图12是密度不均匀的细胞凝集块的显微镜照片。

[0027][对象物分选装置]
[0028](第一实施方式)
[0029]下面，参照附图详细说明本发明的第一实施方式的对象物分选装置I。图1是说明本发明的第一实施方式的对象物分选装置I的结构的说明图。
[0030]本实施方式的对象物分选装置I包括:具有内底部2，并存积液体3的容器4;具有上表面5和底面6，且在分选对象物7的支撑位置具有贯穿孔8，并浸溃于存积在容器4的液体3中的盘9 ;判定支撑在支撑位置的对象物的良否的相位差显微镜10(判定单元)；以及除去由相位差显微镜10判定为不良的对象物的压出机构11 (除去单元)。以下说明各结构。
[0031]〈关于分选对象物7>
[0032]分选对象物7是使用本实施方式的对象物分选装置I从对象物的集合M(参照图3(b))中被分选出的对象物。[0033]对象物的集合M的种类无特别限定，但可列举出具有各种形状和粒径的粒子的混合物、包含各种大小的细胞和夹杂物的细胞培养液和细胞处理液等。例如，在对象物的集合M为各种形状的粒子的混合衆液(mixed slurry),并使用对象物分选装置I只分选出指定形状的粒子的情况下，被分选出的指定形状的粒子就相当于分选对象物7。同样，在对象物的集合M为包含各种大小的细胞和夹杂物的细胞培养液或细胞处理液，并使用对象物分选装置I只分选出指定形状的细胞的情况下，被分选出的指定形状的细胞就相当于分选对象物7。
[0034]分选对象物优选来自生物体的细胞，更优选来自生物体的细胞凝集块。
[0035]来自生物体的细胞是相对来讲形状的偏差大的对象物。因此，在分选对象物7为来自生物体的细胞的情况下，通过使用本实施方式的对象物分选装置1，能够分选出统一的形状的细胞，因此，可在生物相关技术和医药领域的作业效率化方面作出大贡献。
[0036]在分选对象物7为来自生物体的细胞凝集块(bio-based cell aggregate,球形多细胞体)的情况下，与使用一个细胞获得的试验结果相比，由于细胞凝集块在内部重新构建了各细胞间的相互作用被考虑过的生物体类似环境，并且能够获得各细胞的功能被考虑过的结果，而且能够将实验条件设定为更符合生物体内的环境的条件，因此，通过使用本实施方式的对象物分选装置1，在生物相关技术和医药领域中能够获得可靠性高的结果。
[0037]在此，一般来讲，此种细胞凝集块由数个至数十万个的各个细胞凝集而形成。因此，细胞凝集块的大小各异。活着的细胞所形成的细胞凝集块呈大致球形，但是在构成细胞凝集块的细胞的一部分变质或为死细胞等情况下，有时会成为如图12所示的歪曲形状的细胞凝集块AGl或如 图13所示的密度不均匀的细胞凝集块AG2。通过使用本实施方式的对象物分选装置1，能够从这些呈各种各样的形状的多个细胞凝集块中仅分选出适于试验的形状的细胞凝集块。
[0038]<关于容器4>
[0039]容器4存积液体3。在图1中，例示了由具有内底部2且上端开口的有底的圆筒体形成的容器4。
[0040]容器4的形状无特别限定，但是从操作性、稳定性等的观点出发，优选采用内底部2为平面，且高度较宽度小的扁平形状。
[0041]容器4的大小只要能够将液体3存积为能够完全浸溃后述的盘9的程度的大小即可。
[0042]容器4的材质无特别限定，但是从容易确认被收容在容器4的内容物的状态的观点出发，优选采用透光材料。此外，如后所述，在使用透光材料制作容器4以及盘9这两者的情况下，使用后述的相位差显微镜10，能够从容器4的下方连续观察分选对象物7，能够提高作业效率。
[0043]透光材料无特别限定，但优选采用例如热塑性树脂、热固性树脂、光固化树脂等。更具体而言，透光材料可列举出聚乙烯树脂；聚萘二甲酸乙二醇酯树脂(polyethylenenaphthalate resin);聚丙烯树脂；聚酰亚胺树脂；聚氯乙烯树脂；环烯烃共聚物；含降冰片烯树脂；聚醚砜树脂；聚萘二甲酸乙二醇酯树脂；赛璐玢；聚芳酰胺树脂；聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl (meth) acrylates)等的甲基丙烯酸树脂；聚苯乙烯、苯乙烯-丙烯腈共聚物等的苯乙烯树脂；聚碳酸酯树脂；聚酯树脂；苯氧基树脂；丁醛树脂；聚乙烯醇；乙基纤维素、醋酸纤维素，醋酸丁酸纤维素等的纤维素系树脂；环氧树脂；酚醛树脂；硅树脂；聚乳酸等。
[0044]此外，作为无机系材料，优选使用例如金属醇盐、陶瓷前驱体聚合物、将含有金属醇盐的溶液通过溶胶凝胶法来加水分解聚合而成的溶液或将这些的组合固化而成的无机系材料、具有如娃氧键的无机系材料(聚二甲基硅氧烷等)、或者玻璃。
[0045]玻璃能够广泛使用钠玻璃、石英、硼硅玻璃、Pyrex (注册商标)玻璃、低熔点玻璃、感光玻璃、其它具有各种折射率以及色散系数的光学玻璃。
[0046]作为满足这些要件的容器4，例如可采用高为数mm至数cm、直径为IOcm左右的圆形的玻璃浅底盘。
