专利名称：一种小儿宣肺止咳颗粒组合物及其制备方法和质量控制方法小儿感冒属临床中比较常见和多发的一种疾病，由于小儿体质虚弱，易患感冒，临床主要表现为发热、咳嗽、鼻塞等症。目前药物治疗主要为西医治疗和中医治疗；西医治疗主要以抗生素、非留体抗炎药、抗组胺药为主，这些药品副作用较常见，有的还有严重的不良反应，机体易产生耐受性，对小儿的健康很不利。中医在治疗小儿感冒方面，主要以中成药为主，目前市场上大多数治疗效果不能令人满意，不能满足临床需要。目前现有技术，中国专利公开了(公开号为CN 1094629A) 一种“小儿益气解毒冲剂及制备方法”的处方及工艺，本发明人经过多年的研究，发现用其工艺制得的制剂存在 疗效不理想，治愈率低，易复发；工艺较粗，稳定性差，有效成分含量低，易吸潮变质等缺陷。为解决上述现有技术所存在的缺陷，在近几年的时间里，我们通过发掘祖国丰富的中医药资源，结合大量的临床药效学研究，发明了一种小儿宣肺止咳颗粒组合物，本产品 “小儿宣肺止咳颗粒”是在其(公开号为CN 1094629A)工艺的基础上，通过大量的实验摸索，发现将其工艺中的水提改成90°C水温浸后，有效成分的提取率显著提高，我们并对麻黄的醇提浓度及水提部分的醇沉浓度进行了研究，发现麻黄用80%乙醇回流提取比用70% 乙醇提取效果好，60%乙醇醇沉比用70%乙醇醇沉效果好；我们按照新工艺制成了颗粒剂，与按照中国专利公开的(公开号为CN 1094629A) 一种“小儿益气解毒冲剂及制备方法”的处方及工艺制备而成的冲剂相比，其临床药效学实验效果显著提高，工艺更加合理， 药物有效成分含量高，安全无毒副作用。
本发明的目的在于提供一种工艺先进，疗效更为显著的小儿宣肺止咳颗粒组合物及其制备方法和质量控制方法。本发明小儿宣肺止咳颗粒组合物，其配方组成如下麻黄105g 竹叶防风210g 西南黄芩210g桔梗105g 芥子105g苦杏仁105g葶苈子105g 马兰210g黄芪210g山药 105g 山楂 210g甘草 105g;本发明小儿宣肺止咳颗粒组合物的制备方法如下以上十二味，麻黄粉碎，加80%乙醇回流提取三次，每次1. 5小时，加醇量分别为 5、4、3倍，合并醇提液，减压回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.08(80 85°0，备用；其余十一味粉碎，加90°C水温浸三次，每次1小时，加水量分别为8、6、6倍，合并温浸液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 05 (80 85°C )，待冷至室温，加入乙醇使含醇量达60%，搅拌均勻，静置M小时，取上清液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1. 21 (80 85°C )，与上述麻黄稠膏混合，继续浓缩至相对密度为1. 31 (80 85°C )，加蔗糖、糊精适量，制成颗粒，干燥，制成lOOOg，分装，即得。为了有效控制本发明产品的质量，发明人还制定了其质量控制方法，包括含量测定部分和定性鉴别部分。定量方法如下含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0. 05mol/ L磷酸二氢钾缓冲液(pH3. 5，精密称取干燥至恒重的磷酸二氢钾细粉6. 8050g,置IOOOml 量瓶中，用适量水溶解并稀释至近刻度，加磷酸0. 5ml，加水至刻度，摇勻，置冰箱中保存，备用M24 76)为流动相检测波长为275nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于7000。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加50%乙醇制成每Iml含0. Img 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混勻，研细，取0.5g，精密称定，精密加入50%乙醇25ml，超声处理(功率250W，频率20kHz) 20分钟，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。本品每袋含西南黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于16mg。定性鉴别方法可以包含以下中的一种或全部(1)取本品30g，研细，加醋酸乙酯40ml，超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取白芥子对照药材、南葶苈子对照药材各2g，分别加石油醚(60 90°C ) 20ml，超声处理1小时，倾去石油醚液，药渣加甲醇20ml，超声处理1 小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各10μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-丙酮(10 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与南葶苈子对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热5 7分钟，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与白芥子对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 (2)取本品20g，研细，加浓氨试液10ml，放置2小时，加氯仿40ml，超声处理1小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加盐酸乙醇溶液(1 — 20) 20ml使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各 10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液G 1 0. 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热约10分钟。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取山楂对照药材0. 5g，加醋酸乙酯10ml，超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液。