专利名称：一种鉴定或辅助鉴定小麦新疆拉面品质性状基因的pcr体系的制作方法面条是我国北方居民的传统食品，是人们日常主食之一。在2000多年的发展过程中，面条在不同地域形成了其特色形式。在新疆地区，拉面是当地日常主食之一，深受人们喜爱。作为鲜湿白盐面条，新疆拉面以其制作、食用方便，口感弹韧、光滑，拌菜丰富、美味等诸多优点，已逐渐走出新疆地区，被全国各地的人们所接受和喜爱。据统计，新疆地区小麦面粉年产量的80%用于制作拉面。但是，与新疆拉面在人们日常饮食中日益重要的地位相比，新疆拉面品质的评价仍以传统仪器分析和成品感官评价相结合的方法为主，直接限制了其发展。因此，创建微量、快速的优质拉面评选方法，对于拉面专用品种的栽培、选育和优质拉面的加工、评价具有重要意义。近年来，随着生活水平的提高，人们对新疆拉面品质的要求越来越高，品质相关研究已得到重视。目前研究主要集中于与优质拉面相关的磨粉、蛋白质、淀粉、面团流变学特性等品质品指标的筛选，评价方法的改良和拉面专用品种的选育方面。因为拉面品质构成因素较复杂，与其相关的指标较多，所以通过新疆拉面品质评价方法的研究，将筛选出的指标有效应用于其品质评价，成为新疆拉面品质改良的关键环节。新疆拉面评价指标主要包括面条色泽和感官评价两部分。面条色泽除受小麦出粉率、蛋白质含量及面粉颗粒指数等磨粉品质指标的影响外，黄色素(YP)含量和多酚氧化酶 (PPO)活性对其也有显著影响(胡凤灵，何中虎，葛建贵，等.小麦品种黄色素含量和多酚氧化酶活性基因的分子标记检测.麦类作物学报[J]. 2011,31 (1) :47-53.) 0根据评价标准 (穆培源，桑伟，王亮，等.新疆市售小麦面粉制作新疆拉面的加工品质特性及其专用粉品质评价指标的研究[J].麦类作物学报，2007，27 (6) :1034-1041.)，优质新疆拉面最佳色泽为亮白色，而低的YP含量和PPO低的活性品种，具有较好的白度和颜色性状。籽粒或面粉YP 含量主要受八氢番茄红素合酶(PSY)基因影响，与面粉和面团的白度高度负相关(Kruger J EiMatsuo R R,Presten K. A comparison of methods for the prediction of Cantonese noodle colour [J]. Canadian Journal of Plant Science，1992，72 :1021—1029.)，与其黄度高度正相关，低的YP含量基因型为Psy-Alb和Psy-Blb ；PPO活性主要受Ppo基因影响， 可以解释面条(团)颜色褐变变异的50% 70%，是引起面条(团)颜色变褐的主要原因(Kruger J E,Hatcher D W,De Pauw R. A whole seed assay for polyphenol oxidase in Canadian prairie spring wheats and its usefulness as a measure of noodle darkening [J], Cereal Chemistry, 1994,71 :324-326.)，籽粒或面粉低的 PPO 活性基因型为Ppo-Alb和Ppo-Dla。因此，对低YP含量和PPO低活性目标基因型的鉴定，可作为新疆拉面色泽快速预测的方法。Psy-Ala为高黄色素含量基因型，Psy-Alb为低黄色素含量基因型，Psy-Alc基因型品种较罕见，其中Psy-Alb有利于提高对新疆拉面的白度，为拉面优质基因。PpoDl位点的Ppo-Dla为中等低PPO活性的基因型，可以减缓面条颜色褐变。拉面感官评价主要包括拉面手感、面条质地、口感等项目。研究表明，蛋白质特性、 淀粉特性和籽粒硬度等品质性状，可通过对面团流变学特性和淀粉糊化特性的影响在一定程度上决定拉面的感官评价结果(Yun S H,Quail K,Moss R. Physicochemical properties of Australian wheat flours for white salted noodles[J]. Journal of Cereal Sciences,1996,23 :181-189.)。蛋白质的数量与质量对面条品质有重要影响，其质量主要是指面粉中醇溶蛋白与麦谷蛋白的构成及比例，不同的蛋白质构成赋予了小麦籽粒蛋白质不同的质量，其中，高分子量谷蛋白亚基(HMW-GQ和低分子量谷蛋白亚基(LMW-GQ的组成与面团的粘弹性及延伸性密切相关，在一定程度上决定了面条的品质。适合新疆拉面制作的面粉一般为中筋，且具有较好的延伸性。卢静等人研究发现(芦静，黄天荣，聂莉小麦高分子量谷蛋白亚基及 1B/1R易位系对新疆拉面品质性状的影响[J],新疆农业科学，2010，47 (10) 1909-1917.)