[0047]作为被存积于容器4的液体3，只要是不让分选对象物7的性状劣化的液体，无特别限定，能够根据分选对象物7的种类而适当选定。作为代表性的液体3，例如基本培养基、合成培养基、伊格尔培养基、RPMI培养基、费舍尔培养基、哈姆培养基(Ham’s media)、MCDB培养基、血清等培养基以外，还可列举出冷冻保存前添加的甘油、CELLBANKER(十慈FIELD株式会社制造)等的细胞冻存液、福尔马林、用于荧光染色的试剂、抗体、净化水、生理盐水等。在分选对象物7为细胞时，能够使用适于该细胞的培养保存液。例如，作为分选对象物7而使用来自生物体的细胞BxPC-3 (人原位胰腺腺癌细胞)的情况下，作为液体3能够使用在将10%的胎牛血清FBS (Fetal Bovine Serum)混合于RPM1-1640培养基的液体中，根据需要添加抗生素、丙酮酸钠等的补充剂的液体。
[0048]存积于盘9的液体3的量无特别限定，但优选使后述的盘9完全浸溃的程度的量。
[0049]<关于盘9>
[0050]盘9浸溃于被存积在容器4的液体3中而使用。盘9在支撑分选对象物7的支撑位置具有贯穿孔8。图1中例示的盘9呈具有上表面5和底面6的扁平的长方体形状，从上表面5向底面6贯穿的多个贯穿孔8以纵6个X横6个的矩阵状排列有共36个。
[0051]盘9的形状无特别限定，但是从容器4的形状为扁平的情况下容易浸溃于容器4且容易从基于重力沉降到正下方的对象物的集合M中分选出分选对象物7的观点、当观察被支撑在盘9的支撑位置的对象物时容易对准显微镜的焦点的观点出发，优选呈扁平的形状。
[0052]关于盘9的大小，由于需要浸溃于被存积在容器4的液体3中，因此，宽度小于容器4的开口宽度且高度小于容器4的收容深度即可。
[0053]盘9的材质无特别限定，但是从容易确认内容物的状态的观点出发，优选采用透光材料。此外，如后所述，在使用透光材料制作容器4以及盘9这两者的情况下，用户使用后述的相位差显微镜10，能够从容器4的上方或下方连续观察分选对象物7。
[0054]透光材料无特别限定，例如可使用容器4的说明中记载的材料。
[0055]如图1及图2所示，本实施方式的盘9在分选对象物7的支撑位置具有沿上下方向贯穿盘9的上表面5和底面6的贯穿孔8。图2是说明本发明的第一实施方式的贯穿孔8的立体图。
[0056]贯穿孔8具有倾斜部12。倾斜部12是为了在将盘9浸溃于容器4的液体3中的状态下，使分选对象物7沿重力方向沉降，且使分选对象物7抵接并支撑于贯穿孔8的内壁面而设置。倾斜部12的上端侧的开口面积大于倾斜部12的下端侧的开口面积。即，倾斜部12被形成为从上表面5向底面6开口面积逐渐变窄。
[0057]关于分选对象物7被分选的步骤将在后面详述，盘9的贯穿孔8如图3 (c)以及图3 (d)所示地在倾斜部12仅捕捉分选对象物7 (分选对象物7c)，而对于非对象物13 (非对象物13c)则让其通过，并使其沉降于容器4的内底部2。
[0058]在图3 (C)中，参照符号7a表不沿重力方向Al沉降的分选对象物,参照符号13a表示沿重力方向沉降的非对象物。参照符号7b表示在贯穿孔8内沉降的分选对象物，参照符号A2表示分选对象物7b沿倾斜部12沉降的方向。非对象物的直径小于倾斜部12的下端的开口面积，因此，通过贯穿孔8。参照符号13b表示通过贯穿孔8而沿重力方向沉降的非对象物。通过贯穿孔8的非对象物13b沉降于容器4的内底部2。参照符号13c表示沉降于容器4的内底部2的非对象物。如上所述，具有小于倾斜部12的下端的开口面积的直径的非对象物不被支撑在贯穿孔8的倾斜部12而沉降于容器4的内底部2。此外，如图3(c)所示，倾斜部的上端为缘尖的形状，因此，分选对象物7a以及非对象物13a不易被挂住，容易被导入到贯穿孔8内。
[0059]另一方面，如图3 (d)所示，沉降于贯穿孔8的对象物的集合M中，具有大于倾斜部12的下端的开口面积的直径的对象物抵接于倾斜部12和贯穿孔8的内壁面，并作为分选对象物7 (分选对象物7c)而被支撑。图3(d)是抵接并支撑于倾斜部12的分选对象物的说明图。参照符号7c表示被支撑的分选对象物。经过以上的工序，对象物的集合M被分选为分选对象物7和非对象物13。
[0060]贯穿孔8的个数无特别限定。例如图2所示，也可以在盘9只形成一个贯穿孔8。此时，图2也是表示本发明的第一实施方式的盘9的变形例的立体图。从与个别地分选出分选对象物7的情况相比，能够大幅度省工且能够实现作业的效率化的观点出发，优选贯穿孔8排列有多个。
[0061]此外，如图4所示，多个贯穿孔8优选矩阵排列。图4是说明多个贯穿孔8以矩阵状排列的盘9的立体图。排列的贯穿孔8的个数无特别限定。在图4中，例示了形成纵6个X横6个的贯穿孔8，将共计36个贯穿孔8以矩阵状排列的盘9。如此，通过在一个盘9形成许多贯穿孔8，能够同时排列并分选出具有指定形状的分选对象物7。其结果，与个别地分选出分选对象物7的情况或排列成一列而进行分选的情况相比，能够同时分选出更多的分选对象物7。其结果，能够使用于高通量筛选等，能够大幅地削减作业量等。
[0062]关于贯穿孔8的形状，只要如上所述地形成有倾斜部12，且倾斜部12的上端侧的开口面积大于下端侧的开口面积即可，并无特别限定。从容易沿倾斜部12将分选对象物7导入到贯穿孔8的观点、与例如倾斜部12设置在贯穿孔8的内壁面的一部分的情况相比容易分选出大致球形的分选对象物7的观点出发，贯穿孔8的形状优选锥台状。
