含绿原酸的味道改良剂制作方法

M·奇恩, A·豪斯勒, H·范里尔萨姆, M 奇恩, 估, 锒

2004年7月28日

2002年6月12日

2001年6月13日

吉万奥丹股份有限公司

A23L1/015GK1516553SQ02811814

绿原 改良剂 味道

1.消费品，含有提供或引起消费品中不良味道的一种或多种成分以及含有以添加剂形式提供的绿原酸，其中所说的绿原酸的浓度足以遮蔽或改良所述不良味道2.权利要求1的消费品，含有选自人造甜味剂、醇、大豆、二氧化碳及其组合的成分3.权利要求1或2的消费品，其中所说的成分是人造甜味剂，选自L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲基酯(天冬甜素)，糖精及其盐，丁磺氨盐(例如，丁磺氨K)，环己基氨基磺酸，二氢查耳酮，木糖醇，纽甜，三氯蔗糖，阿力甜，环己基氨基磺酸盐，蛇菊醇衍生物及其组合4.前述权利要求任一项的消费品，其选自谷物制品，稻米制品，木薯制品，西米制品，焙烤制品，饼干制品，发面制品，面包制品，糖食制品，甜点制品，胶质，口香糖，巧克力，冰制品，蜂蜜制品，糖蜜制品，酵母制品，焙烤用粉，盐和香辛制品，开胃制品，芥末制品，醋制品，调味汁(辛辣调料)，烟草制品，雪茄，香烟，加工食品，烹熟果汁和蔬菜制品，肉和肉制品，果冻，果酱，水果调味汁，蛋制品，乳和乳制品，干酪制品，奶油和奶油替代品，乳替代品，大豆制品，食用油和脂肪制品，药剂，饮料，含醇饮料，啤酒，软饮料，矿泉水和充气水和其它不含醇饮料，水果饮料，水果汁，咖啡，人造咖啡，茶，可可，包括需要复水的形式，食品萃取物，植物萃取物，肉萃取物，辛辣调料，甜味剂，营养药物，明胶，药物和非药物胶质，片剂，锭剂，滴剂，乳液，酏剂，糖浆和其它用于制作饮料的制剂，及其组合5.前述权利要求任一项的消费品，其中绿原酸得自天然萃取物或者是合成的，或者是天然萃取物和合成绿原酸的组合6.前述权利要求任一项的消费品，其中绿原酸得自咖啡豆的萃取物，优选生咖啡豆的萃取物，更优选生robusta咖啡豆的萃取物7.前述权利要求任一项的消费品，其中绿原酸选自3-CQA，4-CQA，5-CQA，3-FQA，4-FQA，5-FQA，3-p-CoQA，4-p-CoQA，5-p-CoQA，3，4-二CQA，3，5-二CQA，4，5-二CQA，3，4-CFQA，3，5-CFQA，4，5-CFQA，或其组合8.前述权利要求任一项的消费品，所含的绿原酸的浓度为约0.0001％w/v-约0.1％w/v，更优选约0.001％w/v-约0.01％w/v9.含有前述权利要求任一项所定义的绿原酸的碳酸化消费品，其中绿原酸在该消费品中的浓度优选为约0.0005％w/v-约0.05％w/v，更优选约0.001％w/v-约0.02％w/v10.味道改良组合物，含有给前述权利要求任一项所定义的消费品带来不良味道的成分以及前述权利要求任一项所定义的绿原酸11.改良消费品不良味道的方法，包括向前述权利要求任一项所定义的消费品或组合物中添加有效量改良或遮蔽所述不良味道的前述权利要求任一项所定义的绿原酸12.改良消费品甜度感觉的方法，包括向前述权利要求任一项所定义的消费品或组合物中添加有效量改良甜度感觉的前述权利要求任一项所定义的绿原酸13.形成绿原酸萃取物的方法，包括在由水和/或极性有机溶剂组成的溶剂中，于30-80℃下从植物来源中一次或多次萃取绿原酸的步骤14.权利要求13的方法，包括收集萃取物并且将所说的萃取物进一步纯化的额外步骤，其中所说的纯化是通过将不溶性杂质沉淀，用不与水溶混的有机溶剂相分离，微孔过滤，吸附色谱或所说步骤的组合来进行的15.