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一株饲用粪肠球菌及其应用制作方法

  • 专利名称
    一株饲用粪肠球菌及其应用制作方法
  • 发明者
    付生慧, 唐泽华, 张东晓, 方莉玉, 梁运祥, 沈中艳, 游伟, 赵述淼, 雷红升
  • 公开日
    2011年12月14日
  • 申请日期
    2011年8月12日
  • 优先权日
    2011年8月12日
  • 申请人
    北京金泰得生物科技股份有限公司
  • 文档编号
    A61P31/04GK102277325SQ20111023071
  • 关键字
  • 权利要求
    1.粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 48482.根据权利要求1所述的粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848,其特征在于粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848是革兰氏阳性菌,显微镜下观察呈球形,不形成芽孢;在MRS琼脂平板上生长良好,4 形成圆整、光滑、隆起、灰白色露滴样、直径0. 5-lmm大小、菌落;兼性厌氧生长,生长温度范围10°C _50°C,最适生长温度30°C-40°C ;生长酸碱度范围pH 4-10,最适pH值为6.53.根据权利要求1 所述的粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848, 其特征在于粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848对金黄色葡萄球菌 (SA)、伤寒沙门氏菌(ST 04Hi)、猪源产肠毒素型大肠杆菌E. coli 0139和猪源致病大肠杆菌(E. coliC83524、E. coliC83529、Ε. coliC83905)均有较强的抑制作用4.根据权利要求1所述的粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848,其特征在于粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848 可耐受 pH 2. 5 合成胃液60min ;最高耐受胆盐浓度为2. 0% (质量百分比浓度)5.根据权利要求1所述的粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848,其特征在于粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848对复达欣、美满霉片、苯唑青霉素、四环素、卡那霉素、庆大霉素、强力霉素和丁胺卡那霉素不敏感6.根据权利要求1所述的粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848,其特征在于粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848 对 Ε. coliC83905 感染有良好的免疫预防效果,饲喂粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)SBD CGMCCNo. 4848能有效降低小鼠受大肠杆菌攻毒时的发病率和死亡率7.一种粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848微生态菌剂,其活性成分为粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 48488.一种制备权利要求7所述的粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCCNo. 4848 微生态菌剂的方法,包括以下步骤1)配制YPD液体培养基酵母浸粉10g/L、葡萄糖20g/L、蛋白胨20g/L,调节pH6. 5, 115°C 灭菌 20min ;2)从斜面中接一环粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848 到 YPD 液体培养基中,37°C静置培养10-24h,再按(体积/体积百分比)的接种量进行两级培养,每级培养时间为10-Mh,37°C静置培养,培养结束后,得到粪肠球菌(Enterococcus faecal is) SBD CGMCC No. 4848 微生态菌剂9.权利要求7或8所述的微生态菌剂在制备饲料添加剂或兽药中的应用,可取代抗生10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于所述微生态菌剂的使用方法为将微生态菌剂按107-108CFU/Kg体重/天的量添加到禽、畜饮用水或饲料中
  • 技术领域
    本发明属于微生物菌株,特别是涉及一株粪肠球菌菌株及其取代抗生素在禽、畜养殖中的应用
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:一株饲用粪肠球菌及其应用的制作方法乳酸菌是肠道常居菌群。动物服用乳酸菌后,可以改变肠道内菌群环境,产生多种抑菌因子,抑制有害菌繁殖,提高动物机体免疫力。乳酸菌通过粘附素与肠粘膜细胞紧密结合,在肠粘膜表面定植占位,成为生理屏障的主要组成部分,从而达到恢复宿主抵抗力,修复肠道菌群屏障、治愈肠道疾病的作用。国内外对乳酸菌作用效果的实验报道不计其数,乳酸菌是动物机体有益菌的观点受到广泛赞同。Barrow (Barrow PA, Brooker BE, Fuller R, Newport MJ. The attachment of bacteria to the gastric epithelium of pig and its importance in the microecology of the intestine. J Appl Bacterio,1980,48 :147-154)给仔猪饲喂乳杆菌可显著降低肠道中大肠杆菌的数量° Rada(Behling RG. Competitive Exclusion of salmonella enteritidis in chicks by treatment with a single culture plus dietary lactose. Int J food Microbiol,1994,22 :1_9)禾口Behling(Pollman DS,Danielson DM,Wren WB,Peo ER, Shahani KM. Influence of Lactobacillus acidophilus inoculum on gnotobiotic and conventional pigs. J Anim Sci,1980,51 :6四_637)报道用乳杆菌可减少禽类消化道内大肠杆菌和沙门氏菌的定植。