[0063]锥台的种类可采用圆台、棱台等。在贯穿孔8的形状为棱台时，在呈大致球形的分选对象物7被支撑在倾斜部12的状态下，在棱台的角部形成间隙。其结果，分选对象物7不会嵌入贯穿孔8，通过使盘上下反转等即可容易地取出。尤其，从加工容易的观点以及容易地在盘9的单位面积上密集地形成许多贯穿孔8的观点出发，优选四棱台或六棱台。此外，在贯穿孔8形成的倾斜部12的倾斜角无需相同。另外，锥台的剖面形状(从上方观察盘9时的贯穿孔的形状)无特别限定，也可以呈正多边形以外的剖面形状。
[0064]在图2中，参照符号LI表示贯穿孔8呈四棱台状的情况下的贯穿孔8的上表面5侦_开口的一个边的长度，参照符号L2表示贯穿孔8呈四棱台状的情况下的贯穿孔8的底面6侧的开口的一个边的长度。底面6侧的开口面积(L22)相对于上表面5侧的开口面积(LI2)的比率(L22/L12)无特别限定，例如优选0.11至0.94，更优选0.17至0.44，进一步优选L22/L12为0.18至0.31，如果L22/L12处于上述范围内，则在一边使用相位差显微镜10从容器4的上方或下方观察被支撑的分选对象物7，一边使用后述的压出机构11 (参照图5)的压出销14a压出非对象物13d时，能够减轻盘9的影子对观察的影响，并且能够使盘9、分选对象物7、非对象物13d以及压出机构11进入设于相位差显微镜10的镜头的景深内。因此，用户容易确认分选对象物7以及非对象物13d是否被支撑在盘9以及被支撑的分选对象物7以及非对象物13d的形状。此外，用户容易确认非对象物13d的位置和压出机构11的位置。进一步，例如在将对象物的集合M添加于液体3时等，即使在容器4内的液体3中发生一些水流，被支撑在盘9的分选对象物7不会因水流而从贯穿孔8内脱离，更可靠地被支撑于盘9。
[0065]<关于相位差显微镜10>
[0066]相位差显微镜10(判定单元)是为了从容器4的下方观察被支撑在盘9的分选对象物7的形状而设置。如此，通过使用相位差显微镜10来观察对象物，即使在对象物为例如来自生物体的细胞等的情况下，也能明确识别形状，能够准确地观察形状。
[0067]此外，在本实施方式中，采用相位差显微镜10来作为判定单元，但判定单元无特别限定，除了一般的光学显微镜以外，能够使用突光显微镜、偏光显微镜、实体显微镜、明视野显微镜、暗视野显微镜、微分干涉显微镜、超声波显微镜、共聚焦显微镜、激光扫描显微镜、电子显微镜、扫描探针显微镜、X射线显微镜、虚拟显微镜、数码显微镜等。
[0068]在观察细胞等 透明度高的分选对象物7时，优选使用相位差显微镜或荧光显微镜来作为判定单元。使用荧光显微镜来作为判定单元时，对象物需具有荧光性。因此，使用荧光显微镜来测量不具有荧光性的对象物时，预先用荧光色素染色后供于测量。对象物的染色方法无特别限定，适当采用优选的染色方法即可。例如，可采用化学荧光染色、荧光抗体染色等方法。除此之外，也可采用通过基因重组，将诱导例如绿色荧光蛋白(GreenFluorescent Protein(GFP))等突光蛋白的基因导入到细胞进行观察的方法。
[0069]在相位差显微镜10附设有监视装置(未图示)。监视装置包含将由相位差显微镜10制作的光学图像转换为图像数据信号的摄像元件；对所述图像数据进行伽玛校正(gamma correction)以及亮度校正(shading correction)等图像处理的图像处理部；以及显示图像处理后的图像数据的显示装置。
[0070]使用相位差显微镜10判定对象物的形状时的判定基准无特别限定。根据使用分选对象物7的用途，由用户适当决定判断基准即可。
[0071]〈关于压出机构11>
[0072]压出机构11(除去单元)是为了将由相位差显微镜10(判定单元)获得的图像数据等进行图像处理并分析，并被判定为不良的非对象物13从盘9的支撑位置压出并除去而设置的。
[0073]图5是本实施方式的压出机构11动作的情况的说明图。如图5(a)所示，本实施方式的压出机构11具有压出销14a和驱动该压出销14a以使其朝下方进出的致动器15。
[0074]压出机构11以压出销14a位于盘9的贯穿孔8的上方的方式配置在盘9的上方。在图5 (a)中示出了如下的压出机构11，即在纵6个X横6个共计36个贯穿孔8以矩阵状排列的盘9的最靠前的横一列的贯穿孔8内支撑有对象物的状态下，具有压出销14a和致动器15的压出机构11配置在盘9的最靠前的6个贯穿孔8相对应的上方。参照符号13d表示被支撑的非对象物。
[0075]致动器15由驱动控制机构(未图示)控制。致动器15是在使用相位差显微镜10的观察中，当判明贯穿孔8的倾斜部12支撑有非对象物13d时，为了使将此种非对象物13d压出的压出销14a以朝下方进出的方式动作而设置的。如图5(a)所示，压出销14a被收容在致动器15的内部，致动器15接收来自驱动控制机构的压出指示将压出销14a压出。
