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新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中的应用制作方法

  • 专利名称
    新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中的应用制作方法
  • 发明者
    刘小宁, 徐鑫, 方美珠, 晁群芳, 樊永红, 王咏星
  • 公开日
    2011年8月31日
  • 申请日期
    2011年3月25日
  • 优先权日
    2011年3月25日
  • 申请人
    新疆大学
  • 文档编号
    A61K36/28GK102166243SQ20111007313
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种在治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂,其特征在于,通过将新疆一枝蒿全草粉碎,称重加3倍体积的乙醚放置他后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取, 每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95%乙醇沉淀过夜,离心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,过滤得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20 %、40 %、60 %、80 %不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60 %和80 %的乙醇洗脱物,减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂2.一种如权利要求1所述的新疆一枝蒿制剂的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤(1)、首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,称重加3倍体积的乙醚放置8小时后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取,每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、将新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀过夜,过滤,旋转蒸发除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,得乙酸乙酯部位,将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20%、40%、 60 %、80 %不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60 %和80 %的乙醇洗脱物减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂3.如权利要求1所述的新疆一枝蒿制剂在治疗糖尿病药物中的应用,其特征在于,所述的使用剂量为67. 5mg/kg
  • 技术领域
    本发明涉及中草药制剂技术领域具体的说,本发明涉及一种用于治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂及制备技术领域
  • 背景技术
  • 具体实施例方式
    下面,举实施例说明本发明,但是,本发明并不限于下述的实施例本发明中涉及到的主要原辅材料和设备有主要原料及选用试剂新疆一枝蒿,采自天山支脉一天格尔山北路,采回后置阴凉处自然干燥、粉碎装袋后备用黄芪浸膏可通过本领域熟知常见的技术手段所获得昆明种小白鼠,雄性,购自新疆医科大学医学实验动物中心(动物许可证号 SYXK (新)2003-0001)四氧嘧啶,购自美国Sigma公司;S0D,南京建成生物工程研究所产品;MDA,南京建成生物工程研究所产品石油醚,分析纯试剂,天津市富宇精细化工有限公司;无水乙醇, 分析纯试剂,天津市富宇精细化工有限公司;乙酸乙酯,分析纯试剂,天津市富宇精细化工有限公司盐酸二甲基胍,北京中慧药业有限公司主要仪器超声波细胞粉碎机隔音箱,宁波新芝生物科技股份有限公司JFSD-70型实验室万能粉碎机,上海嘉定粮油检测仪器有限公司;RE-5299型旋转蒸发器,巩义市予华仪器有限责任公司;循环水式真空泵,巩义市予华仪器有限责任公司;AL104-IC型电子天平,梅特勒-托利多仪器有限公司;KQ-250DE型数控超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司;乐康全血糖测定仪,罗氏诊断公司产品(批号2005-06 22381501)本发明中选用的所有试剂和仪器都为本领域熟知选用的,但不限制本发明的实施,其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施方式的实施实施例一新疆一枝蒿制剂的制备参见附图1,具体描述新疆一枝蒿制剂的制备如下(1)、首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,称重加3倍体积的乙醚放置8小时后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取,每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、将新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀过夜,过滤,旋转蒸发除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,得乙酸乙酯部位,将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20%、 