权利要求13或14的步骤，其中萃取所用的有机溶剂选自甲醇，乙醇，正丙醇，2-丙醇，丙酮和丙二醇，优选甲醇和乙醇，最优选乙醇，溶剂的组成是100/0的水/有机溶剂(w/w)至10/90的水/有机溶剂(w/w)，更优选是50/50的水/有机溶剂(w/w)至30/70的水/有机溶剂(w/w)16.权利要求13、14或15的方法，其中萃取温度是约45-60℃17.权利要求13、14、15或16的方法，其中不溶性杂质的沉淀是通过向萃取物中添加可与水溶混的有机溶剂来进行的，所述有机溶剂优选是甲醇，丙酮，正丙醇或2-异丙醇，更优选是乙醇18.权利要求13、14、15或16的方法，其中相分离是用不与水溶混的有机溶剂来进行的，所述有机溶剂优选是己烷，环己烷，庚烷，二氯甲烷，氯仿，甲苯，石油醚，甲基叔丁基醚，乙酸乙酯和丁醇，并且非必须地添加可与水溶混的第二种溶剂，其优选是甲醇，乙醇，丙酮，正丙醇和2-丙醇19.权利要求13-18中任一项的方法，从生咖啡豆，优选生robusta咖啡豆中萃取绿原酸20.根据权利要求13-19中任一项的方法获得的萃取物21.前述权利要求任一项所定义的绿原酸作为消费品中的味道改良、味道遮蔽或甜度增强添加剂的用途

本发明涉及消费品，通过添加绿原酸可以改良该消费品的味道分布特征各种消费品，如食物制品、饮料和药物中，都含有可以提供或引起苦味和不利影响产品整体风味的物质在很多情形中，消费品的风味品质能够通过消除或去除苦味同时保留或增强不苦风味组分对整体风味所带来的贡献来改进非营养型甜味剂，也称作人造甜味剂，例如糖精和天冬甜素，仅是提供苦味的物质的一个实例因此，用非营养型甜味剂增甜的消费品，如啤酒，咖啡，软饮料，甜点和药物产品中可能会具有苦味或被很多消费者认为是不合意的余味由于非营养型甜味剂在消费品中的广泛和普通使用，现有技术中描述了一些改良含有这些非营养型甜味剂的消费品味道特征的方法例如，US专利3,296,079公开了向非营养型甜味剂增甜的可食用食品添加0.003％-160％麦芽酚，来遮蔽不愉快的余味US专利4,304,794公开了添加脂族多元醇来减小2，4，6，3’-四羟基-4’-甲氧基二氢查耳酮的苦味余味US专利4,758,438、3,647,482和3,667,969分别公开了通过添加蛋白质非洲竹芋甜素和蒙那灵(monellin)，通过添加核糖核苷、核糖核苷酸及其脱氧类似物，以及通过添加D-半乳糖来消除糖精的苦味余味US专利5,336,513公开了肉桂酸的某些衍生物及其盐可以抑制用人造甜味剂糖精和丁磺氨K增甜的消费品的苦味，所说的消费品如药物制剂，食品和饮料通过增强甜度特征来改良食品或饮料的方法也已有描述例如，US专利3,867,557和3,908,026公开了将对-甲氧基肉桂醛(PMCA)与其它已知的天然或合成甜味剂混合或共溶，来导致组合物具有增强的甜度特征这些专利还公开了PMCA可增强香草和速溶咖啡的风味特征，同时抑制其相关联的苦味US专利3,924,017和3,916,028中所公开的方法显示，绿原酸、咖啡酸、西那林(cynarine)的盐及其异构体可诱发甜度，并且可给非甜味的食品或具有非常低甜味的食物，如水和奶，带来非常愉快的甜味特征上述现有技术中的活动反映了人们对改良消费品中经常存在的不良味道需要进一步和更好的方法和产品意想不到的是，我们现已发现，通过在所说的消费品中包含绿原酸可以改良消费品中不愉快的不良味道或者改进味道或味道感觉因此，本发明第一个方面提供一种消费品，该消费品中含有足够量的改良所说消费品不良味道的绿原酸绿原酸在消费品中的添加量应当足以改良不良味道，并且可以是以例如在消费品中约0.0