[0076]用户使用上述的相位差显微镜10观察支撑在盘9的支撑位置的对象物，当发现不具有指定形状的对象物(非对象物13d)时，使上述驱动控制机构控制的致动器15中设置在非对象物13d的支撑位置的上方的致动器15a所具有的压出销14a突出，将非对象物13d从贯穿孔8压出去。具体而言，图5(a)所示的对象物中，非对象物13d与分选对象物7相比形状变形，不是指定的形状。因此，如图5(b)所示，用户通过驱动控制机构控制致动器15的动作，从相应部位的致动器15 (致动器15a)使压出销14a突出，将非对象物13压出。参照符号13e表示被压出的状态的非对象物，参照符号14b表示被压出的压出销，箭头A3表不压出销的关出方向。
[0077]压出销14a由致动器15控制。压出销14a是为了将支撑在贯穿孔8内的非对象物13从贯穿孔8的倾斜部12 (参照图4)的下端侧的开口压出而设置的。
[0078]压出销14a的长度无特别限定，但优选具有能够充分压出支撑在贯穿孔8内的非对象物13d的长度。
[0079]压出销14a的形状无 特别限定，但优选能够在致动器15内上下动作且在压出支撑在贯穿孔8内的非对象物13d时与非对象物13d的接触面积大的容易压出的形状。具体而言，压出销14a的形状优选圆柱状、棱柱状、或者至少顶端部呈扁平的形状。
[0080]作为其它的实施方式，也可在压出销14a的顶端安装适当的工具。例如，图5 (C)是说明本实施方式的压出销14a的另外的例子的说明图。如图5(c)所示，压出销14a的顶端安装有适于压出支撑在盘9的非对象物的形状的压出工具14c。设置于压出工具14c的凸部在从致动器15压出的状态下，按压非对象物13e将其压出。压出工具14c的形状无特别限定，除了凸部以外，也可以为例如沿贯穿孔8的倾斜部的形状的圆锥形状。压出工具14c可以与压出销14a —体形成，也可以独立形成后接合至压出销14a而形成为一体。
[0081]此外,在图5(a)及图5(b)中，不出了最靠前的横一列排列有6个的压出机构11。在采用此种排列的压出机构11的情况下，当将从盘9的跟前起第二列的6个贯穿孔8内支撑的非对象物13d压出时，适当移动盘9或压出机构11的其中一方或双方即可。
[0082]另外，也可以例如与盘9的贯穿孔8的配置相配合，将纵6个X横6个共计36个致动器15以及压出销14a以矩阵状排列在盘9的上方。此时，无需如上所述地移动盘9或压出机构11，能够提高作业效率。
[0083]另外，上述的相位差显微镜10和压出机构11能够通过设置在外部的控制机构(未图示)而连接。据此，能够将用户使用相位差显微镜10判定对象物，并判定为不良的非对象物13d的位置信息发送至控制机构。并且，接收位置信息的控制机构将该位置信息发送至压出机构，使压出机构在适当的时机动作。[0084]以上，根据本实施方式的对象物分选装置1，能够用倾斜部12仅支撑形状各异的对象物的集合M中的指定形状的分选对象物7，并且，使分选对象物7以外的非对象物13沉降于容器4的内底部2。此外，即使在非对象物13d被支撑在倾斜部12的情况下，也能使用相位差显微镜10观察其位置，并能使用具备压出销14a的压出机构11将非对象物13d压出而除去。因此，能够在盘9只支撑分选对象物7。被支撑的分选对象物7无需施加强行变形等并通过吸引等方法来取出，例如可将盘9上下反转来回收或使用具备吸引头的吸引装置(未图示)，在不向分选对象物7施加负荷的情况下进行吸引等，通过平稳的方法来取出，在不让变形或破坏的情况下只分选出指定形状的分选对象物7，其中，吸引片具有充分大于分选对象物7的直径的吸引口。
[0085]此外，关于本实施方式中用户进行的处理，可用预先将处理内容程序化的软件等来控制机器人，使用该机器人进行自动处理。
[0086]另外，在本实施方式中例示了分选对象物7为细胞凝集块，且在支撑于盘9后立即使盘9上下反转等就能平稳地取出的情况，但根据需要，也可以在盘9的支撑位置将分选对象物7持续保持指定时间。例如，在分选对象物7不是充分生长的细胞凝集块，而是单个细胞或者未生长的细胞凝集块的情况下，用户可以在将这些分选对象物7支撑在盘9的支撑位置的状态下继续培养，在这些分选对象物7充分生长后取出。取出的细胞凝集块能使用于各种筛选。
[0087]在本实施方式的盘9的支撑位置上形成有上下贯穿的贯穿孔8。因此，对于支撑在盘9的支撑位置上的未生长的细胞，也能够使培养液充分接触于该细胞。其结果，本实施方式的盘9能够预备性地分选出充分生长之前的未生长的细胞，并且能够在支撑位置上培养未生长的细胞来形成充分生长的细胞凝集块。
[0088](第二实施方式)
[0089]下面，参照附图详细说明本发明的第二实施方式的对象物分选装置。图6是本发明的第二实施方式的喷射喷嘴16动作的情况的说明图。
[0090]如图6所示，第二实施方式的对象物分选装置除了压出机构IlA(除去单元、压出单元)具备能够喷射喷射液的喷射喷嘴16的点以外，与第一实施方式的对象物分选装置I一样。因此，省略不同点以外的说明。
[0091]如图6所示，在本实施方式中，示出了具备排列成一列的6个喷射喷嘴16的压出机构11A。各喷射喷嘴16被设置成:喷射喷嘴16的喷嘴顶端配置在分别与盘9的前一列的贯穿孔8相对应的上方。
