专利名称：前药的制作方法目前使用的大多数药物是具有低分子量的化合物，并且当对患者全身给药时显示高血浆清除率或总机体清除率。此外，所述低分子量化合物显示通过扩散渗透机体组织的高趋向，导致均勻的生物分布。这些是为什么仅少量药物到达作用位点的两个主要原因，并且由于在机体健康组织上分布，所以所述药物引起有问题的副作用。对于那些具有高细胞毒素潜能的药物如细胞生长抑制剂，特别顾虑这些缺点。已经寻求用于改善低分子量药物的选择性并因此提高活性剂在所需组织中的浓度的一些策略，同时在健康组织中降低其浓度以便降低副作用。大分子载体如白蛋白等或其药物偶联物显示在体循环中长达19天的明显长的半衰期(参见，Peters，T. J.，“ Serum Albumin"，Adv. Protein. Chem.，1985，37，161-245)。 由于恶性、感染或发炎组织等的血管壁对于大分子的渗透性增强，载体如血清白蛋白，优先穿过进入靶组织，因此实现所谓的被动靶向作用(参见，Maeda, H.，Matsumura, Y.，Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Sys.，1989,6,193-210)。药物可以结合到外源性或内源性白蛋白 (DE 103 10 082 Al、DE 10 2005 009 084 Al)。最近已报道了用于改善癌症化疗的大分子前药策略(WO 2006/0922 )。所述策略基于以下两个特性(i)静脉给药后硫醇反应性前药对内源性白蛋白34位半胱氨酸的迅速和选择性的结合，和(ii)在肿瘤位点白蛋白结合药物的酶释放。前列腺特异性抗原(PSA) 是过表达于前列腺癌中的丝氨酸蛋白酶，并且代表从前药制剂中选择性释放的抗癌剂的分子靶标。此外，已表明插入肽序列Arg-kr-kr-Tyr-Tyr-kr-Arg的阿霉素的白蛋白结合衍生物通过PSA有效地裂解释放阿霉素-二肽kr-Arg-DOXO，但是游离的阿霉素从该二肽的进一步释放进行缓慢，具有> 48小时的半衰期(half-live)。此外，虽然在原位PSA阳性模型中前药优于阿霉素，但前药不能诱导肿瘤缓解(Graeser等人，Int. J. Cancer, 2008, 122，145)。因此，存在克服上述问题并提供能够在所需作用位点更快释放最终的细胞生长抑制剂的前药的需求。
因此，本发明要解决的技术问题是提供用于癌症治疗的新前药，当在所需的作用位点酶裂解时其将显示更加有效地释放游离细胞生长抑制剂。通过提供特征在于权利要求书中的实施方案来解决上述技术问题。特别地，根据本发明的一方面，提供具有下式I的前药R-An-Ser-Leu-Y-Z (I)其中R =蛋白质结合部；H ；选自由C1,烷基、C1,烯基、C1,炔基和C1,酰基组成的组中的未取代或取代的残基，其中所述残基可以是环状、支化或直链的，任选地包含一个以上的杂原子；或选自由芳基、芳烷基和杂芳基组成的组中的未取代或取代的残基；A =由L-和/或D-氨基酸组成的肽序列，其中所述氨基酸残基可以相同或不同；η = 1至10，优选1至8，更优选1至6，最优选1至4的整数，如2、3、4、5或6，该整数表示肽序列中的氨基酸数；Y =连接子部；和Z=细胞生长抑制剂；其中R可经由肽主链的末端NH2基团连接到An，和Y可经由α -C原子的COOH基团连接到Leu。作为本文使用的术语“前药”没有特别限定，只要满足上述定义的式(I)即可。特别地，术语“前药”指以非活性或较低活性形式给药到有机体如人类并通过代谢转化为活性形式的药物(或化合物)的任何形式。所述前药转化为活性形式没有特别限定，并包括发生于给药后前药的任何化学和/或物理改变，如在作用位点前药活性部分(特别是细胞生长抑制剂)的释放等。本文使用的表述“蛋白质结合部”没有特别限定，并指任何能够结合到可以是内源性或外源性来源的化合物的氨基、羟基或硫醇基的官能团。根据本发明蛋白质结合部的优选实例是马来酰亚胺基团、卤代乙酰胺基团、卤代醋酸酯(盐)基团、吡啶基硫代基团 (pyridyithio group)、乙烯基羰基基团、氮丙啶基团、二硫化物基团、取代或未取代的乙炔基团和羟基琥珀酰亚胺酯基团。蛋白质结合部还包含可由标准偶联剂如二环碳二亚胺、酰基氯或肽偶联剂(如，B0P、HATU、PyBOP)活化的官能团如-COOH或S03H。本发明的优选实施方案中蛋白质结合部为马来酰亚胺基团。可将一种或几种前药结合到任何合适的载体如肽、糖、血清蛋白质、抗体或抗体片段、生长因子、多糖或合成聚合物。通常载体可包含适当的官能团如羟基、氨基或硫醇基以结合蛋白质结合的前药。如有必要，可通过本领域技术人员已知的技术经化学修饰来将这些引入载体分子(Kratz等人，(2001) =Anticancer drug conjugates with macromolecular carriers, in Polymeric Biomaterials，第二片反，ed.，S. Dumitriu，Marcel Dekker, New York，第 32 章，851-894)。在优选实施方案中，根据本发明前药的蛋白质结合部允许所述前药在通过例如注射给药后原位结合到体液组分和/或组织组分，优选结合到血清蛋白质并更优选结合到血清白蛋白，特别是血清白蛋白的半胱氨酸-34，然后表现为携带药物学活性化合物到靶位的大分子前药。根据本发明，术语“原位”包括在已向其施用前药的生物体内，根据本发明的前药与内源性生物分子，如血清蛋白质、特别是血清白蛋白的结合。本发明的优选实施方案涉及如上所定义的前药，其中对R定义的残基(不包括蛋白质结合部和H)例如C1,酰基(如己酸基团)被如上定义的蛋白质结合部(例如马来酰亚胺基团)所取代。根据本发明的该实施方案，R的实例为ε -马来酰亚胺基己酸(EMC)。根据本发明另外的实施方案，R例如C1,酰基，如己酸基团被以下部分(moiety) 取代，所述部分或者缺少蛋白质结合性例如硫醇结合基团，或者具有蛋白质结合性例如硫醇-结合基团，如马来酰亚胺基团，但所述蛋白质结合性被取代基例如半胱氨酸所阻断/衍生。根据该实施方案的R的实例如下所示本发明涉及包含至少一种细胞生长抑制剂的前药，其中所述前药由前列腺特异性抗原(PSA)裂解，还涉及制备所述前药的方法和以药物学有效量包含所述前药的、用于癌症治疗的药物组合物。