001％w/v-约0.1％w/v、更优选约0.001％w/v约0.01％w/v的浓度使用然而，本领域技术人员能够理解，不良味道的减少效果或者味道的增强效果取决于许多因素，例如消费品的类型、绿原酸的来源、品质方面和/或定量方面所需的改良、赋予不良味道的物质及其它合意或不合意味道组分的存在，并且对调味者来说在这个范围内或范围外操作达到所需效果是可能的不良味道可能是由于向食物制品添加了一种或多种成分或者在食物制品中存在一种或多种成分而导致形成的不良味道可以由非营养型(人造)甜味剂所带来由非营养型甜味剂产生的不良味道被人们描述为金属味和/或苦味非常多品种的消费品中都存在有非营养型甜味剂，包括但不限于软饮料、乳制品、甜点制品、开胃制品、色拉调料、调味汁、辛辣调料、含醇饮料、糖食、胶质和药剂非营养型甜味剂的实例包括L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲基酯(天冬甜素)、糖精及其盐、丁磺氨盐(例如，丁磺氨K)、环己基氨基磺酸、二氢查耳酮、木糖醇、纽甜(neotame)，三氯蔗糖，阿力甜(alitame)，环己基氨基磺酸盐，蛇菊醇衍生物等等在本发明的另一个方面，消费品中含有足够量改良或遮蔽由人造甜味剂所产生的不良味道的绿原酸不良味道可以是由消费品中的醇所带来的醇包括谷物酒精和发酵产品(啤酒和葡萄酒)，它们或者是单独的形式或者是与其它组分的结合形式由醇所产生的不良味道被人们描述为带来了灼烧味道绿原酸在含醇消费品中的浓度可以为约0.0001％w/v-约0.1％w/v，更优选约0.001％w/v-约0.1％w/v，最优选约0.003％w/v-约0.05％w/v不良味道可以由大豆制品所带来本文中，大豆包括所有的含有任何形式大豆的消费品，包括大豆油(无论是以单独的形式、组合的形式例如以营养药物的形式还是以药剂的形式使用)，豆腐，豆奶，豆酱或豆糊由大豆制品所产生的不良味道被人们描述为带来了豆腥、类似醛的味道在本发明的一个方面中，绿原酸在含大豆制品的消费品中的浓度可以为约0.000 1％w/v-约0.1％w/v，更优选约0.0005％w/v-约0.05％w/v，最优选约0.001％w/v-约0.01％w/v不良味道可以归因于产品中的碳酸化碳酸化产品的实例包括可乐、柑橘类水果风味的饮料、爱尔啤酒(ales)、啤酒和其它含有这些产品的消费品，如冰冻糖食和冷冻糖食由碳酸化产品所产生的不良味道被人们描述为带来了灼烧感觉绿原酸在碳酸化产品中的浓度可以为约0.0001％w/v-约0.1％w/v，更优选约0.0005％w/v-约0.05％w/v，最优选约0.001％w/v-约0.02％w/v除改良不良味道外，绿原酸还可以通过降低不良味道的感觉和/或增强整体甜度的感觉来遮蔽不良味道本文中所用的术语“消费品”广义上包括被人或动物所摄食的所有产品或者可以放入口中并且后来被使用者抛弃的产品包括所有形式的食品和饮料，无论它们是否提供营养价值，例如谷物制品、稻米制品，木薯制品，西米制品，焙烤制品，饼干制品，发面制品，面包制品，糖食制品，甜点制品，胶质，口香糖，巧克力，冰制品，蜂蜜制品，糖蜜制品，酵母制品，焙烤用粉，盐和香辛制品，开胃制品，芥末制品，醋制品，调味汁(辛辣调料)，烟草制品，雪茄，香烟，加工食品，烹熟果汁和蔬菜制品，肉和肉制品，果冻，果酱，水果调味汁，蛋制品，乳和乳制品，干酪制品，奶油和奶油替代品，乳替代品，大豆制品，食用油和脂肪制品，药剂，饮料，含醇饮料，啤酒，软饮料，矿泉水和充气水和其它不含醇饮料，水果饮料，水果汁，咖啡，人造咖啡，茶，可可，包括需要复水的形式，食品萃取物，植物萃取物，肉萃取物，辛辣调