[0092]喷射喷嘴16由驱动控制机构(未图示)控制。喷射喷嘴16在使用上述的相位差显微镜10观察时，在判明在贯穿孔8的倾斜部12支撑有非对象物13d的情况下，喷射用于将此种非对象物13d压出的喷射液17。
[0093]喷射喷嘴16从设置在外部的喷射液供应源(未图不)接受喷射液17的供应。与第一实施方式的对象物分选装置I同样，用户使用相位差显微镜10观察支撑在盘9的支撑位置的对象物，当发现不具有指定形状的对象物(非对象物13d)时，从上述驱动控制机构控制的喷射喷嘴16中与非对象物13d的支撑位置相对应地设置的喷射喷嘴16a喷出喷射液17，将非对象物13d从贯穿孔8压出去。具体而言，如图6所示，用户通过驱动控制机构控制喷射喷嘴16的动作，从相应部位的喷射喷嘴(喷射喷嘴16a)喷出喷射液17，将非对象物13d压出。箭头A4表示被喷出的喷射液17的喷射方向。
[0094]喷射喷嘴16的喷嘴顶端被缩小成能够只向非对象物13d喷出喷射液17的形状，且喷射喷嘴16与贯穿孔8之间的距离被调整为喷射液17不会接触到支撑在相邻的贯穿孔8内的分选对象物7。
[0095]此外，在本实施方式中，喷射液17由喷射液供应源供应，但将存积于容器4内的液体3用作喷射液17时，优选设置使存积于容器4内的液体3与喷射喷嘴16循环的循环机构。此时，存积于容器4内的 液体3的量不会因由喷射喷嘴16喷出喷射液17而增减。此外，液体3不会因喷射液17而被稀释。
[0096]另外，喷出的喷射液17也可以为存积于容器4的液体3以外的液体，能够在对分选对象物7的性状无坏影响的范围内适当选择。此外，除了喷射液17以外，也可以喷射空气等气体来作为喷射气体而喷射。此时，喷射气体能够适当选择对分选对象物7的性状无坏影响的气体。
[0097]以上，根据本实施方式的对象物分选装置，能够喷出喷射液将非对象物13d压出，因此，与例如用压出销等来压出的情况相比，在除去非对象物13d时，压出销不会接触盘9的一部分，因此，不会损伤盘9。
[0098](第三实施方式)
[0099]下面，参照附图详细说明本发明的第三实施方式的对象物分选装置。图7是本发明的第三实施方式的压出机构IlB动作的情况的说明图。
[0100]如图7所示，第三实施方式的对象物分选装置除了压出机构IlB(除去单元、压出单元)利用电磁石驱动压出销19a的点以外，与第一实施方式的对象物分选装置I 一样。因此，省略不同点以外的说明。
[0101]如图7所示，本实施方式的压出机构IlB具有:压出销19a ;具备该压出销19a的上部致动器18a ;以及具备用于使压出销19a突出的电磁石的下部致动器18b。例示了上部致动器18a以及下部致动器18b各有6个并分别排列成一列，且各自在上下方向上彼此相向的压出机构11B。上部致动器18a以及压出销19a的配置与第一实施方式的致动器15以及压出销14a —样。
[0102]下部致动器18b设置在盘9的下方，在将盘9载置在容器4的内底部2的情况下，设置在容器4的外底部。
[0103]此外，在本实施方式中，为了明确示出压出销19a的动作，在图7中未示出盘，但是，盘与压出机构IlB之间的位置关系与第一实施方式的对象物分选装置I 一样。
[0104]用户使用上述的相位差显微镜10观察支撑在盘的支撑位置的对象物，当发现不具有指定形状的对象物(非对象物)时，向由驱动控制机构控制的电磁石通电，从而使上部致动器18a中与非对象物的支撑位置相对应地设置的上部致动器18a所具有的压出销19a突出，将非对象物13从贯穿孔压出去。如具体说明，如图7所示，在上部致动器18a收容有压出销19a。在下部致动器的电磁石未通电的状态(下部致动器18b)下，压出销19a保持被收容在上部致动器18a的状态。另一方面，在下部致动器的电磁石被通电的状态(下部致动器18c)下，压出销19a从上部致动器18a突出(压出销19b)，使非对象物通过倾斜部12的下端的开口，并沉降于容器的内底部。箭头A5表示压出销19a的突出方向。
[0105]此外，在图7中例示了将具有电磁石的下部致动器18b设置在盘9的下方的结构，但是具有电磁石的致动器的位置无特别限定。例如，在上部致动器18a的上方设置具有电磁石的致动器，并与向下部致动器18b的电磁石通电的通电方向相反的方向通电，能够将压出销19a从上部致动器18a压出。由此，通过在上部致动器18a的上方设置具有电磁石的致动器，用户使用相位差显微镜10容易从容器的下方观察对象物的状态，因此，操作性等的便利性提闻。
[0106]此外，也可以在上部致动器18a内设置线圈状的压缩弹簧等的弹性部件，来控制压出销19a以使其进出自如。即，用户例如通过向电磁石通电，能够控制为使压出销19a以向上部致动器18a内压缩弹簧压的方式被保持。此时，用户仅在使压出销19a从上部致动器18a出现时停止向电磁石的通电，并利用压缩弹簧的弹性力将压出销19a从上部致动器18a压出。
[0107](第四实施方式)
[0108]下面，参照附图详细说明本发明的第四实施方式的对象物分选装置。图8是本发明的第四实施方式的抽出机构11C(除去单元、抽出单元)动作的情况的说明图。
