专利名称：一种含有牛蒡苷元的药物组合物的制作方法非小细胞肺癌为最常见的肺癌病理类型，约占肺癌的85%左右。非小细胞肺癌又包括鳞状上皮细胞癌、腺癌和大细胞癌等几种类型，非小细胞癌的癌细胞生长缓慢，恶性程度相对低些，扩散转移发生的较晚。临床上非小细胞肺癌的治疗主要包括外科手术治疗、放射治疗、化学治疗、中医药治疗以及以分子靶向治疗为代表的新型治疗方法，但是非小细胞肺癌对化疗、放疗的敏感性差，寻找有效的治疗方法是当前非小细胞肺癌治疗亟需解决的问题。牛蒡子为菊科植物牛蒡的干燥成熟果实，是常用中药，具有疏散风热、宣肺透疹、 解毒利咽的功能，用于风热感冒、咳嗽痰多、麻疹、风疹、咽喉肿痛、痒腮丹毒、痈肿疮毒。该中药含有木脂素类化合物，主要是牛蒡苷(arctiin)和牛蒡苷元(arctigenin)等。据文献报道，牛蒡苷元比牛蒡苷具有更强的生物活性，比如显著的抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗PAF受体及钙拮抗活性。王潞等在《牛蒡子苷及牛蒡苷子苷元的药理作用研究进展》(中草药，第39 卷第3期，2008年，467-470页)公开了牛蒡苷元具有抗肺癌的活性。以4-硝基喹啉-N-氧化剂为引发剂，以甘油为促进剂诱发大鼠肺癌，进行大鼠肺癌的二相癌变试验，结果表明牛蒡苷元具有抗大鼠肺癌的活性。但是该文献及其它现有文献没有公开牛蒡苷元具有治疗非小细胞肺癌的活性。拓扑异构酶I参与DNA复制、转录、重组、修复等所有关键的细胞核内过程，是抗肿瘤研究的重要靶点，以拓扑异构酶I为靶点的药物在肿瘤化疗中被广泛应用。目前临床使用或处于临床前研究的拓扑异构酶I抑制剂主要分为喜树碱类和非喜树碱类化合物。杨士平等在《喜树碱及其衍生物的历史回顾及展望》(化学，2010年，第67卷第1期第45-60 页)公开了许多尚处于临床阶段的喜树碱衍生物，包括阿非替康(Afeletecan)、贝洛替康 (Belotecan)、二氟替康(Diflomotecan)、依沙替康(Exatecan)、吉马替康(Gimatecan)、 勒托替康(Lurtotecan)、莫瑞替康(Mureletecan)、培加替康(Pegamotecan)、卢比替康 (Rubitecan)0谭慧心在《拓扑异构酶I抑制剂研究进展》(中国药理学通报，25 (4) :436-441, 2009年4月)一文中明确指出“迄今有关各类抑制剂与拓扑异构酶I和/或 DNA的作用机制尚不明确，而且多数拓扑异构酶I抑制剂存在结构复杂、特异性不高、毒性较大的缺点。”拓扑异构酶I抑制剂联合钼类抗癌药物实现对非小细胞肺癌的治疗也已经有所报道。 高玉花等在《和美新联合顺钼二线治疗小细胞肺癌临床观察》(中国肿瘤临床与康复，2004 年第11卷第4期第366页)公开了注射盐酸拓扑替康(也称盐酸托泊替康)联合顺钼治疗小细胞肺癌的技术方案。陈誉等在《伊立替康联合顺钼一线治疗晚期非小细胞肺癌临床观察》(徐州医学院学报，2010年第30卷第3期，第187-189页)公开了盐酸伊立替康联合顺钼治疗晚期非小细胞肺癌的临床试验，给出的治疗方案为伊立替康100mg/m2，第1、8天静脉输注，顺钼75mg/m2，第1、3天静脉输注，每三周重复1次，至少2周期以上可评价疗效及不良反应。在此给药方案中，伊立替康和顺钼不是以药物组合物的形式同时给药的，而是按照顺序依次单独给药的，初治有效率仅为31. 4%。
本发明提供了一种对非小细胞肺癌很有效的抗癌药物组合物，该药物组合物中含有牛蒡苷元和DNA拓扑异构酶I抑制剂。所述的DNA拓扑异构酶I抑制剂为阿非替康、贝洛替康、二氟替康、依沙替康、吉马替康、勒托替康、莫瑞替康、培加替康、卢比替康、伊立替康、 托泊替康或它们的可药用盐。优选地，上述可药用盐包括它们的盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。本发明将牛蒡苷元、阿非替康、贝洛替康、二氟替康、依沙替康、吉马替康、勒托替康、莫瑞替康、培加替康、卢比替康、伊立替康、托泊替康或它们的可药用盐分别单独给药用于治疗小鼠非小细胞肺癌后，发现牛蒡苷元对小鼠的非小细胞肺癌有一定的治疗效果，与模型组相比具有显著性差异。为此本发明提供了牛蒡苷元在医药领域的一种新应用，即牛蒡苷元可以作为治疗非小细胞肺癌的药物使用，牛蒡苷元单独给药用于治疗非小细胞肺癌的有效剂量为0. l-100mg/kg。本发明将上述药物组合物注射给药用于治疗小鼠的非小细胞肺癌，该药物组合物中含有牛蒡苷元和DNA拓扑异构酶I抑制剂，所述的DNA拓扑异构酶I抑制剂为阿非替康、 贝洛替康、二氟替康、依沙替康、吉马替康、勒托替康、莫瑞替康、培加替康、卢比替康、伊立替康、托泊替康或它们的可药用盐。其中牛蒡苷元的有效剂量为0. l-100mg/kg，上述DNA拓扑异构酶I抑制剂为0. 125-100mg/kg。给药时间和给药次数需要根据医生对病情的诊断结果而定。