料，甜味剂，营养药物(nutraceuticals)，明胶，药物和非药物胶质，片剂，锭剂，滴剂，乳液，酏剂，糖浆和其它用于制作饮料的制剂可以将绿原酸直接添加到消费品中，或者可以将其与消费品的某些成分预混合例如，可以将绿原酸与导致不良味道产生的成分掺混，形成组合物，之后可以将其添加到消费品的其余成分中本发明的另一个方面提供一种用于向消费品或消费品成分中添加的组合物，该组合物含有导致产生不良味道的成分和绿原酸本领域技术人员能够理解，绿原酸在所说组合物中的准确量，例如在增甜组合物中的准确量，在很宽的范围内变化，前提条件是将组合物以足够提供不良味道遮蔽或味道增强效果的量与消费品掺混具体说，组合物中可以含有足够的绿原酸，以便当与消费品掺混时，在消费品中的浓度达约0.0001％w/v-约0.1％w/v在一个优选的实施方案中，提供一种含有非营养型甜味剂和绿原酸的增甜组合物本发明再一个方面提供一种向消费品提供绿原酸的方法，该方法包括向消费品添加绿原酸的步骤，其中所说的绿原酸例如为溶液的形式，添加量足以改良或遮蔽不良味道和/或改良或增强味道优选，绿原酸向消费品中的添加量为约0.0001％w/v-约0.1％w/v在一个实施方案中，方法包括将绿原酸与导致带来不良味道的成分混合，形成组合物，该组合物可以添加到消费品或者添加到消费品的成分中本发明在另一个方面中提供一种向消费品提供绿原酸的方法在本发明的方法中，可以将绿原酸的溶液添加到消费品中以便改良或遮蔽由一种或多种物质所带来的不良味道，如人造甜味剂所带来的不良味道或者，可以将绿原酸添加到导致产生不良味道的成分中形成组合物，之后将该组合物添加到消费品中绿原酸在消费品中的总浓度为约0.0001％w/v-约0.1％w/v绿原酸是文献中不太严格使用的俗名，用来描述植物材料中存在的各种酚酸例如，在一些参考文献中，只有5-咖啡酰奎尼酸才被称作“绿原酸”然而，本文中的术语“绿原酸”用来描述在某些顺式或反式肉桂酸与奎尼酸之间形成的酯类化合物中的一种或多种这些酯的类属可见Clifford，J.Sci.Food Agric.，2000，80，pp.1033-1043，其整体引入本文作为参考，Clifford将绿原酸按照酰基残基在奎尼酸上的身份、数目和位置进行了细分这篇文献讲述了最常见的单独的绿原酸是5-O-咖啡酰奎尼酸(5-CQA)，其结构如下所示，并且尽管5-CQA常被称作绿原酸(CGA)，但这个术语应当仅仅用于指相关的奎尼酸共轭物的类属 奎尼酸(1R-(1α，3α，4α，5β)-1，3，4，5-四羟基-环己烷羧酸)的结构如下所示 奎尼酸R3＝R4＝R5＝H奎尼酸具有轴向羟基(在第1和3碳上)和平伏羟基(在第4和5碳上)R基团上的取代基产生各种不同类型的绿原酸，如Clifford，ASIC，17 colloque，Nairobi，1997，pp.79-91中所述，其整体引入本文作为参考并且列于下表1中，其中CQA是咖啡酰奎尼酸，FQA是阿魏酰奎尼酸，CoQA是香豆酰奎尼酸并且CFQA是咖啡酰阿魏酰奎尼酸表1 肉桂酸的顺式和反式构型已知在自然界都有存在，但绿原酸中的肉桂酸绝大多数是反式构型属于肉桂酸类化合物的各种酸或衍生物的结构如下以反式构型所示 咖啡酸阿魏酸 芥子酸 