[0109]如图8所示，第四实施方式的对象物分选装置除了包括作为除去单元的具有吸引吸嘴20a的抽出机构IlC设置在盘9的底面6侧的点以外，与第一实施方式一样。因此，省略不同点以外的说明。
[0110]如图8所示，在各贯穿孔8的倾斜部的下端侧的开口附近设置有吸引吸嘴20a。吸引吸嘴20a在盘9的下方排列成一列，各个吸引吸嘴20a与各个贯穿孔8相对应。吸引吸嘴20a是用于吸引支撑在倾斜部的非对象物的吸嘴。在图8中，参照符号20a表示非吸引状态的吸引吸嘴，参照符号20b表示吸引状态的吸引吸嘴，参照符号13f表示被吸引的非对象物13。
[0111]吸引吸嘴20a具有由驱动控制机构(未图示)控制的阀机构(未图示)，通过阀机构连接于设置在外部的吸引装置(未图示)。在使用上述的相位差显微镜10的观察中，在判明贯穿孔8的倾斜部支撑有非对象物13f的情况下，用户驱动外部的吸引装置，并使驱动控制机构动作，仅使相对应的吸引吸嘴20a的阀机构打开，来吸引非对象物13f，将非对象物13f从贯穿孔8内抽出而除去。箭头A6表示吸引吸嘴20b抽出非对象物13f的抽出方向。
[0112]吸引吸嘴20a的顶端被设置在与所对应的贯穿孔8充分接近的位置，以防止误将被支撑在相邻的贯穿孔8的倾斜部的分选对象物7抽出。
[0113]以上，根据本实施方式的对象物分选装置，能够抽出非对象物13f而将其除去，因此，与使用例如压出销等来压出的情况相比，在除去非对象物13f时，压出销不会与盘的一部分接触。因此，不会损伤盘。此外，在容器内载置盘的位置已被决定时，在与被载置的盘相对应的位置预先设置具有吸引吸嘴20a的抽出机构IlC即可，因此，能够大幅度提高作业效率。
[0114]此外，在本实施方式中，例示了吸引吸嘴20a在盘9的下方配置成一列的结构，但被配置的吸引吸嘴20a的个数无特别限定，可以为I个，也可以将多个排成一列，还可以与贯穿孔8的位置相配合，例如将纵6个X横6个的吸引吸嘴20a以矩阵状排列。
[0115]另外，吸引吸嘴20a的配置位置无特别限定，也可以如图9所示配置在盘9的上方。图9是本实施方式的抽出机构IlC的变形例(抽出机构11D)动作的情况的说明图。如图9所示，配置在上方的吸引吸嘴20b连接于设置在外部的吸引装置(未图示)，通过操作该吸引装置使吸引吸嘴20b的吸引口产生吸引力来吸引非对象物13f。箭头A5表示吸引吸嘴20b吸引非对象物13f的吸引方向。被抽出的非对象物13f被吸引吸嘴20b吸引，并通过吸引吸嘴20b内的内部通路废弃于与该内部通路连接的废气空间。
[0116][对象物分选方法]
[0117]下面，说明本实施方式的对象物分选方法。本实施方式的对象物分选方法是从包含分选对象物的对象物的集合中分选出分选对象物的对象物分选方法，具有浸溃工序、沉降工序、排列工序、判定工序以及除去工序。以下说明各工序。
[0118]〈关于浸溃工序〉
[0119]浸溃工序是将盘浸溃于容器的工序，其中，所述容器具有内底部并存积有液体，所述盘具有上 表面和底面并支撑分选对象物。容器与在第一实施方式的对象物分选装置I的说明中已详述的相同，因此省略说明。
[0120]如图3 (a)所不,盘9浸溃于存积有液体3的容器4中。图3(a)是浸溃于存积有液体3的容器4中的盘9的说明图。由此，盘9在支撑位置上未支撑任何东西的状态下预先浸溃于液体3中。据此，用户能够在液体3中进行分选对象物7的分选作业，能够防止细胞培养液等的对象物的集合M(参照图3(b))中所含的分选对象物7接触于外部空气而干燥。
[0121]<关于沉降工序以及排列工序>
[0122]沉降工序是如下工序，即:将包含分选对象物的对象物的集合从盘的上表面的方向添加至所述液体，并使所述对象物的集合沿重力方向沉降于贯穿孔中的工序，其中，所述贯穿孔形成在盘，并排列在支撑分选对象物的支撑位置，且在内壁面具有倾斜部，该倾斜部的上端的开口面积大于倾斜部的下端的开口面积。
[0123]此外，排列工序是从在贯穿孔中沉降的对象物的集合中，使分选对象物抵接于倾斜部并将其支撑在支撑位置的工序。
[0124]对象物的集合以及贯穿孔与上述记载的相同，因此省略说明。下面，说明分选对象物边沉降边被分选，并排列于盘的支撑位置的顺序。图3(b)至图3(d)是说明在对象物分选装置I中分选对象物7被分选的顺序的说明图。
[0125]如图3(b)所示，对象物的集合M从浸溃于液体3的盘9的上表面的方向被添加。图3(b)是从盘9的上表面的方向将包含分选对象物7的对象物的集合M添加于液体3中的状态的说明图。
[0126]对象物的集合M的添加方法无特别限定，但是从排除分选对象物7的干燥以及物理性冲击的观点出发，在将对象物的集合M添加到液体3时，优选从靠近液面的位置平稳地添加或使用吸引移液管等来直接添加至液体3中。被添加至液体3中的对象物的集合M基于重力在液体3中分散并平稳地沉降。因此,对分选对象物7的物理性冲击降低。
