一种降低结直肠癌术后复发转移的中药复方制剂及其制备方法[0002]进入21世纪以来，随着人民生活水平的提高结直肠癌的发病率正在大幅度的提高，据统计在我国的发病率比六七十年代有倍增的趋势，占全部恶性肿瘤第4位。近年来，随着结直肠癌病原学分子水平的研究及分子生物学的发展，越来越多的学者认为结直肠癌都是外环境(外源性致癌物/前致癌物)和内环境(遗传易感性)共同作用的结果，但各自的影响因素不尽相同。主要集中于饮食、遗传、生活方式方面，也有涉及药物。随着我国经济的发展，人民饮食结构的改变，高脂肪、高蛋白质饮食成分的增加，可以预见结直肠癌的发病率将近一步提高。[0003]目前，手术切除为结直肠癌的根治性治疗措施，但50%结直肠癌患者于手术根治后2年内可出现复发或转移，而只有小于15%患者发生单一部位转移且有再次根治可能。因此，手术后复发转移成为影响结直肠癌患者术后生存率的至关重要的因素。[0004]现今降低手术后复发转移的治疗局限于全身化疗和较为先进的分子靶向治疗。由于化疗严重的毒副作用，靶向药物治疗由于费用等造成使用的局限型，严重影响了患者生存率的提高，给社会和人民群众带来了极大的经济负担，成为目前提高结直肠癌治疗的瓶颈。[0005]我国是中医药发源地，中医药有着悠久的历史，已经渗入到人们的生活中，有较高的接受度。中医药预防结直肠癌手术后复发转移已有一些临床报道，也证明了中医药综合治疗在预防肿瘤转移方面有降低化疗的毒副反应、影响细胞周期、诱导细胞凋亡、调控基因表达、及抗诱变、抑制肿瘤血管生成、改善免疫功能，延长患者生存时间，改善患者生活质量等作用。[0006]结直肠癌在中医学中多属“肠积”、“肠癖”、“癥瘕”等范畴，其病因多为饮食不节，嗜食肥甘厚味，伤及脾胃，脾胃虚弱，健运失司，正气亏虚，而成瘤块。如能根据中医理论，针对结直肠癌的发病机理，进行辨证配伍组方，可以达到标本兼治的目的。
[0008]本发明的另一目的在于提供上述降低结直肠癌术后复发转移的中药复方制剂的制备方法。
[0009]本发明所提供的降低结直肠癌术后复发转移的中药复方制剂，由下列重量份的中药原料药制成:党参10-30份，茯苓10-15份，白术10-15份，土茯苓10-15份，菝葜10-30份，八月札10-15份，鸡内金5-15份，陈皮3-10份。
[0010]本发明组方严谨、科学、合理，符合中医理论。其中党参健脾益气，生津养血；茯苓健脾渗湿；白术健脾燥湿；土茯苓解毒除湿；菝葜祛风利湿，解毒消痈；八月札理气散结，活血止痛；鸡内金健胃消食，软坚散结；陈皮理气健脾，燥湿化痰。各药物在作用上相辅相成，具有协同作用，共奏健脾益气，扶正解毒之功，致力于结直肠癌术后综合治疗，降低其复发转移。
[0011]本发明所涉及的原料药均为天然中草药，均为中国药典2000年版一部所收载中药，并符合药典质量要求。取材容易，配制简便，药源广，成本低。本发明遵循中医处方用药原则，各种组分药物采用水煎服用。
[0012]优选地，本发明的降低结直肠癌术后复发转移的中药复方制剂，由下列重量份的中药原料药制成:党参10份，茯苓15份，白术10份，土茯苓15份，菝葜15份，八月札12份，鸡内金12份，陈皮9份。
[0013]本发明还提供上述降低结直肠癌术后复发转移的中药复方制剂的制备方法，包括以下步骤:
[0014](1)称取下述重量份的各中药原料药党参10-30份，茯苓10-15份，白术10_15份，土茯苓10-15份，菝葜10-30份，八月札10-15份，鸡内金5-15份，陈皮3_10份，备用；
[0015](2)取步骤⑴中各中药原料药的一半量，加水煎煮两次，过滤、合并煎煮液，浓缩干燥得干浸膏，对干浸膏粉碎得到浸膏细粉；
[0016](3)取步骤(1)中各中药原料药的另一半量，粉碎后灭菌，与步骤(2)中制得的浸膏细粉混和后，进一步加入药学上可接受的辅料，以常规的中药制剂方法，制备成本发明的中药复方制剂的常规剂型。
[0017]其中，上述步骤(2)中第一次煎煮时:加水3~8倍量，浸泡半小时后，煎煮45分钟；第二次煎煮时:加水3~8倍量，煎煮30分钟。步骤(3)中的灭菌方法为Co60辐照灭菌，辐照剂量8k。
[0018]本发明采用各种常规的制剂工艺，加入成型辅料或矫味辅料，可将本发明所提供的中药复方制剂制成颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液等药物剂型。其中，本发明所述的药用辅料选自甘露醇，乳糖，蔗糖粉，淀粉，硬脂酸镁，阿斯巴甜，薄荷脑和/或甜橙油香精。
[0019]此外，以本发明所述重量份的中药原料药，采用常规水煎法制成的水煎剂也同样能够达到本发明的治疗效果。
[0020]经动物药效学实验结果表明，本发明的中药复方制剂参与的治疗方案与单纯化疗相比较，能降低降低血清VEGF、P53、COX-2、survivin的表达。
[0021]经中医症候积分、实验指标、生活质量指标观察等临床研究结果显示:本发明的中药复方制剂效果显著可靠，药性平和，未出现毒副作用，能够显著降低结直肠癌术后转移和改善患者的生活质量。



[0022]图1是动物实验中western blot检测蛋白的蛋白电泳比较图。

[0024]动物实验
[0025]1.动物:4~5周龄BALB/c雌性裸鼠60只，体重20~24g(上海市实验动物中心)，于无特定病原体(SPF)环境饲养。
[0026]2.方法:
[0027]每只裸鼠皮肤消毒后以Iml注射器分别于颈背部皮下注射0.2ml LOVO细胞细胞悬液，接种细胞2 X IO6/只，共60只，待移植瘤平均直径约5mm后(细胞种植后第16天)，裸鼠以随机数字表法分为空白对照组(生理盐水灌胃)、中药组(本药物制剂)、化疗组(5-fu，5-fu+奥沙利钼)，中药加化疗组(5-fu+本药物制剂，5-fu+奥沙利钼+本药物制剂)，每组10只。本药物制剂以相当于人临床使用量的等效剂量连续灌胃14天，5-fu及奥沙利钼采用腹腔注射，隔天一次，共5次，剂量按照小鼠和人的体表面积公式换算。第16天处死并采集瘤体、瘤重、体重、
[0028]组织以及血清标本。
[0029]3.检测指标
[0030]I)免疫组化检测Survivin、P53, C0X-2、VEGF表达和微血管生成；
[0031 ] 2) RT-PCR 法检测组织 C0X_2mRNA、P53RNA 和 VEGFmRNA ；
[0032]3) Western blot 检测 Survivin、P53, C0X-2、VEGF 蛋白。
[0033]结果显示如下:
[0034]表一:裸鼠肿瘤组织免疫组化检测survivin、P53、C0X-2、VEGF阳性面积各组间比较
[0035]