对-香豆酸肉桂酸及其衍生物可在各种产品中用作甜度增强剂/诱发剂，其包括3-苯基-丙烯酸系列，该系列的化合物在芳族环上取代的化学基团是不同的它们在各种植物材料中以有机共轭物的形式广泛分布，并且在未加工的植物材料中罕以游离酸的形式发现除肉桂酸本身外，此类属中最常见的肉桂酸是咖啡酸(3，4-二羟基肉桂酸)，阿魏酸(3-甲氧基-4-羟基肉桂酸)，芥子酸(3，5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸)和对-香豆酸(对-羟基肉桂酸)绿原酸广泛分布于植物领域，并且存在于双子叶植物的果实、叶子和其它组织中绿原酸可以从各种天然来源中萃取获得，如生咖啡豆(例如，arabica、robusta和liberica)，巴拉圭茶(Ilexparaguariensis)的叶子，梨果类(例如，苹果和梨)，核果类(例如，樱桃和李子)，浆果类，柑橘属水果，芸苔属蔬菜(例如，玉衣甘蓝，结球甘蓝和抱子甘蓝)，茄科蔬菜(例如，马铃薯块茎，番茄和茄子)，菊科蔬菜(例如，菊苣和洋蓟)及各种其它不同的蔬菜绿原酸在谷粒中也有发现(例如，燕麦，大麦，黑麦，稻米，玉米和小麦)根据来源的不同，所存在的绿原酸的含量和不同类型也是变化的可以从一种或多种植物性来源中萃取绿原酸和/或可以使用合成的绿原酸生咖啡豆是绿原酸的良好来源(Clifford，ASIC，17 colloque，Nairobi，1997 pp.79-91)具体说，生咖啡豆萃取物中含有以下类型的绿原酸咖啡酸和奎尼酸的三种单酯，即，3-咖啡酰奎尼酸(3-CQA)，4-咖啡酰奎尼酸(4-CQA)和5-咖啡酰奎尼酸(5-CQA)；对-香豆酸和奎尼酸的三种单酯对-香豆酰奎尼酸(3-p-CoQA，4-p-CoQA，5-p-CoQA)；阿魏酸和奎尼酸的三种单酯阿魏酰奎尼酸(3-FQA，4-FQA，5-FQA)及咖啡酸和奎尼酸的三种二酯即，3，4-二咖啡酰奎尼酸(3，4-二CQA)，3，5-二咖啡酰奎尼酸(3，5-二CQA)和4，5-二咖啡酰奎尼酸(4，5-二CQA)除此之外，还有咖啡酸、阿魏酸和奎尼酸的六种混合二酯，已知是咖啡酰阿魏酰奎尼酸(两种3，4-CFQA，两种3，5-CFQA，两种4，5-CFQA)生Robusta咖啡豆萃取物中存在的这些绿原酸类型中的几种类型的含量已有报道这些数值如下所示，以g/kg干生咖啡豆来表示7.32g 3-CQA，11.25g 4-CQA，49.66g 5-CQA，6.04g 5-FQA，5.05g 3，4-二CQA，4.61g 3，5-二CQA和4.11g 4，5-二CQA(Trugo和Macrae，Food Chemistry，1984，15，pp.219-227，其整体引入本文作为参考)尽管生咖啡豆萃取物中存在绿原酸是已知的，但是使用绿原酸来降低各种类型的消费品中的不良味道是以前未曾报道的因此，本发明另一方面提供一种消费品，该消费品中含有味道改良或味道增强足够量的得自生咖啡豆萃取物的绿原酸绿原酸的一个具体来源是生robusta咖啡豆在以下的段落中，公开的是从robusta咖啡豆中萃取绿原酸的方法然而，本领域技术人员能够知道，可以改进该工艺从其它植物来源中萃取绿原酸生robusta咖啡豆可以通过恒定搅拌在由水和极性有机溶剂组成的溶剂中萃取可以使用的有机溶剂包括甲醇，乙醇，正丙醇，2-丙醇，丙酮和丙二醇咖啡豆可以是普通的咖啡豆或者是脱咖啡因的咖啡豆可以将整豆进行萃取或者在研磨后萃取萃取可以单独用水完成，或者用水与上述所列的一种或多种溶剂的组合来完成优选的溶剂是甲醇和乙醇溶剂的组成可以是100/0的水/有机溶剂(w/w)至10/90的水/有机溶剂(w/w)萃取温度可以是30℃至80℃并且萃取时间可以是4小时至40小时优选的温度是45℃至60℃，可以达到最大萃取效率，同时不会引起5-CQA的显著异构化萃取可以用本领域已知的设备来完成，如逆流萃取器或带有恒定溶剂循环的萃取器对本领域技术人员显而易见的是，萃取可以在各种类型的设备中进行萃取物可以通过滗析、离心或过滤来收集然后，非必须地将咖啡豆在