， HMW-GS 7+8,5+10,2+10等对新疆拉面的品质有正向效应，但未对Glu-Al位点的优质 HMW-GS和优质LMW-GS予以说明。对优质拉面品种的HMW-GS和LMW-GS的分子标记检测发现，除已发现的优质拉面亚基类型外，2*和Glu-B3a等亚基类型对新疆拉面的品质也有一定的正向效应。Glu-Al位点的Ax2*基因表达的2*亚基通过提高面筋强度(Payne P I， Lawrence G J. Catalogue of alleles for the complex gene loci, Glu-Al,Glu-Bl, and Glu-Dl which code for high molecular weight subunits of glutenin in hexaploid wheat [J]. Cereal Research Communications, 1983，11 :29-35.)，对拉面品质有一定的贡献。此外，1B/1R易位对小麦的蛋白特性也有显著影响。小麦的IB染色体短臂被黑麦的 IR染色体短臂取代而形成小麦-黑麦1B/1R易位系。易位使普通小麦IB染色体短臂上 LMW-GS(Glu-B3位点)和醇溶蛋白(Gli-Bl位点)缺失，或被品质较差的黑麦碱(secalin 基因编码)取代，导致面团粘性增大，强度降低，对面团流变学特性和面条品质都有极显著的负面影响(Wieser H, Kieffer R, Lelley T. The influence of 1B/1R chromosome translocation on gluten protein composition and technological properties ofbread wheat [J]. J Sci Food Agric, 2000,80 1 640-1 647·)。芦静(芦静，黄天荣，聂莉.小麦高分子量谷蛋白亚基及1B/1R易位系对新疆拉面品质性状的影响[J].新疆农业科学，2010,47(10) :1909-1917.)等研究发现，与非1B/1R易位系(不含有ω-secalin S 因)相比，1B/1R易位系(含有ω-secalin基因)的各项加工品质均显著降低，大多不能满足优质拉面制作的要求，在新疆拉面品质育种中应当淘汰。LMW-GS对小麦面粉加工品质起着重要的作用，主要影响面筋的强度和延展性 (Cornish GB,Bekes F,Allen HM,et al. Flour proteins linked to quality traits in an Australian doubled haploid wheat population[J]. Aust J Agric Res,2001,52: 1339-1348.)。He等(He ZH,Liu L，Xia XC,et al,Composition of HMW and LMW glutenin subunits and their effects on dough properties,pan bread,and noodle quality of Chinese bread wheats[J]. Cereal Chem，2005，82 :345-350.)和 Liu 等(Liu L，He ZH, Yah J,et al. Allelic variaion at the Glu-I and Glu_3 loci presence of the 1B/1Rtranslocation, and their effects on mixographic properties in Chinese bread wheat [J]. Euphytica，2005，142 :197-204.)对中国小麦品种的 Glu-I 和 Glu_3 位点的等位变异做了较详细的研究，表明Glu-A3和Glu-B3位点与面包和面条品质相关，其中Glu_B3 位点的d和b等位基因对面团延展性的作用大于其他等位基因；在对和面时间的贡献上，表现为 Glu-Dl > Glu-B3 > Glu-Al = Glu-Bl = Glu_A3 ；对面团耐揉性而言，Glu-Dl > Glu_B3 =Glu-Bl > Glu-A3 > Glu-Al ；对 SDS 沉淀值的影响大小依次为 Glu_B3 > Glu-Bl > Glu-Al > Glu-Dl > Glu-A30在提高面团最大抗延阻力方面，不同的等位变异具有不同的效应，在 Glu-A3位点，b>d>e>c，在Glu-B3位点，i >b = a>e = f = g = h>c，在Glu-D3位点， e>b>a>c>d (Gupta RB，Singh NK，Shepherd KW. The cumulaive effect of allelic variaion in LMW and HMW glutenin subunits on dough properties in the progeny of two bread wheats[J]. Theor Appl Genet，1989，77 :57-64. Gupta RBiBekes FiWrigley CW. Prediction of physical dough properties from glutenin subunit composition in bread wheats[J]. Cereal Chem,1991,68 :328-333.Metakovsky EV, Wrigley CW,Bekes F，et al· Gluten polypeptides as useful genetic markers of dough quality in Australian wheats [J]. Aust J Agric Res，1990，41 :289-306.)。而且近来很多育种学以及数量遗传学等方面的研究认为，LMW-GS对提高面团的强度和延展性，进而改良面包的品质方面具有很高的正效应(Nelson JCiAndreescu CiBreseghello F，et al. Quantitative trait locus analysis of wheat quality traits[J]. Euphytica,2006，149 145-159. Li Y， Song Y， Zhou R， et al.Detection of QTLs for bread-making quality in wheat using a recombinant inbred line population [J]. Plant Breeding, 2009,128 :235-243. Mann G，Diffey S，Cullis B，et al. Genetic control of wheat quality !interactions between chromosomal regions determining protein content and composition, dough rheology, and sponge and dough baking properties[J]. Theor Appl Genet，2009，118 1519-1537. Oury F-XiChiron H,Faye A,et al. The prediction of bread wheat quality joint use of the phenotypic information brought by technological tests and the genetic information brought by HMW and LMW glutenin subunits[J]. Euphytica,2010, 171 :87-109. Raman R，Allen H，Diffey S，et al. Localization of quantitative trait loci for quality attributes in a doubled haploid population of wheat(Triticum aestivum L.) [J] · Genome，2009，52 :701-715.)。 淀粉的含量、直链淀粉与支链淀粉的比例对面条的柔软度、弹性和光滑度有很大影口向(Toyokawa H, Rubenthaler G L, Powers J R, et al. Japanese noodle qualities I. Flour components [J], Cereal Chem，1989，66 (5) :387-391.)，对面条的感官评价有重要影响。在小麦籽粒淀粉合成中，糯蛋白(Waxy)是合成直链淀粉的关键酶(Miura H， Tanii S, Nakamura T, et al. Genetic control of amylase content in wheat endosperm starch and differential effects of three Wx genes[J]. Theor Appl Genet,2000, 100(1) :32-38.),由ffx-Al、Wx-Bl和Wx-Dl三个基因编码合成(罗光彬，黄修文，尤明山， 等.