专利名称:一种检测转基因玉米品系Mon88017的试剂盒和寡核苷酸的制作方法现如今,转基因技术在提高产量、改善品质、缓解粮食危机等方面作出了巨大贡献,同时,也为公众带来关于转基因生物安全的忧虑。在诸多争论中,转基因技术在作物种植中的应用仍迅猛发展,成为应用较快的农业新技术。随着转基因品系越来越多和转基因作物的种植面积逐年扩大,有关转基因技术的争议和质疑越来越多,我国也对转基因生物安全问题越来越重视。我国规定自2002年3月20日起,所有转基因农作物及其副产品都 应加以标志,这时候就需要一种行之有效的检测方法来对相关产品进行检测。环介导等温扩增法(loop-mediatedisothermal amplification, LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在一种链置换DNA聚合酶的作用下,等温条件保温60分钟,即可完成核酸扩增反应。具有简单、快速、特异性强的特点。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,不依赖任何专门的仪器设备实现现场高通量快速检测,检测成本与检测所需时间远低于荧光定量PCR0目前国内外均未见利用-LAMP技术对转基因产品进行检测的相关报道。
本发明要解决的技术问题是提供一组特异性强、灵敏度高的用于检测转基因玉米品系Mon88017的LAMP寡核苷酸。本发明要解决的另一个技术问题是提供一种操作简单、结果准确的检测转基因玉米品系Mon88017的试剂盒。为实现上述目的,本发明采用以下技术方案本发明提供了一组检测转基因玉米品系Mon88017的寡核苷酸,其为利用PrimerExplorer V4. 0在线软件(http://primerexplorer. jp/elamp4. 0. 0/index, html)设计的一组LAMP引物,由序列表SEQ ID No. I至序列表SEQ ID No. 5所示碱基序列的寡核苷酸组成;其中SEQ ID No. I为外侧上游引物,SEQ ID No. 2为外侧下游引物,SEQ ID No. 3为内侧上游引物,SEQ ID No. 4为内侧下游引物,SEQ ID No. 5为环状下游引物。详见表I。表I引物序列本发明公开了一种检测转基因玉米品系Mon88017的试剂盒和寡核苷酸,具体涉及一组检测转基因玉米品系Mon88017的寡核苷酸,其具有序列表SEQIDNo.1至SEQIDNo.5所示的寡核苷酸序列,及含有这些寡核苷酸的试剂盒及其检测方法,本发明所述的试剂盒灵敏度高、特异性强、成本低、操作简便。
一种检测转基因玉米品系Mon88017的试剂盒和寡核苷酸制作方法
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