相似条件下萃取一次或两次，将萃取物合并并且将溶剂真空蒸发，以便将萃取物浓缩至咖啡豆重量的约1-3倍通过以下方法中的一种此浓缩的萃取物可以进一步纯化至较高绿原酸含量可以将可与水溶混的有机溶剂添加到经过浓缩的萃取物中，以便诱发蛋白质和不溶于这些有机溶剂的其它物料沉淀优选所用的溶剂是乙醇，但也可以使用其它溶剂，包括甲醇，丙酮，正丙醇或2-异丙醇使蛋白质沉淀所必需的有机溶剂的量可以是萃取物重量的1-4倍，取决于所需的绿原酸的量约1小时后，蛋白质沉淀完成并且通过例如离心或过滤，将蛋白质除去或者，可以通过用不与水溶混的有机溶剂，将浓缩的萃取物洗涤可以使用的溶剂包括己烷，环己烷，庚烷，二氯甲烷，氯仿，甲苯，石油醚，甲基叔丁基醚，乙酸乙酯和丁醇溶剂的使用量可以从萃取物重量的一半至萃取物重量的四倍变化为有助于相分离，可以添加可与水溶混的第二种溶剂第二种溶剂的添加量可以最多为萃取物重量的20％可以使用的第二种溶剂包括甲醇，乙醇，丙酮，正丙醇和2-丙醇、正常情况下，一步洗涤便足以使萃取物澄清然而，如果必要的话，可进行附加洗涤待达到相分离后，可以收集含水相并且真空处理，以便将残余的溶剂除去或者，可以让浓缩的萃取物经过一微孔过滤柱体，来去除杂质用于此操作的柱体的截留分子量可以低至10,000Da可以首先让萃取物通过一大孔径的滤器过滤，以便去除萃取物中的大颗粒，随后通过一较小孔径的滤器过滤，以去除萃取物中的较小颗粒可以用不同孔径的滤器重复相同的过程，直至获得澄清的渗透物为止可以将留存在柱体上的物料抛弃，并且可以将渗透过滤器的物料收集作进一步加工或者，可以通过让浓缩的萃取物经过一吸附柱来实现净化吸附可以用任何类型的以分子和树脂之间的疏水亲合力原理为基础操作的市售树脂来完成可以让萃取物经过一含有这种树脂的柱子可以将穿过的物料抛弃，并且可以通过用含有可与水混合的有机溶剂的水洗脱树脂柱来回收绿原酸可以用来洗脱树脂柱的有机溶剂包括甲醇，乙醇，丙酮，正丙醇和2-丙醇水与有机溶剂之比可以是90/10至0/100的水/有机溶剂(w/w)用来洗脱柱子的溶剂总量是柱的床体积的至少一倍，但可以增加至柱的床体积的5倍，以便更完全地回收绿原酸可以将从柱子中回收的物料真空处理，以便将有机溶剂除去可以将经过上述操作任何一种后获得的水溶液在真空条件下进一步浓缩可以将其直接真空干燥成棕褐色粉末或者，可以将其浓缩至固形物含量为总重量的约20％-45％，接着喷雾干燥成棕褐色粉末喷雾干燥可以在有载体或无载体的情形下进行实施例1萃取并沉淀纯化将整的生robusta咖啡豆(21.8kg)用水和乙醇(95％)的85/15w/w混合物萃取将咖啡豆装载在锥形萃取器中并且将溶剂在60℃下循环16小时通过从萃取器中沥出，收集萃取物，并且将残余的咖啡豆用相同组成的新溶剂萃取两次以上每次萃取所用的溶剂的量为咖啡豆重量的2-4.5倍将萃取物合并并且浓缩至36.3kg加入与萃取物等量的乙醇，以便诱发萃取物中的蛋白质和其它不溶物沉淀将沉淀抛弃并且过滤收集上清液，并且进一步浓缩至9.8kg将浓缩萃取物在不添加载体的情况下喷雾干燥，形成棕褐色粉末对每千克的生咖啡豆而言，获得146克粉末该粉末水水溶性的，在水中形成澄清溶液通过HPLC分析绿原酸含量分析显示存在有数种不同类型的绿原酸，含量为萃取物总质量的约35％下表中显示了通过HPLC分离的各种类型绿原酸的比例并且按每重量百分比重量表示 