小麦fe基因研究进展[J].粮油食品科技，2010，18(6) :1-4.)，它主要是通过直链淀粉含量影响面条品质的。一般认为直链淀粉含量低的面粉做出的面条评分高(赵俊晔， 于振文.小麦籽粒蛋白质和淀粉代谢及其与品质形成关系的研究进展[J].麦类作物学报，2005,25(3) :106-111.)。在普通小麦的三个fe蛋白亚基中，同样缺失单个亚基的情况下，缺失Wx-Bl亚基使直链淀粉减少得最多，同时也使得膨胀势和峰值粘度增高幅度最大(Miura H, Araki E, Tarui S. Amylose synthesis capacity of the three Wx gene of wheat cv.Chinese Spring [J].Euphytica,1999,108 (2) :91-95.Araki E, Miura H, Sawada S. Differential effects of the null alleles at the three Wx loci on the starch-pasting properties of wheat[J]. Theor Appl Genet,1991,97 :199-205. Yamamori M, Quynh N T.Differential effects of Wx-Al, Wx-Bl and Wx-Dl protein deficiencies on apparent amylase content and starch pasting properties in common wheat [J]. Theor Appl Genet，1994，89 :276-280.)，面粉的面条加工品质较好(刘建军，何中虎，杨金，等.小麦品种淀粉特性变异及其与面条品质关系的研究[J].中国农业科学，2003，36(1) :7-12.)。籽粒硬度的主效基因puroindoline位于5D染色体短臂，分为Pina和Pinb两种类型，其不同变异对小麦磨粉品质和食品加工品质有重要的影响。Chen等(陈锋，尚晓丽，董中东，等.中国小麦历史品种puroindoline基因等位变异检测[J].麦类作物学报，2011， 31(3) =389-394)研究表明，Pinb-Dlb比Pina-Dlb类型出粉率高、灰份低、具有更好的磨粉品质，同时前者的馒头、面条和面包加工品质也均优于Pina-Dlb和野生型。新疆拉面的传统评价方法需要多种分析仪器、样品用量大、测定周期长，且很难实现大量材料、多个指标的同时检测，制约了新疆拉面的品质改良和评价。随着与小麦加工品质相关基因的克隆及其分子标记的开发，利用特异性引物对品质基因进行快速PCR检测的方法得到广泛应用。但新疆拉面的品质改良涉及多个基因，传统的PCR方法一般一次只能检测一个或少数几个基因，很难满足拉面专用品种的选育及其后续筛选、加工、评价的需求。
本发明的目的是提供用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组、试剂盒，以及利用所述多重PCR引物对组鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状的方法。本发明所提供的用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR 引物对组为如下al)或a2)或a3)的引物对组al)由引物对组Adl物对组B和引物组C组成的弓丨物对组；a2)由两个引物对组组成，其中一个引物对组为所述引物对组C，另外一个引物对组为所述引物对组A或所述引物对组B ；a3)引物对组C;所述引物对组A中的引物对均特异于拉面色泽相关基因，具体由特异于I^sy-Al基因的两个引物对，和特异于Ppo-Dl基因的一个引物对组成；所述引物对组B中的引物对均特异于拉面面筋强度、面筋质量和磨粉品质相关基因，具体由特异于Ax2*基因的一个引物对，特异于Pinb-Dlb基因的一个引物对，和特异于ω-secalin基因的一个引物对组成；所述引物对组C均特异于拉面面筋强度、粘性和光滑性相关基因，具体由特异于所述Glu-B3a 基因的一个引物对，和特异于所述fe-Bl基因的一个引物对组成。