专利名称：利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法在植食性昆虫与植物间的化学通讯系统中，植物释放的特定的挥发性气味物质能够诱导昆虫定位寄主、选择适宜的产卵场所或对植物产生逃避行为。植物的特异性挥发物在其受到机械损伤、昆虫取食或施用外源物时，会不同程度的增加或减少，形成干扰昆虫行为的作用，以达到自身防御的目的。谢福荣等(2003)发现柠檬桉(Eucalyptuscitriodora)、樟树(Cinnamomum camphora)植物莖、叶的乙醇、丙酮提取物对橄榄星室木風(Pseudophacopteron canarium)成虫产卵具有很强的驱避作用，控制作用达到60%以上。马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus)雌蛾在戍烧处理的马尾松(Pinus massoniana)针叶上的产卵喜好性明显下降，而复叶槭(Acer negundo)在机械损伤4h后、咬食创伤24h后对光肩星天牛[Anoplophora glabripenns (Motsch)]表现出较强的驱避作用。植物诱导防御能够改变食叶动物及其天敌的行为，而施用外源化合物(激发子)能诱导植物产生这种防御反应。茉莉酸和茉莉酸甲酯就是在许多种高等植物体内发现的一种激发子，是植物生长发育、植物抗性和衰老的内部调节者，也是一个重要的传递植物伤害信息的信号分子，并且是诱导植物产生直接或间接防御作用的关键性调节成分。植物的直接防御是通过减少植物体内的营养物质、合成抑制剂或有毒的物质以及组织挥发物(volatile organic compounds, VOCs)来妨碍植食动物进一步取食的,而间接防御是植食动物取食或产卵诱导植物释放一些特殊的挥发性信号物质，吸引其捕食性和寄生性天敌来控制植食动物的继续为害。许多种植物在应用外源茉莉酸或茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate, MeJA)后，能模拟植食动物侵害诱导植物产生防御反应，影响植食动物及其天敌对寄主的优先选择行为。例如，艾比亘等(Erbilgin et al. ) (2006)研究表明，挪威云杉[Picea abies (L.)Karst.]树皮用茉莉酸甲酯处理后，小蠹虫[Ips typographus (L.)]的为害显著低于其对照；雌、雄虫数量及雌虫产于树皮的卵量均明显降低。此外，MeJA处理的树皮内蛀道很少吸引同种小蠹虫前来为害。在另一研究中，用IOOmM茉莉酸甲酯处理的苏格兰松(Pinussylvestris L.)树苗，明显减小大松象甲(Hylobius abietis L.)在其干部树皮上的取食面积。 落叶松毛虫[Dendrolimus superans (Butler) (Lepidoptera: Lasiocamp-idae)]是中国东北林区的重要害虫,主要危害落叶松(larch)和红松(Pinus koraiensisSieb. et Zucc.)。该虫大发生时可将大片松林针叶吃光，受:害林木生长裳弱，引起姓干害虫发生,致使林木成片死亡。研究显示,落叶松毛虫成虫对落叶松主要挥发性萜类物质具明显的触角电位反应(electro-antennogram response),而且这些挥发物与落叶松球果花蝇(Strobilomyia spp.)为害关系密切。进一步研究发现,外源信号化合物茉莉酸甲酯和水杨酸甲酯(methyl salicylate, MSA )对落叶松毛虫幼虫有驱避作用，落叶松毛虫成虫对茉莉酮((Z)-jasmone, ZJ)和水杨酸甲酯有明显的触角电位反应；机械损伤和ImM茉莉酮、茉莉酸、茉莉酸甲酯及水杨酸甲酯诱导兴安落叶松(Larix gmelinii Rupr.)后，能明显减少落叶松毛虫幼虫的取食选择，落叶松毛虫雌虫在各诱导因子处理的兴安落叶松上的产卵量显著降低。这些研究表明损伤或外源信号化合物处理，能够诱导兴安落叶松对昆虫产生直接或间接的化学防御反应。侯照远等(1997)把对寄主选择行为归纳为寄主寻·找行为(Host searching behavior)、产卵行为(Oviposition behavior)、产卵后行为(Post-oviposition behavior) 3个主要过程。在寄主选择的过程中，植物的嗅觉刺激对植食性昆虫选择寄主起着关键性作用。
