用于经鼻递送的肽药物制作方法

威廉·斯特恩

2012年3月14日

2010年3月30日

2009年4月2日

优尼金实验室公司

A61F13/00GK102378605SQ201080015150

经鼻 递送 药物 用于

1.用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物，其包含(1)所述活性剂；和(2)生物利用度增强剂，其选自脂肪酸、脂肪酸的糖酯及其混合物2.权利要求1的药物组合物，其中脂肪酸和脂肪酸的糖酯两者均存在3.权利要求1的药物组合物，其中所述脂肪酸在其分子结构中具有至少8个连续碳原子的疏水区4.权利要求1的药物组合物，其中所述脂肪酸在其分子结构中具有10至14个连续碳原子的疏水区5.权利要求1的药物组合物，其中所述药物组合物是缓冲PH不低于3.0并且不高于 6. 5的水溶液6.权利要求1的药物组合物，其中所述组合物还包含柠檬酸类生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐及其混合物7.权利要求6的药物组合物，其中所有基于柠檬酸类的生物利用度增强剂的总联合浓度不低于5mM并且不高于50mM8.权利要求2的药物组合物，其中所述组合物还包含柠檬酸类生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐及其混合物9.权利要求8的药物组合物，其中所有基于柠檬酸类的生物利用度增强剂的总联合浓度不低于5mM并且不高于50mM10.权利要求1的药物组合物，其中所述肽包含酰胺基团作为其分子结构一部分11.权利要求1的药物组合物，其中所述脂肪酸选自月桂酸和油酸12.权利要求1的药物组合物，其中所述糖酯选自蔗糖月桂酸酯、葡萄糖月桂酸酯和果糖月桂酸酯13.权利要求2的药物组合物，其中所述脂肪酸是油酸并且所述糖酯是蔗糖月桂酸酯14.用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物，其包含(1)所述活性剂；(2)脂肪酸的糖酯；和(3)酰基肉碱15.权利要求14的药物组合物，其中所述糖酯是蔗糖月桂酸酯16.权利要求14的药物组合物，其中所述糖酯在其分子结构中具有至少8个连续碳原子的疏水区17.权利要求14的药物组合物，其中所述糖酯在其分子结构中具有10至14个连续碳原子的疏水区18.权利要求14的药物组合物，其中所述药物组合物是缓冲pH不低于3.0并且不高于 6. 5的水溶液19.权利要求14的药物组合物，其中所述组合物还包含柠檬酸类生物利用度增强剂， 其选自柠檬酸、柠檬酸盐及其混合物20.权利要求20的药物组合物，其中所有基于柠檬酸类的生物利用度增强剂的总联合浓度不低于5mM并且不高于50mM21.权利要求16的药物组合物，其中所述组合物还包含柠檬酸类生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐及其混合物22.权利要求21的药物组合物，其中所有基于柠檬酸类的生物利用度增强剂的总联合浓度不低于5mM并且不高于50mM23.权利要求14的药物组合物，其中所述肽包含酰胺基团作为其分子结构一部分24.权利要求14的药物组合物，其中所述酰基肉碱选自L-月桂酰基肉碱和豆蔻酰基肉碱25.权利要求14的药物组合物，其中所述糖酯选自蔗糖月桂酸酯、葡萄糖月桂酸酯和果糖月桂酸酯26.权利要求14的药物组合物，其中所述酰基肉碱是L-月桂酰基肉碱并且其中所述糖酯是蔗糖月桂酸酯27.用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物，其包含(1)所述活性剂；(2)油酸；(3)蔗糖月桂酸酯；(4)基于柠檬酸类的生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐以及柠檬酸和柠檬酸盐的混合物；其中所述药物组合物是缓冲PH不低于3. 0并且不高于6. 5的水溶液28.用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物，其包含(1)所述活性剂；(2)L-月桂酰基肉碱；(3)蔗糖月桂酸酯；(4)基于柠檬酸类的生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐以及柠檬酸和柠檬酸盐的混合物；其中所述药物组合物是缓冲PH不低于3. 0并且不高于6. 5的水溶液29.权利要求1的药物组合物，其中所述肽活性剂是PTH(1-34)NH230.权利要求14的药物组合物，其中所述肽活性剂是PTH(1-34)NH231.权利要求27的药物组合物，其中所述肽活性剂是PTH(1-34)NH232.权利要求观的药物组合物，其中所述肽活性剂是PTH(1-34)NH2