实施例2萃取并洗涤纯化(相分离)将整的生robusta咖啡豆(22.7kg)用水和乙醇(95％)的40/60w/w混合物萃取将咖啡豆装载在锥形萃取器中并且将溶剂在60℃下循环16小时通过从萃取器中沥出，收集萃取物，并且将残余的咖啡豆用相同组成的新溶剂萃取两次以上每次萃取所用的溶剂的量为咖啡豆重量的2-4.5倍将萃取物合并并且部分浓缩至64.9kg将萃取物用等量的乙酸乙酯/乙醇混合物(85/15w/w)洗涤一次收集乙酸乙酯层并随后抛弃收集含水层并且真空干燥至棕褐色粉末对每千克生咖啡豆而言，获得178克粉末该粉末是水溶性的；它在水中形成澄清的溶液通过HPLC分析绿原酸，并且结果汇总于下表 实施例3萃取并微孔过滤纯化将整的生robusta咖啡豆(22.7kg)用水和乙醇(95％)的40/60w/w混合物萃取将咖啡豆装载在锥形萃取器中并且将溶剂在60℃下循环16小时通过从萃取器中沥出，收集萃取物，并且将残余的咖啡豆用相同组成的新溶剂萃取两次以上每次萃取所用的溶剂的量为咖啡豆重量的2-4.5倍将萃取物合并并且部分浓缩至64.9kg让6.8kg等分部分的萃取物经过分子量截留值为10,000Da的微孔过滤器将滤器留存下来的物料抛弃，并且将透过该过滤器的物料浓缩并且干燥对每千克生咖啡豆而言，获得146克棕褐色粉末该粉末是水溶性的；它在水中形成澄清溶液通过HPLC分析绿原酸，并且结果汇总于下表 实施例4萃取并色谱法纯化(吸附树脂)将整的生robusta咖啡豆(66.7kg)装载在锥形萃取器中，并且将水在80℃下循环16小时通过从萃取器中沥出，收集萃取物，并且将残余的咖啡豆用水萃取两次以上每次萃取所用的水量为咖啡豆重量的2-4.5倍将萃取物合并并且浓缩至102.1kg将200g等分部分的萃取物进一步浓缩至120g并且装在填充有Amberlite XAD-4吸附树脂(湿筛目大小为20-60)的柱子上柱子直径为4cm并且长38cm，柱床体积为427ml将柱子用6柱床体积的水洗脱，随后用4.3柱床体积的乙醇/水(50/50w/w)洗脱收集最后2柱床体积的乙醇/水(50/50w/w)洗脱液并且干燥至淡棕褐色粉末对每千克生咖啡豆而言，获得62克粉末该粉末是水溶性的；它在水中形成澄清溶液通过HPLC分析绿原酸并且结果汇总于下表 实施例5萃取并通过离心/过滤去除沉淀将约4.0kg生robusta咖啡豆在16.0kg 80℃水中通过恒定搅拌混合至少4小时通过倾析、离心或过滤，收集萃取物然后将咖啡豆用6kg附加的80℃水萃取另外至少4小时将萃取物合并且将水真空蒸发，以便将萃取物浓缩至约5或6kg加入等于浓缩萃取物重量1.5倍的乙醇(95％)；如果需要最终萃取物中的绿原酸含量更高，则可以将乙醇的量增加至浓缩萃取物重量的约4倍将混合物搅拌15分钟，并且让浆液在常温下放置至少一小时通过离心或过滤，将所得的沉淀除去，并且随后抛弃从上清液或滤液中真空蒸发乙醇，并且将水溶液真空干燥，得到约460-500g棕褐色粉末或者，可以将水溶液浓缩至适当的固形物含量，即总重量的约30％-45％，随后将浓缩的水溶液喷雾干燥成棕褐色粉末该粉状萃取物是可溶于水的它在水中形成澄清溶液通过HPLC分析绿原酸，并且结果汇总于下表 在所有的实施例，将萃取物通过高效液相色谱(HPLC)，使用Prodigy ODS-3柱(150×4.6mm，颗粒粒度5μm)(Phenomenex，Torrance，CA)在常温下进行分析，其中所说的Prodigy ODS-3柱与质谱检测仪(MSD)连系，以便来测定绿原酸洗脱化合物所用的梯度如下表2中所示表2 