40%,60%,80%不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60%和80%的乙醇洗脱物减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂通过将上述技术手段获得新疆一枝蒿制剂,分析给药后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠体重、血糖、SOD以及MDA变化,并对其组织形态进行观察,来探究新疆一枝蒿提取液对糖尿病KM小鼠的影响结果表明通过用四氧嘧啶诱导建立小鼠糖尿病模型,本发明提供的新疆一枝蒿制剂具有良好的降血糖活性功效,在制备治疗糖尿病药物中具有广阔的应用前景实施例二 新疆一枝蒿制剂的制备参见附图1,按照实施例一所述的技术方案,通过将新疆一枝蒿全草粉碎,称重加 3倍体积的乙醚放置他后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取,每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95%乙醇沉淀过夜,离心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,过滤得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20^^40^^60%, 80%不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60%和80%的乙醇洗脱物,减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比5 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂通过分析给药后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠体重、血糖、SOD以及MDA变化,并对其组织形态进行观察,来探究新疆一枝蒿提取液对糖尿病KM小鼠的影响结果表明本发明提供的新疆一枝蒿制剂制备中,采用上述技术工艺获得的新疆一枝蒿制剂,具有显著的降血糖活性,使用剂量为67. 5mg/kg实施例三实验性四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立取体重18_22g的昆明种雄性小鼠120只,适应性喂养一周,随机选取10只为正常对照组(Nomal control group,NC),其余腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg(四氧嘧啶用生理盐水配置),注射前禁食不禁水12h,造成实验性高血糖模型,造模型后48h内给与10% 葡萄糖水,防止动物发生低血糖性死亡,72h后,小鼠尾端取血测血糖(取血前小鼠禁食 12h)观察动物的饮水、饲料摄入情况,是否出现糖尿病典型“三多”症状最后选取血糖值> 11. lmmol/L的小鼠为实验性糖尿病动物模型四氧嘧啶可对胰岛β细胞造成损伤,从而影响了胰岛素的分泌,使动物血糖升高昆明种小鼠注射四氧嘧啶造模,3d后各组出现多饮、多食、多尿、体重减轻的“三多一少” 症状,并逐渐加重给药后,采用新疆一枝蒿制剂高、中、低剂量组昆明种小鼠的症状减轻, 且随实验进程症状得到缓解;而模型对照组的症状随实验进程加重实施例四新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠的降血糖作用将造模成功的糖尿病模型小鼠50只,正常小鼠10只进行分组,共分为6组,包括正常对照组、糖尿病模型对照组、药物治疗组和3个实验组糖尿病模型对照组(Diabetic control group, DC),每天灌胃0. 9%生理盐水;新疆一枝蒿制剂低剂量组(Low dose,L),每天灌胃33. 75mg/kg ;新疆一枝蒿制剂中剂量组(Middle dose, Μ),每天灌胃67. 5mg/kg ;新疆一枝蒿制剂高剂量组(High dose, H),每天灌胃135mg/kg ;正常对照组(Nomal control group, NC),每天灌胃0. 9%生理盐水;药物治疗组(Curegroup, CG),每天灌胃 1. 0g/kgo连续给药14d,每周测一次体重、尾静脉取血测一次空腹血糖浓度,见表1、表2表1 实验期间小鼠体重(g)变化情况(元士 S)
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  • 法律状态
专利名称:新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中的应用的制作方法近年来,由于生活水平的提高、饮食结构的改变、日趋紧张的生活节奏以及少动多坐的生活方式等诸多因素,全球糖尿病发病率增长迅速,糖尿病已经成为继肿瘤、心血管病变之后第三大严重威胁人类健康的慢性疾病。对于糖尿病的治疗,西医多采用饮食、口服降糖药物及胰岛素替代等方法,它们的优点是降糖作用肯定,起效快,但不足之处是副作用多。天然药物具有来源丰富,毒副作用小、易于接受和长期服用的优点,因此,近年来国内外有关植物中天然降糖物质的研究和开发十分活跃。糖尿病(DM,Diabetes Mellitus)是一种于遗传因素和多种环境因素相关联的以慢性高血糖为特征的代谢紊乱综合症,目前虽然有一些不同作用靶点的药物用于治疗糖尿病,但有时并不能达到预期治疗效果。因此,能够开发高效的治疗糖尿病的药物是治疗糖尿病的核心问题。近年来研究发现,中药的降血糖作用温和持久,副作用小,且作用机制具有多效应、多位点及多功能等特点。所以,开发高效低毒的抗糖尿病中药将是一个具有发展前景的研究领域,而新疆一枝蒿的药效作用近年来成为研究的热点,研究开发新疆一枝蒿在治疗糖尿病药物的相关产品具有重要的现实意义。
