利用长枝木霉重构三七中的皂苷成分的制作方法[0001]【技术领域】，涉及一种木霉发酵改变三七中单体皂苷含量和组成的方法。[0003]三七[/--?: no toginseng (Burk.) F.H.Chen]为五加科人参属植物,主产于云南，主要活性成分为三七总阜苷OcIaflar no toginseng saponins, PNS)。目前为止，已从三七中分离出70余种人参皂苷，均属达玛烷型四环三萜皂苷。按其皂苷元类型又可细分为两类:20(S)_原人参二醇型[20 (S) -protopanaxadiol]和20(S)_原人参三醇型[20 (S) -protopanaxatriol]。其中原人参二醇型皂苷包括 Rbl、Rb2、Re、RcU Rh2、Rg3、Rb3、C-K,PPD ;原人参三醇型皂苷包括Rgl、Rg2、Re、Rl、Rhl、Fl、PPT。天然皂苷中含量较高的是Rgl、Rbl、RcU R1、Re、Re ;含量甚微的稀有皂苷为 Rg2、Rg3、Rhl、Rh2、F1、F2、PPD、C_K、PPT。其中人参皂苷Rd的含量较Rgl和Rbl少很多，西洋参含0.1-0.2%，人参含0.2-0.3%，三七含0.5-0.7%。但Rd对心脑血管、神经系统、免疫系统等作用独特。目前，人参皂苷Rd已完成II期临床试验，正在开展III期临床研究，有可能成为治疗脑中风的新型临床治疗药物，同时，在镇痛、神经保护作用方面，人参皂苷Rd有比其它单体皂苷更强的活性。人参皂苷Rd在植物中含量少，化学结构复杂，化学合成至今尚未成功，目前仅能从原植物的根、茎、叶中提取，效率低，成本高，严重制约了人参皂苷Rd的开发利用 对人参皂苷不同时段体内代谢产物的研究表明:绝大多数天然人参皂苷在胃肠道中吸收较差，人参皂苷在胃液作 用下只发生轻微的水解反应，代谢产物在肠液中酶或菌的作用下，糖苷键逐步断裂，将连在C3、C6、C20位的糖逐步降解成稀有皂苷才真正发挥药理作用。通过对皂苷活性的研究发现，人参皂苷的抗肿瘤活性与皂苷糖链结构的关系为:苷元 > 单糖苷> 二糖苷 > 三糖苷 > 四糖苷。人参皂苷的结构因糖基侧链的不同，表现出性质和功能的较大差异，不同的人参单体皂苷具有不同的药理活性。日本学者Hasegawa经过多年研究，总结出了原人参二醇型(Rbl、Rd和Re)皂苷口服后，在大肠中被肠道菌水解成C-K，然后进入血液发挥药理作用；原人参三醇型(Rgl、Rl和Re)皂苷口服后，在大肠中被肠道菌水解成原人参三醇PPT，然后进入血液，由此得知大量人参皂苷是前药，真正发挥作用的是它们的代谢产物C-K以及苷元PPT，同时C-K可以进一步降解成PPD。[0004]但是，这种体内的转化过程受到多种个体因素的制约，转化甚微。因此，采用微生物转化技术在体外有效地改造皂苷的糖链结构，重构三七总皂苷单体皂苷的种类和含量具有重要研究意义。[0005]目前，得到稀有人参皂苷的方法主要有加热法、酸解法、碱解法、Smith降解法和酶法。化学法可以使皂苷水解，但它们的水解条件都十分剧烈，不易控制，水解副产物多，且易污染环境。生物法具有反应选择性强、反应条件温和、副产物少、不造成环境污染、后处理简单等优点。本发明以三七药材为主要培养基成分，用三七中分离得到的长枝木霉为菌种进行发酵，获得原药材中缺乏的活性成分，优化三七总皂苷中各皂苷的组成和比例，达到改善药效的目的。[0006]