MSD的条件如下大气压化学电离模式，正和负极性，气体温度350℃，气化室温度450℃，干燥空气流速6.0l/min氮气，喷雾器压力35psig，毛细电压2500V，电晕电流7μA并且碎片器(fragmentor)电压80V使用分子式为C16H18O9(目录号C44206，Aldrich，Milwaukee，WI)的绿原酸制备标准曲线也可能存在其它类型的绿原酸，但使用此分析条件无法检测得到应当理解的是，可以将HPLC和MSD条件改进以溶解不同类型的绿原酸，并且绿原酸的产量和含量可能随不同批次和不同类型的生咖啡豆或者不同的来源而变化从数批生咖啡豆中制备2.8％w/w-10％w/w(以粉末的重量计)、pH约4.5-约6.0的溶液形式的绿原酸萃取物，并且添加到各种消费品中将溶液添加到消费品中为的是改良和/或遮蔽不良味道实施例6向陈酿的人造增甜的饮料添加绿原酸(合成的)通过将1.4g天冬甜素、0.9g丁磺氨K、6ml苯甲酸钠(25％w/v于水中)、1.3ml磷酸(85％w/v)和0.5ml柠檬酸(50％w/v于水中)混合，来制备人造增甜的饮料用水将混合物的体积调整至1000ml将此饮料混合物在34℃下陈酿3周将可商购获得的合成绿原酸(＞95％纯(1，3，4，5-四羟基-环己烷羧酸3-[3，4-二羟基肉桂酸酯])，Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)于水中的2.8％w/w溶液(pH 5.6)添加到一部分陈酿饮料中，达到最终浓度0.003％w/v由6名受训品尝员组成的专家小组，对这种含绿原酸的饮料进行评价和与未处理的饮料比较含有市售绿原酸的饮料据专家小组评价，呈现出明显较低的陈酿人造增甜饮料中所具有的金属味、微苦余味实施例7向陈酿的人造增甜的饮料添加绿原酸(萃取的)向实施例6第一段所述制备的另一部分人造增甜的饮料中，添加得自生咖啡豆粉状萃取物的绿原酸的水溶液，达到最终浓度0.003％w/v绿原酸由实施例6中所述相同的品尝专家小组评价此饮料含有得自生咖啡豆的绿原酸的饮料据评价也呈现出明显较低的陈酿人造增甜饮料中所具有的金属味、微苦余味实施例8向未加香的含醇饮料添加绿原酸通过将5.26ml谷物酒精(95％醇)、92.24ml水、2.0ml高果糖玉米糖浆、0.25ml苯甲酸钠(10％于水中)和0.25ml山梨酸钾(10％w/v于水中)混合，来制备10标准强度(5％醇)的未加香饮料将如前所述制备的得自生咖啡豆萃取物的绿原酸的溶液添加到一部分含醇饮料中，达到最终浓度为0.0035％w/v绿原酸由六名受训品尝员组成的专家小组评价此含有绿原酸的饮料据评价，该饮料相比未处理的饮料，呈现出明显较低的酒精灼烧味道实施例9向大豆制品添加绿原酸将如前所述制备的得自生咖啡豆萃取物的绿原酸的溶液添加到市售豆奶制品(White Wave，Silk Chocolate)中，达到最终浓度0.04％w/v绿原酸由六名受训品尝员组成的专家小组评价这种含绿原酸的产品，发现豆奶的豆腥、类似醛类的不良味感受到遮蔽，并且感觉产品比不含绿原酸的产品更柔滑和更具乳状实施例10向加香的碳酸化饮料添加绿原酸将如前所述制备的得自生咖啡豆萃取物的绿原酸的溶液添加到标准碳酸化橙味饮料(风味剂含量0.2％)中，达到最终浓度0.001％w/v绿原酸由六名受训品尝员组成的专家小组来比较添加绿原酸的碳酸化饮料和不添加绿原酸的碳酸化饮料专家小组发现，含有绿原酸的饮料，当与不添加绿原酸的饮料相比时，具有明显降低的碳酸化的尖锐、轻微灼烧感实施例11向天冬甜素增甜的酸奶添加绿原酸将如前所述制备的得自生咖啡豆萃取物的绿原酸的溶液添加到市售非脂肪酸奶(Dannon，Light’n Fit Vanilla Yogurt，添加有天冬甜素和果糖)，达到最终浓度0.005％w/v绿原酸由六名受训品尝员组成的专家小组来比较添加添加绿原酸的酸奶和不添加绿原酸的酸奶专家小组评价含有绿原酸的产品在口中具有改进的稠度和质地，并且整体甜度感觉比不添加绿原酸的酸奶更丰满和更圆润