专利名称：抗氧化剂的制造方法近年来，活性氧被认为是造成皮肤皱纹、张力降低等老化的原因，作为防止老化的方法之一，除去活性氧的方法已广为所知。作为活性氧清除剂被使用的有超氧化物岐化酶 (S0D，也被称为抗氧化酶)等。SOD不仅具有抑制活性氧发生的效果，而且能够防止由活性氧引起的皮肤变粗糙和斑点、皱纹等(参照非专利文献1)。因此，近年来，人们对具有SOD活性的抗氧化物质进行了相关研究。例如，已提出了白桦提取组合物(参照专利文献1)以及以七叶树籽的提取物为有效成分的SOD活性化剂(参照专利文献幻等。然而，由于这些SOD活性化剂全都是从植物原料提取得到，该提取操作耗费时间长，且由于天然资源的利用可能性有限等原因，其制造成本高。另外，除了来自植物的抗氧化物质以外，乳酸菌等的发酵物也被发现具有抗氧化效果。例如，专利文献3中提出了对于广范围的过氧化物具有分解特性的乳酸菌由来的培养物。然而，该培养物仅仅是从豆曲等分离源分离乳酸菌、并培养，从所得到的培养物回收菌体，而得到的含有该菌体的菌体悬浊液，对于过氧化氢等过氧化物具有分解特性。对于过氧化物的分解有可能是由还原性物质引起的分解，因而并不一定是由SOD引起的分解。另夕卜，非专利文献2 5中公开了由纳豆菌或乳酸菌发酵豆渣得到的发酵物具有抗氧化作用。 然而，这些研究都偏重于豆渣发酵物的亚油酸体系中的抗氧化作用、羟自由基清除能力、过氧化氢清除活性等抗氧化作用，而对于具有SOD活性还未有报道。此外，专利文献4、5中提出了纳豆菌发酵番石榴叶由来的抗氧化物质。然而，从其实施例可以看出，只使用番石榴提取物(试样1)和只使用米糠、大豆发酵物(试样幻时的 SOD活性都低，其活性氧清除效果不充分。而且，由于番石榴叶的获得受季节限制，因而该方法同样在实际使用上存在困难。如上所述，虽然已知具有各种活性氧清除能力的物质，但是，这些物质中还没有发现高SOD活性，已实用化的物质也很少。而且，目前还没有利用毕赤酵母属(Pichia)的微生物来制造具有高SOD活性的抗氧化剂的报道。非专利文献1 食品功能素材11，2001年4月27日出版，株式会社广告节目郗， 44-63 页非专利文献2 田村贵起等，日本食品科学工学会刊，1999年，第46卷，第9号， 561-569 页非专利文献3 渡边泰成等，崎玉县产业技术综合中心研究报告，2005年，第3卷非专利文献 4 :B. Moktan, etc.，Food Research International, 2008,41 :586-93非专利文献5 :Y. P. Zhu, etc.，Food Control, 2008,19 :654-661专利文献1 :日本特开2008-88109号公报专利文献2 日本特开2007-291069号公报专利文献3 日本特开2009-191276号公报专利文献4 日本特开2004-24004号公报专利文献5 日本特开2004-43505号公报
针对上述现有技术中存在的技术问题，本发明人进行了悉心研究，结果发现在含有豆渣的培养基中培养毕赤酵母属(Pichia)的微生物，特别是培养异常毕赤酵母(Pichia anomala)或季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)，能够低成本且高效地获得抗氧化齐U，从而完成本发明。本发明涉及提供一种抗氧化剂的制造方法，其中，在含有豆渣的培养基中培养毕赤酵母属(Pichia)的微生物，从其上清液中得到抗氧化剂。本发明还涉及提供根据上述抗氧化剂的制造方法得到的具有高SOD活性的抗氧化剂。本发明还涉及豆渣的毕赤酵母属(Pichia)的发酵提取物作为抗氧化剂的用途。本发明还涉及提供豆渣的毕赤酵母属(Pichia)的发酵提取物在制造(活性氧清除剂)中的用途。本发明还涉及提供配合有上述抗氧化剂的食品、化妆品、医药品。发明效果根据本发明所涉及的抗氧化剂的制造方法，能够利用特定微生物，以食品加工业等的副产物豆渣作为培养基的主原料，低成本且高效地得到抗氧化剂，该抗氧化剂具有活性氧清除效果，安全性优异，容易操作，因而能够用于食品、化妆品、医药品等领域。其中，豆渣是指，将大豆浸泡在水中使其充分吸收水分后，再经粉碎、过滤除去水而得到的物质；也可以使用食品产业中压榨豆浆等的豆制品制造后剩下的豆渣。作为糖类，可以单独使用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖等中的任意一种，或者混合使用。从提高发酵生产性和利用性的观点出发，其中优选葡萄糖。