将对小鼠的非小细胞肺癌的治疗方案应用于人身上，所有药物对人的有效剂量可以通过该药物对小鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。优选地，上述DNA拓扑异构酶I抑制剂为盐酸伊立替康。所述的药物组合物含有牛蒡苷元和盐酸伊立替康，牛蒡苷元与盐酸伊立替康的重量比为(0. 0001-10) :1，此时牛蒡苷元和盐酸伊立替康的组合物在抑制非小细胞肺癌方面效果极其显著，与单独给药牛蒡苷元或盐酸伊立替康相比，在抑制非小细胞肺癌方面具有协同作用。优选地，上述DNA拓扑异构酶I抑制剂为盐酸托泊替康，所述的药物组合物含有牛蒡苷元和盐酸托泊替康，牛蒡苷元与盐酸托泊替康的重量比为(0. 025-80) :1，此时牛蒡苷元和盐酸托泊替康的组合物在抑制非小细胞肺癌方面效果极其显著，与单独给药牛蒡苷元或盐酸托泊替康相比，在抑制非小细胞肺癌方面具有协同作用。另外，我们考察了牛蒡苷元与DNA拓扑异构酶I抑制剂的药物组合物的不良反应发生率，通过对试验小鼠毒副作用诸如腹泻、精神萎靡等观察发现，与单独给药同剂量的 DNA拓扑异构酶I抑制剂相比，牛蒡苷元与DNA拓扑异构酶I抑制剂的药物组合物的不良反应发生率降低约16% 23%。这为临床上降低DNA拓扑异构酶I抑制剂药物剂量提供了一种途径，即联合牛蒡苷元同时给药。为了更好的表达该药物组合物的形式，本发明提供了含有牛蒡苷元和DNA拓扑异构酶I抑制剂的微乳制剂，所述的DNA拓扑异构酶I抑制剂为阿非替康、贝洛替康、二氟替康、依沙替康、吉马替康、勒托替康、莫瑞替康、培加替康、卢比替康、伊立替康、托泊替康或它们的可药用盐。所述的微乳制剂可以按照常规制备方法进行制备，制备的微乳制剂的平均粒径为15-80nm。另外，本发明还提供了含有牛蒡苷元和DNA拓扑异构酶I抑制剂的注射制剂，所述的DNA拓扑异构酶I抑制剂为阿非替康、贝洛替康、二氟替康、依沙替康、吉马替康、勒托替康、莫瑞替康、培加替康、卢比替康、伊立替康、托泊替康或它们的可药用盐。所述的注射制剂可以按照常规制剂进行制备。在制备过程中还可以加入抑菌剂、增溶剂或它们的混合物。在需要的情况下，还可以进一步调节PH值至5. 0-7. 0。总之，本发明提供的药物组合物同现有技术相比，具有如下突出的优势第一，现有技术大都采用两种或几种抗癌药物按照顺序先后依次给药，比如伊立替康联合顺钼，而本发明将牛蒡苷元和DNA拓扑异构酶I抑制剂的药物组合物制备成一种药物制剂同时给药，极大地方便患者使用，提高了疾病治疗的顺应性。第二，与单药给药DNA拓扑异构酶I抑制剂、牛蒡苷元相比，本发明提供的药物组合物在治疗非小细胞肺癌方面具有显著的协同抗癌作用。与顺钼联合盐酸伊立替康用药相比，本发明提供的药物组合物，尤其是牛蒡苷元和盐酸伊立替康或盐酸托泊替康的药物组合物在抗非小细胞肺癌活性方面疗效显著，并具有统计学差异。第三，该药物组合物具有较低的毒副作用。由于牛蒡苷元本身毒性很低，牛蒡苷元与DNA拓扑异构酶I抑制剂作为组合物使用，在达到同样的抗癌疗效的情况下，可以显著降低DNA拓扑异构酶I抑制剂的用量，这样可以进一步降低由DNA拓扑异构酶I抑制剂带来的毒副作用。与单独给药同剂量的DNA拓扑异构酶I抑制剂相比，牛蒡苷元与DNA拓扑异构酶I抑制剂的药物组合物的不良反应发生率降低约16% 23%。进一步描述本发明，本发明不仅仅限于以下实施例。实施例1本发明药物组合物微乳制剂牛蒡苷元|0. QQig
盐酸伊立替康_IOg_
薄荷油_35g_
聚氧乙烯-23-月桂基醚 60g_
1，2-丙二醇|30g -
制备工艺称取处方量薄荷油、聚氧乙烯-23-月桂基醚、1，2_丙二醇，混合后搅拌均
勻，然后加入牛蒡苷元、盐酸伊立替康溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，
即为牛蒡苷元与盐酸伊立替康微乳浓缩物。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为15nm。实施例2本发明药物组合物微乳制剂_
碌苷元[ΤΓ
盐酸伊立替康_IOg
氢化椰油甘油酯_5g
月桂酰基聚乙二醇-32-甘油酯 20g
1，2-丙二醇_5g
^Z二醇 3350|20g"
5制备工艺称取处方量氢化椰油甘油脂、月桂酰基聚乙二醇-32-甘油酯、1，2_丙二醇、 聚乙二醇3350，混合后搅拌均勻，然后加入牛蒡苷元、盐酸伊立替康溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元与盐酸伊立替康微乳浓缩物。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为40nm。实施例3本发明药物组合物微乳制剂


本发明属于医药领域，具体涉及一种含有牛蒡子苷元的药物组合物，它还含有DNA拓扑异构酶I抑制剂。本发明提供了含有该药物组合物的微乳制剂和注射剂。与单药相比，本发明提供的药物组合物在抑制非小细胞肺癌方面具有协同作用。