所述引物对组A中，所述特异于I^sy-Al基因的两个引物对分别为序列表中序列1 和序列2所示的两条单链DNA组成的引物对1，以及序列3和序列4所示的两条单链DNA组成的引物对2 ；所述特异于Ppo-Dl基因的一个引物对为序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成的引物对3 ；所述引物对组B中，所述特异于Ax2*基因的一个引物对为序列表中序列7和序列 8所示的两条单链DNA组成的引物对4 ；所述特异于PinbDlb基因的一个引物对为序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成的引物对5 ；所述特异于ω-secalin基因的一个引物对为序列表中序列11和序列12所示的两条单链DNA组成的引物对6。所述引物对组C中，所述特异于Glu_B3a基因的一个引物对为序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA组成的引物对7 ；所述特异于Wx-Bl基因的一个引物对为序列表中序列15和序列16所示的两条单链DNA组成的引物对8。其中，序列1由20个核苷酸组成；序列2由22个核苷酸组成；序列3由20个核苷酸组成；序列4由20个核苷酸组成；序列5由20个核苷酸组成；序列6由20个核苷酸组成；序列7由21个核苷酸组成；序列8由20个核苷酸组成；序列9由21个核苷酸组成 ’序列10由18个核苷酸组成；序列11由20个核苷酸组成；序列12由20个核苷酸组成；序列 13由20个核苷酸组成；序列14由19个核苷酸组成；序列15由25个核苷酸组成；序列16 由22个核苷酸组成。 本发明中，所述Psy-Al基因有三个等位基因，分别是Psy-Ala、Psy-Alb和 Psy-Alc ；所述Ppo-Dl基因有两个等位基因，分别是Ppo-Dla和Ppo-Dlb ；所述基因有两个等位基因，分别是fe-Bla和fe-Blb。所述引物对组A中每个引物对的两条引物在PCR反应体系中等量使用，且所述引物对1，所述引物对2和所述引物对3在PCR反应体系中的摩尔比为1 4 1;所述特异引物对组B中每个引物对的两条引物在PCR反应体系中等量使用，且所述引物对4，所述引物对5和所述引物对6在PCR反应体系中的摩尔比为1 1 1;所述特异引物对组C中每个引物对的两条引物在PCR反应体系中等量使用，且所述引物对7和所述引物对8在PCR 反应体系中的摩尔比为5 2。含有所述用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组的试剂盒也属于本发明的保护范围。所述用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组的制备方法也属于本发明的保护范围。该制备方法具体可包括将所述用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组中各引物对的所述两条单链DNA分别单独包装的步骤。所述试剂盒的制备方法也属于本发明的保护范围。该制备方法具体可包括如下步骤将所述用于鉴定或辅助鉴定待测小麦拉面品质性状相关基因的多重PCR引物对组中各引物对的所述两条单链DNA分别单独包装后，与下述物质中的至少一种包装在同一试剂盒内PCR反应缓冲液、DNA聚合酶和4种dNTP。下述al)-a4)中任一种的方法也属于本发明的保护范围al)鉴定或辅助鉴定待测小麦含有Psy-Ala、Psy-Alb和Psy-Alc这三种基因中哪一种、含有Ppo-Dla和Ppo-Dlb这两种基因中哪一种，是否含有Ax2*基因、Pinb-Dlb基因和ω-secalin基因这三种基因中的至少一种，是否含有Glu_B3a基因，以及含有基因和fe-Blb基因这两种基因中哪一种；a2)鉴定或辅助鉴定待测小麦含有Psy-Ala、Psy-Alb和Psy-Alc这三种基因中哪一种、含有Ppo-Dla和Ppo-Dlb这两种基因中哪一种，是否含有Glu_B3a基因，以及含有 Wx-Bla基因和fe-Blb基因这两种基因中哪一种；a3)鉴定或辅助鉴定待测小麦是否含有Ax2*基因、Pinb-Dlb基因和ω-secalin基因这三种基因中的至少一种，是否含有Glu-B3a基因，以及含有fe-Bla基因和fe-Blb基因这两种基因中哪一种；a4)鉴定或辅助鉴定待测小麦是否含有Glu_B3a基因，以及含有基因和 Wx-Blb基因这两种基因中哪一种；其特征在于所述al)的方法包括下述(1)和O)的步骤所述(1)为如下bl)、b2)和 b3)bl)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求1或3所述引物对组中的所述引物对组A进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为60°C ；b2)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求1或3所述引物对组中所述引物对组B进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为从62°C起，每进行1个PCR反应循环下降 0. rc ；在本发明的实施例中，用所述引物对组B进行PCR反应共进行了 35个循环；b3)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求1或3所述引物对组中的所述引物对组C进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为55. 50C ；(2)检测步骤(1)得到的PCR产物的大小，按照如下方法根据PCR产物确定所述待测小麦含有I^sy-Ala、Psy-Alb和Psy-Alc这三种基因中哪一种，含有Ρρο-Dla和Ppo-Dlb 这两种基因中哪一种，是否含有Ax2*基因、Pinb-Dlb基因和ω-secalin基因这三种基因中的至少一种，是否含有Glu-B3a基因，以及含有fe-Bla基因和fe-Blb基因这两种基因中哪一种以所述引物对组A进行PCR反应的产物中，如果同时含有大小为1686bp和194bp 的两个DNA片段，所述待测小麦含有I^y-Ala基因或候选含有I^y-Ala基因；如果同时含有大小为1686bp和231bp的两个DNA片段，所述待测小麦含有I^y-Alb基因或候选含有 I^sy-Alb基因；如果同时含有大小为IOOlbp和194bp的两个DNA片段，所述待测小麦含有 I^y-Alc基因或候选含有I^y-Alc基因；如果含有大小为713bp的DNA片段，所述待测小麦含有Ppo-Dla基因或候选含有Ppo-Dla基因；如果不含有大小为713bp的DNA片段，所述待测小麦含有Ppo-Dlb基因或候选含有Ppo-Dlb基因；以所述引物对组B的进行PCR反应的产物中，如果含有大小为1319bp的DNA片段， 所述待测小麦含有Ax2*基因或候选含有Ax2*基因；如果不含有大小为1319bp的DNA片段， 所述待测小麦不含有Ax2*基因或候选不含有Ax2*基因；如果含有大小为250bp的DNA片段， 所述待测小麦含有Pinb-Dlb基因或候选含有Pinb-Dlb基因；如果不含有大小为250bp的 DNA片段，所述待测小麦不含有Pinb-Dlb基因或候选不含有Pinb-Dlb基因；如果含有大小为1067bp的DNA片段，所述待测小麦含有ω-secalin基因或候选含有ω-secalin基因； 如果不含有大小为1067bp的DNA片段，所述待测小麦不含有ω-secalin基因或候选不含有 ω-secalin 基因；以所述引物对组C的进行PCR反应的产物中，如果含有大小为1095bp的DNA片段， 所述待测小麦含有Glu-B3a基因或候选含有Glu-B3a基因；如果不含有大小为1095bp的 DNA片段，所述待测小麦不含有Glu-B3a基因或候选不含有Glu_B3a基因；如果含有大小为 425bp的DNA片段，所述待测小麦含有Wx-Bla基因或候选含有Wx-Bla基因；如果不含有大小为42^p的DNA片段，所述待测小麦含有fe-Blb基因或候选含有基因；所述a2)的方法包括下述(3)和的步骤所述⑶为如下cl)和c2)cl)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2中的1)或权利要求3所述引物对组中的所述引物对组C进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为55. 50C ；c2)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2中的1)或3所述引物对组中的所述引物对组A进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为60°C ；(4)检测步骤(3)得到的PCR产物的大小，所述检测步骤(3)得到的PCR产物的大小的方法同步骤O)；所述a3)的方法包括下述(5)和(6)的步骤所述(5)为如下dl)和d2)dl)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2中的1)或3所述引物对组中的所述引物对组C进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为55. 