[0127]接下来，如图3(c)所示，对象物的集合M基于重力在液体3中沉降，并到达盘9的上表面。图3(c)是被添加至液体3中的对象物的集合M沿重力方向在盘9的贯穿孔8内沉降，并且，对象物的集合M沉降在被排列的多个贯穿孔8内的状态的说明图。如上所述，基于重力到达盘9的上表面的对象物的集合M中，与倾斜部12接触的分选对象物7b和非对象物13沿倾斜部12下降并被导入贯穿孔8内。[0128]非对象物13的直径小于倾斜部12的下端的开口面积，因此，通过贯穿孔8。通过贯穿孔8的非对象物13 (非对象物13b)沉降于容器的内底部2。
[0129]另一方面，如图3(d)所示，沉降于贯穿孔8的对象物的集合M中，具有大于倾斜部12的下端的开口面积的直径的对象物(分选对象物7c)抵接于倾斜部12和贯穿孔8的内壁面而支撑于倾斜部12，并被排列于盘9的支撑位置。
[0130]〈关于判定工序〉
[0131]判定工序是判定经过沉降工序以及排列工序后支撑在盘的支撑位置的对象物的形状是否为指定的形状的工序。
[0132]判定方法并无特别限定，可采用使用上述的相位差显微镜(判定单元)等观察的方法。在该判定工序判定为不良的对象物(非对象物)在后续的除去工序被压出机构等的除去单兀除去。
[0133]〈关于除去工序〉
[0134]除去工序是使用压出机构(除去单元)来除去在判定工序判定为不良的对象物的工序。
[0135]参照图10进一步详细说明设置有压出机构的容器。图10是本实施方式的对象物分选方法的各工序的说明图。在图10中，使用分为两个室的容器41。
[0136]如图10所示，在 细胞捕获室Cl进行上述的分选对象物7的分选，将直径各异的对象物分选并除去。对于分选的状况，使用设置在容器41的上方或下方的相位差显微镜10(判定单元)主要观察有无支撑在盘9的对象物。此时，直径小于倾斜部的下端的开口面积的非对象物13被除去，分选对象物7被分选在倾斜部。但此时，除具有所需的形状的对象物以外，直径大的对象物或歪曲形状的对象物也有可能支撑在盘9。因此，将盘9移动到邻接的细胞选定室C2进一步从形状方面进行选定。
[0137]在细胞选定室C2，使用设置在容器的上方侧或下方侧的相位差显微镜10来观察被支撑在盘9的对象物的形状。此外，作为判定单元，除了相位差显微镜10以外，也可采用上述的荧光显微镜等。相位差显微镜10在从细胞捕获室Cl观察的位置适当移动后使用，但也可以准备分别对应各室的相位差显微镜10。此外，也可以固定相位差显微镜10的位置，而使容器41移动。
[0138]采用相位差显微镜10来作为判定单元，能够明确地观察大致透明的对象物。此外，如果使用锥虫蓝等荧光色素染色分选对象物7，就能使用荧光显微镜来进行观察。
[0139]例如在分选对象物7为细胞凝集块的情况下，用户使用相位差显微镜10来观察被支撑在盘的倾斜部的对象物。其结果，即使在对象物为具有大于指定的直径的直径、与指定的形状相比歪曲形状、或包含死细胞的不良的细胞凝集块等的情况下，用户也能重新判定非对象物13为不良。被判定为不良的非对象物13被上述的压出机构11 (除去单元、压出单元)除去。
[0140]之后，使盘9上下反转来回收分选对象物7，或使用具备具有充分大于分选对象物7的直径的吸引口的吸引头的吸引装置(未图示)，在不向分选对象物7施加负荷的情况下通过吸引等稳定的方法来回收。
[0141]此外，上述的对象物分选方法中，作为除去方法以采用第一实施方式中详述的压出机构11为例进行了说明，但除去方法并不特别限定，以第二实施方式至第四实施方式中示出的压出机构以及抽出机构为首，能够采用使用各种除去机构(除去单元)的除去方法。此外，用户也可以采用照射激光来除去非对象物13的方法。例如，用户使用相位差显微镜10等确认被支撑在盘9中的非对象物13的位置，向非对象物13照射激光将非对象物13破碎，或诱发细胞凋亡(apoptosis)、坏死(necrosis)来除去非对象物13。照射的激光可采用例如波长为350nm的紫外线激光或波长为532nm的绿色半导体激光。
[0142]以上，根据本实施方式的对象物分选装置，能够从形状各异的对象物的集合中，用盘仅支撑指定形状的对象物，并且，使粒子直径小于指定形状的非对象物沉降于容器的内底部。此外，使用判定单元判定支撑在盘上的对象物中是否含有歪曲形状的非对象物，如果存在此种非对象物，则使用除去单元将其除去。其结果，能够在盘仅支撑分选对象物。对于被支撑的分选对象物，无需通过施加强制变形等或向对象物施加负荷的吸引等方法来取出，因此，例如通过使盘上下反转等方法就能稳定地将其取出，在不让变形或破坏的情况下只分选出指定形状的分选对象物。
[0143]此外，上述的主要包含具有以下结构的发明。
[0144]本发明一方面的对象物分选装置，从包含分选对象物的对象物的集合中分选出分选对象物，该对象物分选装置包括:容器，用于存积液体，并且具有内底部；盘，具有上表面和底面，被浸溃于存积在所述容器的所述液体中，且在所述分选对象物的支撑位置具有贯穿孔；判定单元，判定被支撑在所述支撑位置的对象物的良否；以及除去单元，除去由所述判定单元判定为不良的对象物。
