专利名称：一种建立2型糖尿病动物模型的方法及其在筛选降血糖药物中的应用的制作方法糖尿病，中医称之为消渴病，是由于体内胰岛素绝对或相对分泌不足而引起的以糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱为主的ー种内分泌疾病，可累及全身各器官和组织，导致糖尿病并发症，是严重危害社会和人类健康的慢性疾病之一。 近年来糖尿病发病率呈上升趋势，据世界卫生组织统计，1998年糖尿病发病数达I.35亿，2000年达到I. 6亿，到2004年达到2. 4亿。据最近的流行病学调查显示，我国的糖尿病发病率已由15年前的O. 67%上升到近年来的3. 2%，其中非胰岛素依赖型的2型糖尿病患者占总数的90%以上。现有的降血糖研究包括分子水平，细胞水平，活体水平；其中以活体研究意义最大。活体动物模型主要包括自发型糖尿病动物模型，比如ob/ob小鼠；化学药物引起的糖尿病动物模型，比如链脲佐菌素引起的小鼠或大鼠糖尿病模型，这些动物模型都是模拟人类糖尿病的特征。另外，还有高脂高糖联合化学药物建立糖尿病动物模型。有研究表明ニ型糖尿病与饮食和饮酒有重要的关联，上述模型中不能反应出饮食和酒精对2型糖尿病致病的影响。曾有报道做过高脂高糖和酒精联合建造2型糖尿病动物模型，由于其高脂高糖配方存在缺陷，缺少胆酸钠(促进鼠类动物胆固醇和脂肪吸收)，导致动物模型中部分指标无统计学意义，建模未成功。
本发明的目的是提供一种构建2型糖尿病动物模型的方法，该方法模拟人类2型糖尿病的发病过程，所制备的动物模型出现高空腹血糖、高胰岛素血症、高血脂、糖耐量减低等2型糖尿病的典型特征，适合于2型糖尿病激励研究和进行大量的药物筛选。本发明方法的特征在于高脂高糖饲料喂养动物一段时间，同时给动物灌服一定浓度酒精，使动物血糖升高、血脂升高，发生胰岛素血症及胰岛素抵抗。本发明方法包括以下步骤 通过自由摄食，用高脂高糖饲料持续喂养模型动物2-10周，同时灌胃体积分数10%-60%的食用酒精1-20毫升/千克。本发明方法中，高脂高糖饲料由基础饲料、蔗糖、油脂、胆固醇、胆酸钠、蛋黄粉组成。其中，油脂可以为猪油，或者牛油。高脂高糖饲料的比例为基础饲料50%-70% ;鹿糖10%_20% ;油脂10%_20% ;胆固醇1%-5% ;胆酸钠 O. 5%-2% ;蛋黄粉 5%-10%。模型动物包括野生型小鼠，如C57BL/6J小鼠，BALB/c小鼠，ICR小鼠，KM小鼠；野生型大鼠，如Wistar大鼠，SD大鼠等。模型动物在喂养4至20周后，白天空腹，即早上6 00开始断食不断水，晚上18 00处死取血，自动生化分析仪检测血液中各项指标,如血糖,胰岛素,血脂,胆固醇,低密度脂蛋白，高密度脂蛋白。
图I为大鼠OGTT试验結果，·表示实验组数据，▲表示正常组实验数据，*表示与正常组对比，P〈0. 05。

C57BL小鼠，30只，随机分为两组，各15只。正常组，喂养正常饲料，自由进食饮水；试验组，喂养闻脂闻糖词料，自由饮水，甸天灌胃O. 2 ml 30%食用酒精。高脂高糖饲料的比例为基础饲料60% ;蔗糖15% ;油脂15% ;胆固醇3% ;胆酸钠
0.5% ;蛋黄粉 6. 5%ο饲养8周后，白天空腹，即早上6:00空腹，晚上18点断头取血，分离血清，自动生化分析仪检测血液中各项指标。统计学软件分析数据显著性。结果如表I所示，与正常组对比，试验组小鼠的空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酷、低密度脂蛋白显著增加，高密度脂蛋白显著降低，与人类2型糖尿病患者的血液指标趋势一致，建模成功。


本发明提供一种构建2型糖尿病动物模型的方法，高脂高糖饲料喂养动物一段时间，同时给动物灌服一定浓度酒精。该方法模拟人类2型糖尿病的发病过程，所制备的动物模型出现高空腹血糖、高胰岛素血症、高血脂、糖耐量减低等2型糖尿病的典型特征，适合于2型糖尿病机理研究和进行大量的药物筛选。