本发明涉及在包含经鼻生物利用度增强剂的制剂中包含肽活性剂的经鼻药物产品特别地，在一些经鼻肽制剂中使用柠檬酸类、脂肪酸、脂肪酸的糖酯或酰基肉碱，尤其使用了本文讨论的优选组合相关领域描述考虑到其大小和分子结构，肽经常通过皮下或肌内注射施用由于肽倾向于经组织的吸收差并且易于被体液降解，其他施用途径会有技术难度例如，由于肽活性剂被胃或肠蛋白酶降解，经口施用可产生问题由于所述活性剂的低生物利用度，经鼻递送也经常产生问题甚至在可以经鼻递送的情况下，鉴于肽穿过鼻粘膜的难度造成的低生物利用度，需要高浓度的活性剂来提供临床效果，所以会有不期望的高成本在美国专利6，440，392中，公开了具有某些浓度的柠檬酸和/或柠檬酸盐的经鼻鲑鱼降钙素制剂在美国专利5，759，565中，公开了包含苯扎氯铵的经鼻降钙素制剂然而仍需要进一步改进鼻粘膜耐受性良好的制剂中经鼻施用的肽的生物利用度发明概述因此本发明的一个目的是提供在经鼻施用时提供良好的生物利用度并使肽的血液浓度显著升高的肽药物组合物本发明的另一目的是提供在对鼻粘膜施用时具有良好耐受性的肽药物组合物在一个实施方案中，本发明提供了用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物， 其包含(1)所述活性剂；和(2)生物利用度增强剂，其选自脂肪酸、脂肪酸的糖酯及其混合物在另一实施方案中，本发明提供了用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物， 其包含(1)所述活性剂；(2)脂肪酸的糖酯；和(3)酰基肉碱在另一实施方案中，本发明提供了用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物， 其包含(1)所述活性剂；(2)油酸；(3)蔗糖月桂酸酯；(4)基于柠檬酸类的生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐以及柠檬酸和柠檬酸盐的混合物；其中所述药物组合物是缓冲pH不低于3. 0并且不高于6. 5的水溶液在另一实施方案中，本发明提供了用于对肽活性剂进行经鼻递送的药物组合物， 其包含(1)所述活性剂；( L-月桂酰基肉碱；(3)蔗糖月桂酸酯；(4)基于柠檬酸类的生物利用度增强剂，其选自柠檬酸、柠檬酸盐以及柠檬酸和柠檬酸盐的混合物；其中所述药物组合物是缓冲pH不低于3. 0并且不高于6. 5的水溶液本发明通过以下对一些优选实施方案的非限制性描述进行进一步解释发明详述可以获益于本发明的经鼻递送的肽活性成分包括具有生理学活性并且具有多个氨基酸和至少一个肽键作为其分子结构一部分的任何治疗剂除天然氨基酸外，所述氨基酸可以是D-氨基酸或非天然氨基酸，它们的一些实例在下文中讨论所述分子结构还可以包含其他取代基或修饰例如，鲑鱼降钙素在C-末端被酰胺化，作为下文实验数据对象的优选的甲状旁腺激素截短物也是如此一些肽可以在天然形式中未被酰胺化的位置被酰胺化，或可以进行其他修饰本发明的肽活性化合物包括但不限于胰岛素、后叶加压素、降钙素(不只包括鲑鱼降钙素，还有其他降钙素)其他实例包括降钙素基因相关肽、甲状旁腺激素(包括其酰胺化或未酰胺化的截短物，如PTH1-31-酰胺或PTH1-34-酰胺)、去氨加压素、促黄体生成激素释放因子、促红细胞生成素、组织纤溶酶原激活蛋白、人生长激素、促肾上腺皮质激素、多种白介素、脑啡肽等本领域已知许多其他实例人造肽和天然肽两者均可以按照本发明进行经鼻递送因此，在一些实施方案中， 