[0145]本发明通过采用此种结构，能够从形状各异的对象物的集合中，用盘仅支撑指定形状的对象物，并且，使粒子直径小于指定形状的非对象物沉降于容器的内底部。此外，使用判定单元判定支撑在盘的对象物中是否含有歪曲形状的非对象物，如果存在此种非对象物，就能使用除去单元将 其除去。其结果，能够在盘仅支撑分选对象物。被支撑的分选对象物无需施加强制变形等并通过吸引等方法来取出，因此，例如通过将盘上下反转来回收，或者使用具备具有大于分选对象物的直径的充分大的吸引口的吸引头的吸引装置，能够以不向分选对象物施加负荷的方式通过吸引等方法稳定地取出，能够在不让变形或破坏的情况下只分选出指定形状的分选对象物。
[0146]优选:所述贯穿孔具有倾斜部，该倾斜部用于在所述盘浸溃于所述容器内的液体中的状态下，使所述分选对象物沿重力方向沉降，且使所述分选对象物抵接并支撑在贯穿孔的内壁面，所述倾斜部的上端的开口面积大于所述倾斜部的下端的开口面积。
[0147]本发明通过采用此种结构，当从盘的上方添加的对象物的集合到达盘的上表面时容易通过倾斜部导入到贯穿孔内。
[0148]优选:所述贯穿孔的形状为锥台状。
[0149]本发明通过采用此种结构，由于贯穿孔的内侧面为倾斜的倾斜部，因此，容易将分选对象物导入贯穿孔。此外，与例如倾斜部设置在贯穿孔的内壁面的一部分的情况相比，容易分选出大致球形的分选对象物。
[0150]优选:所述盘具有排列的多个所述贯穿孔。
[0151]本发明通过采用此种结构，能够同时分选出多个指定形状的分选对象物，与个别地对分选对象物进行分选的情况相比，能够大幅度省工，能够实现作业的效率化。此外，例如使用吸嘴等来取出分选对象物的情况下，通过准备与贯穿孔的配置相对应的多个吸嘴，可有助于装置的自动化。另外，与贯穿孔的配置相对应，能够使多个吸嘴移动。
[0152]优选:所述盘具有矩阵排列的多个所述贯穿孔。
[0153]本发明通过采用此种结构，能够同时分选出更多的分选对象物。其结果，能够使用于高通量筛选等，能够大幅度削减作业量等。
[0154]优选:所述容器和所述盘由透光材料制成。
[0155]本发明通过采用此种结构，例如使用显微镜等从容器的上方或下方连续地确认分选对象物，能够提高作业效率。
[0156]优选:所述判定单元为相位差显微镜。
[0157]本发明通过采用此种结构，即使是将例如来自生物体的细胞等作为分选对象物的情况下，也能明确识别形状，能够准确地进行分选。
[0158]优选:所述对象物的集合被荧光色素染色，所述判定单元为荧光显微镜。
[0159]本发明通过采用此种结构，即使是难以用肉眼或其它观察方法确认形状的分选对象物，也能够明确识别形状，能够准确地进行分选。
[0160]优选:所述除去单元是将所述判定单元判定为不良的对象物从贯穿孔压出而除去的压出单元。
[0161]本发明通过采用此种结构，能够使被支撑在盘的非对象物可靠地落到容器的内底部。此外，由于从倾斜部的上端侧向下端侧压出，因此，能够一边使用判定单元观察一边压出，工作效率提高。
[0162]优选:所述除去单元是将所述判定单元判定为不良的对象物从贯穿孔抽出而除去的抽出单元。
[0163]本发明通过采用此种结构，能够与周边的液体一起吸引并除去，因此，非对象物的一部分未被除去而残存的可能性降低，能够提高除去效率。
[0164]优选:所述分选对象物为来自生物体的细胞。
[0165]本发明通过采用此种结构，能够适用于形状偏差大的对象物即来自生物体的细胞，能够提供有助于生物相关技术以及医药领域的作业效率化的装置。
[0166]优选:所述分选对象物为来自生物体的细胞凝集块。
[0167]与使用一个细胞获得的试验结果相比，由于细胞凝集块在内部重新构建了各细胞间的相互作用被考虑过的生物体类似环境，并且能够获得各细胞的功能被考虑过的结果，而且能够将实验条件设定为更符合生物体内的环境的条件，因此，本发明通过采用此种结构，能够在生物相关技术以及医药领域中提供能够获得可靠性高的结果的装置。
[0168]本发明另一方面的对象物分选方法，从包含分选对象物的对象物的集合中分选出分选对象物，包括以下工序:浸溃工序，在容器内浸溃盘，其中，所述容器具有内底部且存积有液体，所述盘用于支撑分选对象物且具有上表面和底面；沉降工序，从所述盘的上表面方向向所述液体添加包含分选对象物的对象物的集合，并使所述对象物的集合沿重力方向沉降于贯穿孔，其中，所述贯穿孔形成在所述盘上，且被排列在支撑分选对象物的支撑位置；排列工序，从在所述贯穿孔内沉降的所述对象物的集合中，将所述分选对象物支撑在所述支撑位置；判定工序，使用判定单元判定支撑在所述支撑位置的对象物的良否；以及除去工序，使用除去单元除去由所述判定单元判定为不良的对象物。
[0169]本发明通过采用此种结构，能够从形状各异的对象物的集合中，用盘仅支撑指定形状的对象物，并且，使粒子直径小于指定形状的非对象物沉降于容器的内底部。此外，使用判定单元判定支撑在盘的对象物中是否含有歪曲形状的非对象物，如果存在此种非对象物，则使用除去单元除去。其结果，能够在盘仅支撑分选对象物。被支撑的分选对象物无需施加强制变形等并通过吸引等方法来取出，因此，例如通过将盘上下反转等方法就能稳定地将其取出，在不让变形 或破坏的情况下只分选出指定形状的分选对象物。