本发明的目的是提供一种利用茉莉酸处理的落叶松对落叶松毛虫雌虫产卵及其嗅觉选择产生影响的的方法。 上述的目的通过以下的技术方案实现 ー种利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，用茉莉酸溶液喷施处理落叶松；用O. 01-lmmol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液5ml喷施处理落叶松。所述的利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，所述的茉莉酸溶液是含有5%丙酮和O.1%吐温Tween20 (v/v)的水溶液将茉莉酸稀释定容而成。ー种将茉莉酸用于防治落叶松毛虫的用途，用O. 01 -lmmol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液喷施处理落叶松，明显减少落叶松毛虫在落叶松上的产卵量的用途、对落叶松毛虫有明显的驱避作用的用途。有益效果 I.本发明的落叶松毛虫在不同浓度茉莉酸处理的两种落叶松松苗上产卵量变化显著；兴安落叶松苗在处理后第I天，各处理松苗上落卵量差异均不显著。处理后3天和5天，对照松苗上的卵量远远多于处理JAO. 01、JAO. I、JAl松苗上的卵量，差异极显著(p〈0. 01)；3 个处理分别比对照减少 66. 71%, 63. 58%, 75. 82% 和 81. 99%, 90. 89%, 77. 53%。本发明处理后第I天的长白落叶松，处理JA0. I和JAl松苗上的卵量明显低于对照和处理JA0. 01松苗上的卵量(p〈0. 05)，分别比对照减少79. 98%,76. 65%。处理后第3天，对照松苗上的卵量极显著高于处理JA0. I松苗上的卵量(p〈0. 01)，处理JA0. I松苗上的卵量比对照减少75. 57% ;处理JA0. 01、JAl松苗上的卵量分别比对照减少51. 04%,67. 28%，差异显著(P〈0. 05)。处理后第5天，对照松苗上卵量极显著(p〈0. 01)高于3个处理，处理JA0. 01、JA0. I、JAl 松苗上卵量分别比对照减少 57. 52%,65. 59%,82. 34%。本发明的落叶松毛虫对不同处理的两种落叶松嗅觉反应变化明显；与对照相比，两种落叶松处理后第I天对落叶松毛虫没有明显的驱避作用(P>0. 05);处理后第3天，兴安落叶松处理JA0. 01和长白落叶松处理JAl松苗驱避作用显著(p〈0. 05);处理后第5天，兴安落叶松处理JA0. 01、长白落叶松处理JAl对落叶松毛虫驱避作用明显(p〈0. 05)。本发明随着茉莉酸处理浓度的増加，兴安和长白落叶松处理3、5天松苗驱避性表现为先减弱后增强的趋势；兴安落叶松I天驱避性先增强后减弱趋势；长白落叶松诱导后第I天表现为逐渐减弱的趋势；但只有长白落叶松在JAl处理条件下，处理第3天的驱避性极显著高于处理I天的(P〈0. 01),处理第5天的显著高于处理第I天的(p〈0. 05)，其它处理差异不显著。本发明随着茉莉酸处理时间延长，兴安落叶松处理JA0. 01和JAl松苗的驱避性逐渐增強，JAO. I松苗驱避性先减弱再增强，其它处理差异不显著；长白落叶松处理JAl松苗的驱避性先降低后升高，处理JA0. 01和JA0. I松苗的驱避性稍稍减弱，在处理后第3天，处理JAl松苗驱避性明显强于处理JA0. 01和JA0. 1，其它处理差异不显著。本发明随着茉莉酸处理时间延长，兴安落叶松处理JA0. 01和JAl松苗的驱避性逐渐增強，JA0. I松苗驱避性先减弱再增强，其它处理差异不显著；长白落叶松处理JAl松苗的驱避性先降低后升高，处理JA0. 01和JA0. I松苗的驱避性稍稍减弱，在处理后第3天，处理JAl松苗驱避性明显强于处理JA0. 01和JA0. 1，其它处理差异不显著。本发明用茉莉酸(Jasmonic acid，JA)喷雾处理落叶松对落叶松毛虫行为反应的影响；在喷雾处理后1-5天，落叶松毛虫在茉莉酸处理的 松苗上产卵量显著低于对照；茉莉酸喷雾处理后第3和5天的兴安落叶松JA0. 01及长白落叶松JAl树苗对落叶松毛虫有明显的驱避作用；产卵与嗅觉试验的结果显示，茉莉酸诱导两种落叶松树苗明显影响落叶松毛虫雌虫的寄主选择行为。


附图I为本产品的不同浓度茉莉酸处理的兴安落叶松对落叶松毛虫产卵量的影响示意图。纵轴表示产卵量的百分比。附图2为本产品的不同浓度茉莉酸处理的长白落叶松对落叶松毛虫产卵量的影响示意图。纵轴表示产卵量的百分比。附图3为本产品的落叶松毛虫对不同浓度茉莉酸处理的兴安落叶松的嗅觉反应示意图。附图3中右側“*”表示对应行对照与处理在p〈0. 05水平上差异显著，“ NS”表示差异不显著。附图4为本产品的落叶松毛虫对不同浓度茉莉酸处理的长白落叶松的嗅 觉反应示意图。附图5为本产品不同浓度茉莉酸处理的兴安落叶松对落叶松毛虫嗅觉反应的影响示意图。附图5中同列不同小写字母表示各处理在p〈0. 05水平上差异显著；同列不同大写字母表示各处理在P〈0. 01水平上差异显著；未标字母表示各处理差异不显著。附图6为本产品不同浓度茉莉酸处理的长白落叶松对落叶松毛虫嗅觉反应的影响示意图。附图5中同列不同小写字母表示各处理在p〈0. 05水平上差异显著；同列不同大写字母表示各处理在P〈0. 01水平上差异显著；未标字母表示各处理差异不显著。附图7为本产品不同时间茉莉酸处理的兴安落叶松对落叶松毛虫嗅觉反应的影响示意图。附图8为本产品不同时间茉莉酸处理的长白落叶松对落叶松毛虫嗅觉反应的影响示意图。