所述肽活性化合物可以是胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-l,GLP-l)或其类似物、去氨加压素(DDAVP)、亮丙瑞林、2，6- 二甲基酪氨酸-D-精氨酸-苯基丙氨酸-赖氨酸酰胺(DMT-DALDA)J￡^ft (ρ印tidomimetic)等本发明所用的肽可以是游离形式或者是可药用盐或复合物形式，例如可药用酸加成盐形式这些盐和复合物是已知的，并且倾向于具有与游离形式等同程度的活性和耐受力用于本发明的适合的酸加成盐形式包括例如盐酸盐和醋酸盐生物利用度的增强生物利用度的增强用选自以下的一类或多类增强剂来实现脂肪酸、脂肪酸的糖酯、酰基肉碱和柠檬酸类除由于酰基肉碱和脂肪酸之间因不期望的相互作用而不将它们一起使用外，优选使用上述增强剂的组合每类中的优选分子结构在下文中讨论脂肪酸不旨在受理论约束，认为脂肪酸与肽相互作用以理想地增强其穿过细胞膜的能力，从而增强跨细胞转运认为脂肪酸的疏水区对该功能很重要，并且理想地应与水溶性一致地包含尽可能多的连续碳原子，优选至少8个连续碳原子，尤其是10-14个碳原子优选的脂肪酸包括但不限于月桂酸和油酸在使用时，优选的脂肪酸浓度为0. 1至4. Omg/mL，尤其是 0. 5 至 2. Omg/mL脂肪酸的糖酯不旨在受理论约束，认为脂肪酸的糖酯可以以能改变细胞形状，增大孔隙大小的方式与细胞相互作用，从而理想地增强细胞旁路转运它们还可以在跨细胞转运中提供益处当联合使用脂肪酸和脂肪酸的糖酯时，通过联合跨细胞转运的增强和细胞旁路转运的增强，可以尤其地增强生物利用度与脂肪酸类似，疏水区也应优选地包含至少8个连续碳原子，尤其是10-14个碳原子糖部分可有助于水溶性优选的脂肪酸的糖酯包括但不限于蔗糖月桂酸酯、葡萄糖月桂酸酯和果糖月桂酸酯在使用时，脂肪酸的糖酯的优选浓度为 0. 1 至 10. Omg/mL,尤其是 0. 5 至 5. Omg/mL酰基肉碱认为酰基肉碱增强生物利用度，并且在一些优选的实施方案中，其与脂肪酸的糖酯联合优选的酰基肉碱包括但不限于L-月桂酰基肉碱和豆蔻酰基肉碱在使用时，酰基肉碱的优选浓度为0. 1至10. Omg/mL，尤其是0. 5至5. Omg/mL柠檬酸类柠檬酸类生物利用度增强剂选自柠檬酸、柠檬酸盐及其混合物，并且优选地将其与一种或多种本文讨论的其他增强剂联合使用不旨在受理论约束，认为柠檬酸类增强剂可以增强细胞旁路转运优选地，当用于本发明时，所有这些柠檬酸类增强剂的浓度应不低于5mM并且不高于50mM，更优选为10_25mM不旨在受理论约束，认为由于柠檬酸类与活性肽在所述肽的氨基末端或赖氨酰侧链处的相互作用，在较高的柠檬酸根浓度时储存稳定性可有不期望的降低其他优选方案以上定义的组合物可以按照本发明施加至鼻粘膜，例如以滴剂或喷雾形式然而如下文所述，最优选以喷雾形式施加，即以细小液滴形式施加本发明的组合物当然还可以包含另外的成分，尤其是属于常规可药用表面活性剂类的成分优选地，本发明的液体药物组合物包含适于施加至鼻粘膜的可药用稀释剂或载体例如可以使用盐水可以制备本发明的组合物以使其能够经鼻途径施用为此它们还可以包含例如最小量的期望的任何其他成分或赋形剂，例如其他防腐剂或者例如睫状兴奋剂(ciliary stimulant)(如咖啡碱)对于经鼻施用一般优选温和的酸性pH优选地本发明组合物的pH为约3. O至 6. 