一种治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物的制作方法【技术领域】，具体而言，涉及一种中药提取物，尤其涉及一种治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物。[0002]口腔扁平苔藓(oral lichenplanus，0LP)是一种病因不明的T细胞介导的炎症性皮肤、黏膜疾病，是口腔黏膜常见病之一。现代医学也对口腔扁平苔藓病因没有明确，认为可能与精神因素、感染、药物、慢性病灶、全身系统疾病、酶异常、内分泌异常或气滞血瘀等有关。该病好发于中年人，女性多于男性。目前的局部治疗方法包括抗生素溶液含漱、损害内注射或外用糖皮质激素、0.1%维A酸软膏。但长期外用糖皮质激素经常产生局部萎缩、感染、毛细血管扩张等不良反应，抗生素溶液含漱和0.1%维A酸软膏的疗效均不理想。[0003]总而言之，目前临床上尚无十分有效的针对口腔扁平苔藓的治疗药物，因此，寻找有效的干预药物有着非常重要的理论意义和应用价值。
[0004]本发明人根据民间偏方制备了一种水提物冻干粉，并将该药物冻干粉给予大鼠灌胃后获得含药血清，令人意想不到的是，含药血清可促进大鼠颊黏膜成纤维细胞快速增值。基于上述发现，本发明的目的在于提供一种治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物。[0005]本发明的目的是 这样实现的:[0006]一种治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物，包含活性成分和药用辅料，所述的活性成分是将糯稻根与花生壳混合后水提而得。
[0007]优选地，如上所述治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物，其中所述的活性成分是将糯稻根与花生壳按重量比为3-6:1混合后水提而得。
[0008]进一步优选地，如上所述治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物，其中所述的活性成分是将糯稻根与花生壳按重量比为5:1混合后水提而得。
[0009]再进一步优选地，如上所述治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物，其中所述水提的方法为:将干燥糯稻根与花生壳混合后用乙醇加热回流提取，过滤，滤液弃掉后的剩余药渣，加水加热回流提取，再过滤，滤液浓缩干燥。
[0010]本发明所述治疗口腔黏膜扁平苔藓的药物组合物可以被制成口服制剂，所述的口服制剂是颗粒剂、片剂、胶囊。
[0011]需要说明的是,本发明所采用的糯稻根选用禾本科稻属植物糯稻Oryza sativaL.var.glutinosa Mat sum.的干燥根状莖及须根；花生壳选用豆科落花生属植物落花生Arachis hypogaea L.果实的荚壳。
[0012]与现有技术相比，本发明具有如下优点和显著进步:本发明的药物组合物作用于大鼠颊黏膜成纤维细胞，可以促进该细胞增殖，大大增加了该细胞对病变区域的修复能力，加速了病变的愈合。在临床应用中的观察结果表明，中药苔藓合剂治疗扁平苔藓，疗效满意，副作用小，具有安全、持久、稳定的特点，起到调节全身状况、改善和消除局部病损的作用。
具体实施例
[0013]以下通过
[0014]实施例1
[0015]干燥糯稻根1.2kg和花生壳0.2kg，加入20L的80%乙醇加热回流提取2h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入15L的80%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入20L纯水加热回流分别提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，冷冻干燥抽真空，得冻干粉。
[0016]实施例2
[0017]干燥糯稻根1.2kg和花生壳0.4kg，加入22L的85%乙醇加热回流提取2h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入16L的85%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入20L纯水加热回流分别提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，冷冻干燥抽真空，得冻干粉。
[0018]实施例3
[0019]干燥糯稻根1.2kg和花生壳0.24kg，加入20L的80%乙醇加热回流提取2h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入15L的80%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入20L纯水加热回流分别提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，冷冻干燥抽真空，得冻干粉。
[0020]实施例4糯稻根花生壳水提物对颊`黏膜成纤维细胞增殖的影响
[0021]取6周龄SD雄性大鼠6只，3%戊巴比妥钠(lml/kg)麻醉后，碘伏消毒颊黏膜，于颊黏膜处梭形切口，取0.2cmX0.2cm大小被覆黏膜固有层组织，放入4°C预冷的含1000 μ g/ml青霉素、500 μ g/ml链霉素PBS中清洗2遍。将分离的组织块在小平皿中剪成
0.5mm3大小，加入5ml的10% FBS的DMEM，用吸管吹打分散组织块，将组织块与培养液一同移入25cm2培养瓶中，将组织块在培养瓶中均匀分布，置37°C、5% CO2的二氧化碳培养箱中培养，4d后第1次观察换液，去除漂浮的未贴壁的组织，此后每3天换液I次，待细胞铺满培养瓶底时行传代培养。
[0022]成纤维细胞传代培养:用吸管将培养液吸去，培养瓶中加入消化液(0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTAl:3)2ml，轻轻摇晃培养瓶，使消化液充分接触细胞，37°C下消化2min，倒置相差显微镜下见细胞间隙变大、体积变圆、镜下胞体变亮，加入10% FBS的DMEM中止消化，吸管轻轻吹打，进行分瓶传代。免疫组化进行细胞波形丝蛋白和细胞角蛋白抗体荧光染色，做细胞来源鉴定，结果显示成纤维细胞波形丝蛋白免疫染色阳性，细胞胞浆着色(棕色)，胞核不着色。角蛋白免疫染色阴性，胞浆胞核均不着色，说明培养细胞为来源于中胚层的成纤维细胞。六孔板中放盖玻片，细胞爬片(24h) ;70%乙醇固定30min，PBS清洗2min ;
0.1% TritonX-1OO浸泡20min ；PBS清洗3次，每次2min ;3%双氧水室温孵育IOmin ；10%正常羊血清室温孵育IOmin ;倒掉血清滴加PBS稀释的一抗(1: 100)，4°C湿盒孵育12h ；PBS清洗3次，每次2min ;滴加FITC标记山羊抗兔的二抗，4°C湿盒孵育12h ;PBS清洗3次，每次2min ;甘油封片、镜检。
[0023]实验分为含药血清组和无药血清组。含药血清组血清来自6只连续7d灌胃给药的SD大鼠，受试药物为本发明实施例3制备的水提物冻干粉，给药剂量为80mg/kg/d，每日一次，最后一日间隔2h再次给药,于末次给药后Ih腹主动脉采血,离心3000r/min, 20min取上清，滤菌器(0.20 μ m)抽滤除菌后分装，_20°C保存备用。无药血清组血清来自6只SD大鼠，给予等量纯水代替药物按上述方法制备无药血清。
[0024]将第4代大鼠颊黏膜成纤维细胞经胰蛋白酶消化、显微镜下计数，调整细胞密度为5X108/L，每孔100 μ L接种于96孔细胞培养板中，37°C、5 % CO2培养箱中培养2d，根据实验设计将培养液置换成上述两种血清继续培养，每组6个复孔分别培养24h、48h、72h，各孔中加入5mg/mL MTT20 μ L，继续培养4h吸出上清，每孔中加入100 μ L二甲基亚砜，摇床振荡15min使结晶充分溶解，用酶联免疫测试仪上测定490nm的每孔细胞吸光度。
[0025]根据表1的试验结果可以看出，大鼠颊黏膜成纤维细胞分别在含药和无药血清中培养后，细胞形态相同，两组细胞随着培养时间的延长，细胞数量逐渐增多，含药血清组增加更加显著，与无药血清组差异有统计学意义。
[0026]表1大鼠颊黏膜成纤维细胞在两种血清中培养后细胞增殖情况比较
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