5°C ；d2)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2中的1)或3所述引物对组中所述引物对组B进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为从62°C起，每进行1个PCR反应循环下降0. I0C ；在本发明的实施例中，用所述引物对组B进行PCR反应共进行了 35个循环；(6)检测步骤(5)得到的PCR产物的大小，所述检测步骤(5)得到的PCR产物的大小的方法同步骤O)；所述a4)的方法包括下述(7)和(8)的步骤(7)以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2中的2)或3所述引物对组中的所述引物对组C进行PCR反应，所述PCR反应的退火温度为55. 5°C ；(8)检测步骤(7)得到的PCR产物的大小，所述检测步骤(7)得到的PCR产物的大小的方法同步骤O)。本发明的另一个目的是提供一种培育拉面小麦品种的方法。该方法包括采用如下a)_g)中至少一种的小麦作为亲本进行育种的步骤a)含有或候选含有I^y-Alb基因；b)含有或候选含有Ppo-Dla基因；c)含有或候选含有Ax2*基因；d)含有或候选含有Pinb-Dlb基因；e)不含或候选不含有ω-secalin基因；f)含有或候选含有Glu_B3a基因；g)含有或候选含有化^让基因。从众多小麦品种中选择满足a)_g)中至少一项的小麦的方法，即为上述鉴定或辅助鉴定待测小麦含有I^sy-Ala、Psy-Alb和Psy-Alc这三种基因中哪一种，含有Ppo-Dla和Ppo-Dlb这两种基因中哪一种，是否含有Ax2*基因、Pinb-Dlb基因和co-secalin基因这三种基因中的至少一种，是否含有Glu-B3a基因，以及含有fe-Bla基因和fe-Blb基因这两种基因中哪一种的方法。所选择的小麦满足上述a)_g)七项中的项数越多，表示所选择的小麦越适合制作拉面。在本发明的实施例中，所述待测小麦具体为新疆冬小麦，如小麦品种(系)新冬16 号、新冬20号、冀麦26、小偃54、巴冬2号、新乌克兰83、新乌克兰84、北系11、燕大1885、 新冬M号、新冬27号、新冬28号、奎冬4号、冀麦M、冀麦31、石冬8号、89-2012、新冬22 号、新冬 23 号、藁优 8901、HD04-23、79-18、新冬 14 号、新冬 18 号、85 (1)、89 (35)、80182、花 91-26、89-44、新冬2号、新冬7号、华北497,91 (28)、新冬19号、石冬9号和87YF5等。利用本发明对上述小麦品种(系)进行鉴定或辅助鉴定后，发现小麦品种冀麦31同时具有拉面色泽优质基因Psy-Alb和Ppo-Dla，小麦品种石冬8号具有拉面面筋强度、面筋质量和磨粉品质优质基因Ax2*和Pinb-Dlb的同时，又不含有影响拉面品质的co-secalin基因，小麦品种(系)华北497和冀麦31同时具有拉面粘性和光滑性优质基因Glu-B3a和fe-Blb。本发明所提供的引物对组A或引物对组B或引物对组C的各引物对之间不存在相互抑制作用和错配，检测品种(系)的结果可靠、重复性好，成本低。本发明所提供的引物对组A或引物对组B或引物对组C均选用同样的退火温度，实现了相同温度一次PCR完成一组基因的鉴别，且特异性强，检测过程耗时短。将本发明含有引物对组A或引物对组B或引物对组C的多重PCR体系用于小麦品质育种的亲本评价和杂交后代优质基因的聚合，将会提高优质拉面专用小麦品种评价和选育的效率，加快拉面专用小麦品种的加工品质改良。图1为I^sy-Alalsy-AllKPsy-Alc和Ppo-Dla基因标记的多重PCR琼脂糖凝胶电泳图。图2为Ax2*、Pinb-Dlb和ω-secalin基因标记的多重PCR琼脂糖凝胶电泳图。图3为Glu_B3a、Wx-Bla和基因标记的多重PCR琼脂糖凝胶电泳图。



本发明公开了一种用于鉴定或辅助鉴定小麦拉面品质性状基因的PCR体系及其应用。本发明PCR体系的引物对组为引物对组A、引物对组B和引物对组C这三个引物对组中，包括引物对C在内的至少一个引物对组；所述引物对组A中的六条引物由序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6所示DNA单链组成；所述引物对组B的六条引物由序列7、序列8、序列9、序列10、序列11和序列12所示DNA单链组成；所述引物对组C的四条引物由序列13、序列14、序列15和序列16所示DNA单链组成。本发明所提供的引物对组各引物间不存在抑制和错配，实现了相同温度一次PCR完成一组基因的鉴别，且结果可靠、特异性强，耗时短，为优质拉面小麦品种选育及加工品质改良提供依据。