吸取鉴别(1)项下供试品溶液及上述对照药材溶液各10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸OO 4 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C 加热5 10分钟，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下，显相同颜色的斑点；紫外光灯下，显相同颜色的荧光斑点。(4)取本品15g，研细，加水100ml，超声处理5分钟，离心，取上清液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干， 残渣加甲醇5ml使溶解，离心，取上清液浓缩至约Iml，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置的下层溶液为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下，显相同颜色的斑点；紫外光灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点。本发明小儿宣肺止咳颗粒组合物的功能主治为宣肺解表，清热化痰。用于小儿外感咳嗽，痰热壅肺所致的咳嗽痰多、痰黄粘稠、咳痰不爽。本发明小儿宣肺止咳颗粒组合物的制备方法是经过深入的研究和筛选试验得来的。中国专利(公开号为CN 1094629A)的制备方法我们定为原工艺，方便以下试验研究。1、水提工艺参数的研究原工艺水提工艺为其余十一味药粉碎，加水煎煮多次，煎煮液过滤，合并煎液，浓缩至相对密度为1. 00-1. 10，冷至室温，加等量70 %乙醇充分搅拌均勻，静置，取上清液回收乙醇，继续浓缩至相对密度为1. 10-1. 30的浸膏。原制备方法中明确了其余十一味药材为水煎煮多次，经过我们大量的研究发现， 水煎煮由于温度过高，有效成分的提取很低，从而使得药效大大降低，为寻找一种更好的工艺，我们对原水提工艺进行了考察。1. 1考察方法以浓缩液中的甘草酸及黄芩苷的含量为指标，筛选水提工艺的温度。1.2样品溶液的制备①原水提工艺样品制备我们取中国专利(公开号为CN 1094629A)公开处方各药材用量的低点，并给低点同时除以1.91，方便对比；具体为取原水提工艺1个处方量的竹叶防风209. 4g、西南黄芩209. 4g、桔梗104. 7g、白芥子104. 7g、杏仁104. 7g、葶苈子 104. 7g、马兰209. 4g、黄芪209. 4g、山药107. 3g、山楂209. 4g、甘草104. 7g共^^一味药材粉碎，加水煎煮二次，煎煮液过滤，合并煎液，浓缩至相对密度为1.00-1. 10，冷至室温，加等量 70%乙醇充分搅拌均勻，静置，取上清液回收乙醇，浓缩至IOOOml，定为0号。②本发明小儿宣肺止咳颗粒组合物水提工艺的制备分别取本发明小儿宣肺止咳颗粒水提工艺4个处方量的竹叶防风210g、西南黄芩210g、桔梗105g、芥子105g、苦杏仁 105g、葶苈子105g、马兰210g、黄芪210g、山药105g、山楂210g、甘草105g共i^一味药材粉碎，分别定为1号，2号，3号，4号；1号用95°C的水温浸，2号用90°C的水温浸，3号用85°C 的水温浸，4号用80°C的水温浸；1号，2号，3号，4号分别温浸三次，每次1小时，加水量分别为8、6、6倍，合并温浸液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 05(80 85°C )，待冷至室温，加入乙醇使含醇量达60%，搅拌均勻，静置M小时，取上清液回收乙醇，分别浓缩至IOOOml ； 得1号浓缩液1000ml，2号浓缩液1000ml，3号浓缩液1000ml，4号浓缩液1000ml。1. 3检验指标浓缩液中甘草酸及黄芩苷的含量1. 4检验方法①样品中甘草酸的含量测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67 33 1)为流动相；检测波长为250nm.理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000.对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇勻，即得(每Iml含甘草酸单铵盐对照品0. 2mg折合甘草酸 0. 1959mg)。供试品溶液的制备分别精密量取O号，1号，2号，3号，4号样品各20ml，分别置 50ml容量瓶中，加流动相适量，超声处理(功率250w，频率20kHz) 30分钟，取出，放冷，加流动相至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得O号，1号，2号，3号，4号样品溶液。测定方法分别精密吸取对照品溶液与O号、1号、2号、3号、4号样品溶液各 10 μ 1.注入液相色谱仪测定，即得。②样品中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0. 05mol/ L磷酸二氢钾缓冲液(pH3. 5，精密称取干燥至恒重的磷酸二氢钾细粉6. 8050g,置IOOOml 量瓶中，用适量水溶解并稀释至近刻度，加磷酸0. 5ml，加水至刻度，摇勻，置冰箱中保存，备用M24 76)为流动相检测波长为275nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于7000。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加50%乙醇制成每Iml含0. Img 的溶液，即得。供试品溶液的制备分别精密量取O号，1号，2号，3号，4号样品各1ml，分别置 50ml容量瓶中，分别精密加入50%乙醇适量，超声处理(功率250W，频率20kHz) 20分钟，取出，放冷，加50%乙醇至刻度，滤过，取续滤液，即得O号，1号，2号，3号，4号样品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与O号、1号、2号、3号、4号样品溶液各10μ 1， 注入液相色谱仪，测定，即得。1.5考察结果，见下表1。表1水提工艺的考察本发明涉及一种小儿宣肺止咳颗粒组合物及其制备方法和质量控制方法，该组合物是由麻黄、竹叶防风、西南黄芩、桔梗、芥子、苦杏仁、葶苈子、马兰、黄芪、山药、山楂、甘草共十二味中药制备而成；该药具有宣肺解表，清热化痰的功效；主要用于小儿外感咳嗽，痰热壅肺所致的咳嗽痰多、痰黄粘稠、咳痰不爽。其临床药效学试验效果显著，生物利用度高，且无任何毒副作用。