针对现有技术中未见报道有关新疆一枝蒿在治疗糖尿病药物中的应用的技术现状,本发明旨在提供新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中应用。本发明的技术方案通过以新疆一枝蒿为原料,将新疆一枝蒿全草粉碎、置于乙醚溶液中浸泡,过滤旋转蒸发除去乙醚溶液后用乙醇超声提取、提取液用乙醇沉淀、离心,经乙酸乙酯萃取、聚酰胺柱层析、最后浓缩制成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比配伍溶于水中制成液体制剂。该制剂用于治疗糖尿病药物中应用,使用剂量小,疗效高,经检测具有良好的降血糖活性作用。具体的,本发明提供了一种在治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂,通过将新疆一枝蒿全草粉碎,称重加3倍体积的乙醚放置他后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取,每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液,用95 %乙醇沉淀过夜,离心取上清液,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,过滤得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20 %、40 %、60 %、80 %不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60 %和80 %的乙醇洗脱物,减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂。进一步,本发明提供了一种在治疗糖尿病药物中应用的一枝蒿制剂的制备方法,具体包括如下步骤(1)、首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末,称重加3倍体积的乙醚放置8小时后过滤,沉淀物用80%乙醇在35°C下超声提取,每次30-40min,过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液;O)、将新疆一枝蒿提取液用95%乙醇沉淀过夜,过滤,旋转蒸发除去乙醇,乙酸乙酯萃取,萃取温度为常温,得乙酸乙酯部位,将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20%、 40%,60%,80%不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60%和80%的乙醇洗脱物减压浓缩成浸膏,浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10) 1比例配伍,按照中草药液体药剂通常做法,配置一定量的纯水制备获得成品制剂。新疆一枝蒿(Artemisia rupestris L.),别名岩蒿,菊科蒿属,是新疆哈萨克族和维吾尔族民间传统用药,该药材记载于我国清代赵学敏的《本草纲目拾遗》,已收《药品标准》维吾尔药分册和《维吾尔药志(上册)》。新疆一枝蒿为多年生草本,高20-50cm,全株具特异芳香。茎呈圆柱形,直径Imm 4mm,有紫茎和淡黄绿茎.表面略有纵棱,质脆, 断面淡黄、中空,气香特异,味淡。叶绿色,枯时淡黄色,裂片呈狭披针形,长2mm 8mm,宽 0. 5mm 1mm,两面具有疏短柔毛,无柄或具短柄,基部有假托叶。头状花序半球形,黄紫色, 径为5mm 8mm,梗长3mm 5mm,总苞3 4列,外层草质条形。多于5月下旬至6月上旬萌发,生长较缓慢,7月上,中旬现蕾,8月开始开花,一直可开放到9月上,中旬,首批开放的花则在此时进入果期,果期可延至10月上旬,很快枯萎,进入休眠期。国内临床资料表明, 作为民族药,它具有清热解毒、健胃消食、镇静止吐、抗过敏等功效,用于治疗毒蛇咬伤、荨麻疹、消化不良、感冒、肝炎、过敏性疾病等。本发明选用的黄芪浸膏可通过本领域熟知常见的技术手段所获得。本发明通过用四氧嘧啶诱导建立小鼠糖尿病模型,研究了制备获得的新疆一枝蒿制剂的降血糖作用,最佳的使用剂量为67. 5mg/kg。通过实施本发明具体的发明内容,可以达到以下效果1.本发明通过对制备获得的新疆一枝蒿制剂进行提取,分析给药后四氧嘧啶糖尿病KM小鼠体重、血糖、SOD以及MDA变化,并对其组织形态进行观察,来探究新疆一枝蒿提取液对糖尿病KM小鼠的影响。结果表明本发明提供的新疆一枝蒿制剂具有良好的降血糖活性,在制备治疗糖尿病药物中具有广阔的应用前景。2.本发明所需试剂均为分析纯,制备方法为超声波提取技术,操作简便快捷、无需加热、提出率高、速度快、提取物的结构未被破坏、效果好,显示出明显的优势,可直接进行放大生产。图1所示为新疆一枝蒿制剂的制备工艺流程图。图2所示为新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠肝脏的影响图,图中a代表糖尿病小鼠肝脏(HE染色,X 10)、b代表新疆一枝蒿制剂治疗肝脏(HE染色,X 10)、c代表药物治疗小鼠肝脏(HE染色,X 10)、d代表正常小鼠肝脏(HE染色,X 10)。图3所示为新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠肾脏的影响图,图中a代表糖尿病小鼠肾脏(HE染色,X 10)、b代表新疆一枝蒿制剂治疗肾脏(HE染色,X 10)、c代表药物治疗小鼠肾脏(HE染色,X 10)、d代表正常小鼠肾脏(HE染色,X 10)。

本发明公开一种用于治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂及制备。通过将新疆一枝蒿全草粉碎,称重加3倍体积的乙醚放置8h后过滤,沉淀物用80%乙醇在35℃下超声提取,每次30-40min,过滤得到乙醇提取液,用95%乙醇沉淀、离心取上清液,乙酸乙酯萃取,过滤得乙酸乙酯部位,乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用20%、40%、60%、80%不同浓度的乙醇溶液洗脱,收集60%和80%的乙醇洗脱物,减压浓缩成浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10)∶1比例配伍,配置一定量的纯水制备获得成品制剂。制备获得新疆一枝蒿制剂具有降血糖活性,使用剂量为67.5mg/kg,在治疗糖尿病药物中具有广泛的应用领域。



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