5o本发明的组合物还应具有适合的等渗性和粘度优选地，它们的渗透压为约 260m0sm/升至约380m0sm/升经鼻喷雾的期望粘度优选低于0. 98cP本发明的组合物还可以包含常用的表面活性剂，优选非离子型表面活性剂当使用表面活性剂时，其在本发明组合物中的存在量根据所选的具体表面活性剂、具体施用方式(例如，滴剂或喷雾)和期望的效果而异然而一般地，存在量应为约0. lmg/ml至约 10mg/ml左右，优选约0. 5mg/ml至约5mg/ml，最优选约lmg/ml优选地，包含可药用防腐剂本领域已知许多可药用防腐剂并已将其用于经鼻水性药物例如，可以使用苄醇或苯乙基醇或其混合物在一个实施方案中，联合使用0.2% 的苯乙基醇和0.5%的苄醇待施用肽的量以及本发明组合物中活性成分的量当然将取决于所选的具体肽、待治疗的病症、期望的施用频率和期望的效果每次经鼻施用时施用的总组合物的量适合地包含约0. 05ml至0. 15ml，通常为约 0. 1ml为进行经鼻施用，优选将本发明的组合物存放于配备有能将所含组合物施加至鼻粘膜的工具的容器中，例如放置在经鼻施用器(applicator)装置中本领域已知适合的施用器并且包括适于以滴剂或喷雾形式将液体组合物施用至鼻粘膜的那些因为应尽可能精确地控制给药，所以一般优选使用施用量易于精确调节的喷雾施用器适合的给药器 (administrator)包括，例如喷雾装置、泵喷雾器和气溶胶分配器在后一种情况下，施用器会包含本发明的组合物以及适于在经鼻施用器中使用的抛射介质喷雾装置应具有能将所含组合物递送至鼻粘膜的适合的喷雾适配器这些装置在本领域中公知所述容器(例如经鼻施用器)可以包含足以用于单次经鼻给药或提供几个顺次剂量(例如，在几天或几周期间内的剂量)的组合物优选按照上文所定义提供单个剂量的量下文中给出了本发明几种制剂的一些非限制性实施例和效果数据实验设计在这些研究中使用重225g_250g的雌性Sprague-Dawley大鼠在施用测试物质前大鼠禁食过夜但可以自由获取水使用开他敏和甲苯噻嗪联合麻醉大鼠，将套管插入颈动脉以进行血液取样收集的每个血液样品的体积为0. 5mL通过用Eppendorf微量移液器的一次性吸头接触左侧鼻孔并对移液器的柱塞轻柔地施加压力来施用20 μ L的剂量在给药前和施用含有表中所示制剂的.85%氯化钠中 ^ PTH(1-34)NH2(l-2mg/mL)后 10、20、40、60 和 120 分钟收集血液样品PTH(1-34)NH2 ^ 甲状旁腺激素截短物，其分子结构只包含天然人甲状旁腺激素的起始34个氨基酸，其中氨基酸的C-末端被酰胺化用ELISA测定血浆中PTH(1_34)NH2的浓度简言之，所述测定由在包被了兔抗 PTH(l-34)NH2抗体的96孔ELISA板上孵育大鼠样品组成孵育并清洗板后，将山羊抗 PTH(1-34)NH2抗体加入板中在清洗掉未结合山羊抗体后，结合的抗体用兔抗山羊IgG-辣根缀合物和3，3’，5，5’ -四甲基联苯胺过氧化物底物进行检测血液样品中PTH(1-34)NH2 的量与孔中的黄色直接成比例结果表1 增强剂对PTH (1-34) NH2鼻内吸收的作用对大鼠鼻内给予含有0. 85%氯化钠和所示终浓度增强剂的16mM磷酸钠/8mm柠檬酸(pH 4.8)中的 PTH(l-34)NH2(l-2mg/mL)