专利名称：一种生物活性多糖种衣剂的制备方法种子在长成植株的过程中会受到很多病虫的危害，这些危害会严重影 响到植株的生长发育及最终的产量。种子处理是最重要、最有效、最方便、最经济的植保手 段之一，它能有效地防治地下害虫、霉菌等危害，目前已成为很多地区病虫害春防工作的主 要内容。同浸种、拌种、闷种相比，种衣剂处理技术具有使用方便、防治成本低、保水抗旱、促 进种苗品质、提高种子发芽率等优点，是一项把防病、治虫、消毒、促长融为一体的种子处理 技术。种衣剂可直接或经稀释后包覆于种子表面，形成具有一定强度和通透性的保护膜 的水基悬浮制剂。用传统化学药剂种衣剂对种子进行处理达到防病虫目的，较为普遍和流 行，但在连续多年的应用中，也相继出现了一些缺点和不足，如种衣剂中的杀菌剂、杀虫剂 大都是在土壤中化学性质较稳定的农药，在杀死种皮周围有害病虫的同时也杀死了大量有 益微生物；采用化学药剂制成的种衣剂进行包衣，可能会使土壤微生态环境平衡变得脆弱， 药剂残留在土壤中还对环境造成一定的污染。有关生物类种衣剂方面的专利不多，其中有CN1276973A的含有益微生物或次生 代谢产物的生物种衣剂，CN1799361A的带有激活蛋白和腐植酸的生物种衣剂等，都有保护 种子的作用。近来研究发现，酵母具有抑制有害真菌病原菌的生长等性能，并且可以通过激 活植物体内的酶系来增强植物自身的抗性，效果较为明显，但目前还没有专利涉及到酵母 类种衣剂。
本发明的目的是提供一种生物活性多糖种衣剂的制备方法，方法新颖、简单，可以 为种衣剂市场开拓一片新领域。一种生物活性多糖种衣剂的制备方法，其特征在于采用了生物技术和涂膜技术， 制备出含有拮抗酵母菌的生物活性多糖种衣剂。该生物活性多糖种衣剂的制备分为如下三止少(一 )酵母菌细胞悬浮液的制备将商业应用的酵母菌(如啤酒酵母、罗伦隐球酵母、鲁氏酵母等一种或几种)接入 已经灭菌的YEPD或麦芽汁培养基中，恒温培养一段时间后，静止或离心，收集酵母细胞并 用水或生理盐水洗涤得到酵母菌的菌悬液，并调整至相应浓度。(二)多糖膜的制备将魔芋胶、结冷胶、海藻酸钠、卡拉胶、瓜尔豆胶、茶叶多糖或南瓜多糖等一种或几 种用蒸馏水溶解后，加入增塑剂，稍加热搅拌均勻，冷却后，得到多糖膜液。(三)生物活性多糖种衣剂的制备将酵母菌细胞悬浮液加入到多糖膜液中，搅拌均勻，然后将种子浸入其中，配以交 联剂，即可在种子表面形成一层膜。本发明的这种生物活性多糖种衣剂具有以下优点(1)可广泛应用于保护种子不 受霉菌侵染，提高种子自身抗性，包覆稳定，提高种子发芽率及成苗率，从而提高作物产量。 (2)所用酵母不产生抗生素及其它有毒物质，无化学污染，安全性高；(2)所用多糖成膜性 能优良，成本低，在自然界中可被生物降解，不会产生环境污染问题；(3)将生物技术与涂 膜技术有机结合，同时具备两种方法的优点；(4)生物活性多糖膜经过交联后，不会因表面 附水等因素而溶解，稳定耐用。膜液③。4)将生物活性多糖膜液③刷于花生种子表面，风干后浸入2%交联剂CaCl2中 20min，用清水浸泡20min后晾干，制备成生物活性多糖种衣剂包衣的花生种子。实例21)将商业应用的鲁氏酵母经斜面活化后接种到装有已经灭菌的50mLYEPD培养基 的250mL三角瓶中，恒温30°C下150r/min培养40h，发酵液静置收集菌体，用无菌水洗涤菌 体两次，再用无菌水并将酵母菌制成菌悬液，菌悬液浓度调至IOltl单位(血球计数板计数 法)①。2)取结冷胶1. Okg加入到100L蒸馏水中，搅拌均勻再加入0. 8kg增塑剂山梨醇， 搅拌30min，得到多糖膜液②。3)将2L酵母菌菌悬液①加入到多糖膜液②100L中，搅拌均勻，得到生物活性多糖
膜液③。4)将生物活性多糖膜液③喷于玉米种子表面，风干后浸入3%交联剂柠檬酸钠中 lOmin，用清水浸泡IOmin后晾干，制备成生物活性多糖种衣剂包衣的玉米种子。实例31)将商业应用的罗伦隐球酵母经斜面活化后接种到装有已经灭菌的50mLYEPD培 养基的250mL三角瓶中，恒温30°C下150r/min培养40h，发酵液3000r/min离心20min收 集菌体，用无菌生理盐水洗涤菌体两次，再用无菌生理盐水将酵母菌制成菌悬液，菌悬液浓 度调至IO11单位(血球计数板计数法)①。2)取海藻酸钠1. 51g加入到IOOL蒸馏水中，搅拌均勻，再加入1. 5kg增塑剂甘露 醇，搅拌30min，得到多糖膜液②。3)将IL酵母菌菌悬液①加入到多糖膜液②IOOL中，搅拌均勻，得到生物活性多糖膜液③。 4)将生物活性多糖膜液③涂于大豆种子表面，风干后浸入4%交联剂ZnSO4中 2min，用清水浸泡2min后晾干，制备成生物活性多糖种衣剂包衣的大豆种子。


本发明涉及一种生物活性多糖种衣剂的制备方法。其特征在于采用了生物技术和涂膜技术，将具有抗真菌作用的拮抗酵母与具有成膜效果的多糖相结合，制备出含有拮抗酵母菌的生物活性多糖种衣剂，用于包被种子。该生物活性多糖种衣剂制备方法简单；具有生物活性抑菌功能；能够提高种子自身抗性；贴合种子包覆以保护种子，稳定而不受水分等其它因素影响，无毒且环境友好。因此，该生物活性多糖种衣剂可广泛应用于保护种子不受霉菌侵染，提高种子发芽率及成苗率，从而提高作物产量。