Simon(2001)对国外已有报道进行了统计分析,结果表明益生素在减少仔猪和犊牛的腹泻发病率方面效果显著。Pergidon等(Simon 0, Jadamus A, Vahjen W. Probiotic Feed Additives-Effectiveness and Expected Modes of Action. J AnimFeed Sci,2001,10 (Suppl),1 :51-67)报道,口服乳酸菌后,对巨噬细胞的β -半乳糖甙酶活性、巨噬细胞的吞噬活性等具有显著的激活和促进作用。当异物侵入机体时,免疫细胞被乳酸菌激活,增强了机体对异物产生抗体的作用。Pollman(Sorrels KM, Speck ML. Inhibition of Salmonella gallinarum by Culture Filtrates of Leuconostoc citrovorum. J Dairy Sci, 1970,53 =237-243)给无菌仔猪口服嗜酸乳杆菌后引起白细胞数和血清总蛋白数(主要是球蛋白)浓度提高。Herich(Pergidon G,Nader de Macias ME, Alvarez S, Oliver G, Pesce De Ruiz Holgado AA. Systemic augmentation of the immune response in mice by feeding fermented milks with Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus. Immunol, 1988,63 :17-23)报道,饲喂干酪乳杆菌后仔猪白细胞总数和嗜中性细胞数显著增加。SorrelsCJuven BJ, Meinersman RJ, Stern NT. Antagonidtic effect of Lactobacijli and prdiococci to control intestinal colonization by human enteropathogons in live poultry. J Appli Bacteri,1991,70 95-103)报道,明串珠菌(Leuconostocci trovorum)代谢产生的乙酸和乳酸对沙门氏菌有抑菌效果,其中乙酸起了主要作用。Juven(Herich RjRevajova V,Levkut M. The effect of Lactobacillus paracasei and raftiloseP95Upon the non-specific immune responseof piglets. Food agric immunol,2002,14 :171-179)报道乳酸菌产生过氧化氢或细菌素类物质,对有害菌有杀菌作用。因此,利用益生菌抑制动物体内的有害菌繁殖,提高动物机体免疫力已在禽、畜养殖中发挥重要作用。粪肠球菌(Enterococcus faecalis)又称粪链球菌,根据最新的分类规则,粪肠球菌(Enterococcus faecalis)属肠球菌属。与屎肠球菌一样,粪肠球菌同属人和动物肠道中正常的有益菌群,早在1994年就是我国农业部批准使用的微生物品种之一,也是1989年美国食品及药品管理局(FDA)公布了可以用作饲料添加剂的42种微生物之一。专利文献CN 101067120A公开了一株添加到食品中用于治疗人类胃病的粪肠球菌,CN 1948464A公开了一种利用粪肠球菌生产L-瓜氨酸的方法,CN 101352198A公开了一种禽类粪肠球菌发酵混合饲料的制备方法、CN 101701201A公开了一株用于生产酪胺(对羟基-β-苯乙胺)的粪肠球菌,CN 101792726Α公开了一株能够吸附霉菌毒素的粪肠球菌。上述专利文献中公开的粪肠球菌均为研究粪肠球菌抗胆盐和胃酸的性质及其在仔猪饲料中的应用方法,没有涉及其抑菌效果的研究。
本发明的目的是提供一株对致病菌具有抑制作用的可用于制备饲料和饲料添加剂的粪肠球菌。本发明所提供的粪肠球菌菌株(Enterococcus faecalis)的名称为SBD,该菌株已于2011年05月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为 CGMCC No. 4848。粪肠球菌(Enterococcusfaecal is) SBD CGMCC No. 4848 是革兰氏阳性菌,显微镜下观察呈球形,不形成芽孢;在MRS琼脂平板上生长良好,4 形成圆整、光滑、隆起、灰白色露滴样、直径0. 5-lmm大小、菌落;兼性厌氧生长,生长温度范围10°C -50°C,最适生长温度30°C -40°C ;生长酸碱度范围pH 4-10,最适pH值为6. 5 ;部分生化特性如表1所示表1 粪肠球菌(Enterococcus faecalis) SBD CGMCC No. 4848 的部分生化特性本发明公开了粪肠球菌(Enterococcus faecalis)SBD CGMCC No.4848,是革兰氏阳性菌,显微镜下观察呈球形,不形成芽孢;在MRS琼脂平板上生长良好,48h形成圆整、光滑、隆起、灰白色露滴样、直径0.5-1mm大小、菌落;兼性厌氧生长,生长温度范围10℃-50℃,最适生长温度30℃-40℃;生长酸碱度范围pH 4-10,最适pH值为6.5。由该菌株制成的菌剂无毒无害,耐胃液,耐胆盐,对多种有害菌有很强的抑制作用,可广泛应用到禽、畜养殖业(直接添加到动物日粮或饮用水中即可)中,可增强动物抗病能力,有望成为饲用抗生素的替代物,并且能够明显提高断奶仔猪的平均增重,降低料肉比,还能改善禽、畜生存环境,应用前景广阔。

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