ー种利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，用茉莉酸溶液喷施处理落叶松；用O. 01,0. I或lmmol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液5ml和对照溶液5ml分别喷施处理落叶松。附图I和附图2中的同一天中柱形图上不同小写字母表示各处理在p=0. 05水平上差异显著，不同大写字母表示各处理在P=O. 01水平上差异显著；相同则表示各处理差异不显著。
实施例2
实施例I所述的利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，所述的用O. 01、-O. I或Immol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液喷施处理落叶松结果明显减少落叶松毛虫在落叶松上的产卵量。实施例3 实施例I所述的利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，所述的用O. 01或lmmol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液喷施处理落叶松结果对落叶松毛虫有明显的驱避作用。实施例5
上述实施例所述的利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，所述的对照溶液由5%丙酮和
O.1%吐温TWeen20 (v/v)水溶液组成；所述的O. 01,0. I或lmmol/1茉莉酸溶液是由茉莉酸被含有5%丙酮和O. 1%吐温Tween20 (v/v)的水溶液稀释定容而成。实施例6
上述实施例所述的利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法，
落叶松苗
于2007年4月末，将2年生的兴安落叶松、长白落叶松两种落叶松苗各800株栽于东北林业大学育苗场塑料桶(直径22cmX高30cm)内，自然光照条件下生长，保证每天落叶松苗有充足的水分，及时施肥、除草，待用。落叶松毛虫
把内蒙古加格达奇林业局提供的落叶松毛虫蛹放在温度28 土 1.5で，RH 85%，光照14 L 10 D光照培养箱中，让其发育，羽化后待用。仪器
Y形管嗅觉仪(订制，内径为4cm，直管长15cm，两侧臂等长，为10cm，夹角为75° )，40w荧光灯，QC-I型大气采样仪。试剂
丙酮(分析纯，天津市光复精细化工研究所)、茉莉酸(Sigma公司)。落叶松苗处理
落叶松苗的处理方法參照苎亥等(Juha et al.)的方法，并略作修改。试验于2007年7月在东北林业大学育苗场进行，每种选取落叶松苗84株，随机各分4个处理，分别为对照(CK)，每株喷5 ml含5%丙酮和O. 1%吐温Tween20 (v/v)水溶液；处理I每株喷5 ml
O.01 mmol /I 茉莉酸(jasmonic acid, JAO. 01)水溶液；处理 2 姆株喷 5ml O. lmmol/1 茉莉酸(JA0. I)水溶液；处理3每株喷5ml lmmol/1茉莉酸(JAl)水溶液。各处理溶液均含5%乙i醇和 O. 1% 吐温 Tween20 (v/v)。对落叶松毛虫成虫产卵行为的影响
在处理后2h、2d、4d，将松苗间隔50cm摆放到一个笼罩(长I. 5mX宽I. 2mX高I. 2m)里，姆个处理2盆,姆个笼罩共8盆。姆个笼内放入羽化小于24h的20对未交尾的落叶松毛虫成虫。每个笼罩为I个重复，每个处理3次重复。隔Id调查I次，即释放成虫后2天，取出成虫，调查各处理树苗及网上的产卵量。毎次调查后，更换各处理树苗，放入新羽化未交尾的成虫。落叶松毛虫成虫对两种落叶松的嗅觉反应在处理后l、3、5d，将相应处理的松苗罩起来，作为气味源，用于嗅觉反应试验。Y形管嗅觉仪内径为4cm，直管长15cm，两侧臂等长为10cm，夹角为75°。把Y形管嗅觉仪置于光线较暗且分布均匀的林场大棚内，其上为40w荧光灯两盏，与Y形管平行，以防止落叶松毛虫对光源产生趋光性，影响试验結果。Y形管两侧臂依次连接QC-I型大气采样仪、气味源和装有活性碳的空气过滤管，气体流速为200ml/min。以罩着有机玻璃罩的松苗作为处理或对照气味源。当某蛾爬至超过某臂的 5cm处，并持续Imin以上或到达该臂出口处者，记该蛾对该臂的气味源作出选择；如蛾引入后5min，仍不作出选择，则结束对该蛾的行为观察，并记为不反应。每个处理3个重复，每个重复至少测3组，5头雌成虫为一組，每组测定前调换Y形管的两侧臂，以免残留的气味对结果产生影响。每个重复测定前都要更换各处理树苗及Y形管(更换的Y形管先用こ醇擦洗，再用水冲洗，晾干待用)。 数据处理与分析方法
测得数据应用Excel表格处理、绘图，SPSS11. 5统计分析软件进行单因素方差分析(ANOVA), LSD多重比较和成对数据t-test。


利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法。在寄主选择的过程中，植物对昆虫的嗅觉刺激在植食性昆虫选择寄主起着关键性作用。一种利用茉莉酸防治落叶松毛虫的方法,用茉莉酸溶液喷施处理落叶松;用0.01-1mmol/L浓度的茉莉酸的丙酮水溶液5ml喷施处理落叶松。本发明用于防治落叶松毛虫。