转基因玉米Bt11液相芯片检测方法[0002]转基因玉米Btll为兼具抗虫害及耐除草剂两种特性的品系，其转入的抗虫基因为Bt系列毒蛋白基因的CrylAb抗虫基因，转入的耐草丁膦除草剂基因是草丁膦乙酰转移酶基因，在我国已批准进口用作加工原料，是转基因玉米中的代表性品系。目前，一些国家要求检测进口产品中是否含有转基因成分，有的还要求查明来自哪个转基因品系，该品系是否获准进入本国，例如，中国、欧盟、日本、韩国等国家和组织要求对其进行标识。因此，针对性的检测转基因玉米品系就显得非常重要。目前，在基因水平上检测转基因作物的技术已有很多，如PCR、基因芯片(Microarrays)和Real-time PCR等。这些检测方法已经在日常检测工作中广泛应用。但由于转基因作物的种类多、数量大，一些转基因产品经过深加工、各种条件处理与保存后，转基因成分部分或完全降解，所以检测难度大。因此，需要建立更加特异和灵敏的高通量检测方法。[0003]Luminex液相芯片检测技术是一种全新的快速高通量检测技术，也是唯一被美国食品与药物管理局(FDA)批准用于临床诊断的新型生物芯片产品。该技术集流式细胞技术、荧光编码微球、激光、数字信号处理和传统的生化技术于一体，具有独特的优点:检测需要样本少；相对于固相芯片，反应在液态体系中进行，大大缩短检测时间；关键是可灵活检测上百种分子，满足高通量检测需要。
[0004]本发明的目的是提供一种新型、准确、特异性强，灵敏度高的转基因玉米Btll液相芯片检测方法。[0005]为了实现本发明目的，本`发明提供一种用于检测转基因玉米Btll的引物对和探针，所述引物对为:[0006]正向引物Bt IIF: 5，-TATCATCGACTTCCATGACCA-3 ’，[0007]反向引物BtllR:Biotin-5，-AGCCAGTTACCTTCGGAAAA-3’ ；
[0008]所述探针为BtllProbe:
[0009]NH2-C12-5，-TGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAG-3，。
[0010]本发明还提供一种含有上述引物对和探针的用于检测转基因玉米Btll的试剂盒。
[0011]优选地，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液中的一种或多种。更优选地，所述试剂盒还包括标准阳性模板。
[0012]更优选地，所述试剂盒还包括阳性验证探针:Biotin-5’ -CTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCA-3，。[0013]本发明进一步提供一种转基因玉米Btll液相芯片检测方法，包括以下步骤:1)提取待测玉米的总DNA ;2)以步骤I)中提取的DNA为模板，以上述BtllF和BtllR为引物，进行PCR扩增反应；同时以水为模板设置空白对照；3)将PCR产物与包被有探针BtllProbe的微球混合孵育，反应结束后，置于液相芯片检测仪上进行分析。若检测的中位荧光值(MFI)大于空白对照的中位荧光值3倍以上，则判定该待测玉米为转基因玉米Btll品系。
[0014]PCR反应体系以50 μ L计为:
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