在本发明中，为了提高SOD活性，本发明的培养基优选由豆渣、葡萄糖和水构成， 进一步优选培养基中的豆渣的含量为5 15W/v%、更优选为8 12W/v%，特别优选为 10W/v%。豆渣的含量在该范围时才能得到高SOD活性。并且，从该观点出发，葡萄糖的含量优选为0. 2 2w/v%，更优选为0. 8 1. 2w/v%。下面，将上述这种用于制造抗氧化剂的培养基称为“抗氧化剂制造培养基”。<发酵培养条件>在发酵培养过程中，可以使用上述微生物中的1种或2种以上。在使用2种以上微生物的情况下，可以将微生物顺次或同时添加到抗氧化剂制造培养基中使其发酵。作为用于制造抗氧化剂的发酵培养条件，从最优化毕赤酵母属(Pichia)微生物的成长所必需的温度、时间，以及提高SOD活性的观点出发，优选在20 40°C、更优选在 27 35°C的培养温度下，培养1 7天，优选培养48 96小时，更优选培养68 76小时。<抗氧化剂的回收、精制>在本发明中，可以通过离心分离等从培养液除去菌体，回收离心后的培养上清液 (以下，有时也称为“豆渣发酵提取物”)直接作为抗氧化剂利用。另外，也可以通过适当的公知的分离、精制技术，例如，通过超过滤、硫酸铵分级沉淀等进一步精制。本发明中的抗氧化剂(即，活性氧清除剂)的抗氧化效果，即，活性氧清除效果，由测定SOD活性值来确认。SOD活性值越大，SOD活性越高，提高消除活性氧的能力，从而能够抑制由皮肤氧化引起的老化等。本发明中的“高SOD活性”是指，根据下述实施例的方法测定计算的SOD活性值为75%以上。在此我们规定，本发明的抗氧化剂(活性氧清除剂) 的SOD活性为75%以上且小于100%时，表示具有中等的高SOD活性，而SOD活性为100 120%时，表示具有更高的高SOD活性。如下述实施例所示，通过培养本发明的毕赤酵母属(Pichia)微生物得到的豆渣发酵提取物具有高SOD活性。通过使用该发酵提取物，可以得到抗氧化、抗老化等优异的活性氧清除效果。因此，通过培养本发明的毕赤酵母属(Pichia)微生物得到的豆渣发酵提取物，可以作为治疗目的或非治疗目的的抗氧化剂(活性氧清除剂)使用。非治疗目的的使用是以美容为目的的使用，或为维持健康状态的使用等。并且，所述抗氧化剂(活性氧清除剂)的治疗目的的使用和非治疗目的的使用是可以完全区分地进行的。另外，通过培养本发明的毕赤酵母属(Pichia)微生物得到的豆渣发酵提取物，还可以用于制造抗氧化剂(活性氧清除剂)。本发明的抗氧化剂(活性氧清除剂)具有极高的活性氧清除效果，同时安全性极高，可以用于预防或改善由生物体内活性氧量的增大所引起的高血压、动脉硬化、糖尿病及癌症等疾病、以及成为美容方面障碍的诸多症状。本发明的抗氧化剂(活性氧清除剂)还可以制成制剂配合于通常的食品、化妆品或医药品中，赋予活性氧清除效果，提高商品价值。另外，作为食品形态，例如，可以采用蛋糕、巧克力、口香糖、糖、饮料等通常的食品形态。作为化妆品形态，例如，可以制成化妆水、乳液、凝胶剂、精华剂、面膜、冲洗剂、沐浴齐U、粉底、口红、软膏等适用于皮肤的皮肤外用剂。另外，作为医药品形态，例如，可以制成散齐U、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮剂、液剂、乳剂、注射液等。这些食品、化妆品和医药品中可以根据目的使用对应的任意成分。本发明的抗氧化剂(活性氧清除剂)的配合量，可以根据其使用形态进行适当变化，相对于食品、化妆品、医药品等的总量，换算为固形物，优选配合0.01 10w/V%，更优选配合0. 01 lW/v%。当配合量小于0. 01W/v%时难以得到充分的活性氧清除效果；而当配合量大于10W/V%时，其效果反而不会提高因而不经济。此外，作为添加方法，可以预先添加，也可以在制造工程中添加，可以考虑操作性进行适当选择。实施例下面，基础实施例对本发明进行说明，但本发明并不限定于这些实施例。(抗氧化剂(活性氧清除剂)的制造)实施例1 实施例8作为从豆渣制造抗氧化剂(活性氧清除剂)的微生物，使用以下表1所示的毕赤酵母属(Pichia)的微生物。表 本发明涉及抗氧化剂的制造方法。本发明提供一种抗氧化剂的制造方法，其中，在含有豆渣的培养基中培养毕赤酵母属(Pichia)的微生物，从其上清液中得到抗氧化剂。本发明还提供由上述制造方法得到的具有高SOD活性的抗氧化剂。根据本发明的制造方法，能够利用特定微生物，以食品加工业等的副产物豆渣作为培养基的主原料，从而低成本且高效地获得抗氧化剂。