专利名称：一种丝孢酵母菌株及其在石油精制中的应用方法 利用微生物炼油的技术在1906年已有的报导，主要是进行石油气、甲烷微生物氧化，围绕低级石油烃的氧化机制和其它基础性进行研究。到1963年，法国报道了石油烃的氧化方法，随后其他国家相继开展了石油发酵研究，获得了工业化的成果，目前，采用微生物的方法可以生产低凝润滑油产品和基础油品等。由于微生物发酵一般在在常温常压下进行，避免了用常规方法生产石油化工产品时需要的高温高压条件，大量减少能源消耗，同时又可以利用了微生物专一氧化的选择性，达到采用其它脱蜡工艺达不到的脱蜡深度，获得高附加值的油品及副产品，因此，国内外均进行了深入的研究和应用。1961年，中国科学院有机化学研究所开始微生物脱蜡制油的研究试验，70年代实现工业化，一些石油化工厂也随之建立了微生物脱蜡装置，拥有了年产3000吨低凝润滑油产品的能力。在上述的微生物石油精制工艺中一般选用脱蜡球拟酵母菌株(由克拉玛依油田筛选)，这种石油酵母菌株的生命活性较短，脱蜡、破乳效果不好，成产效率低，使得单位油品成产时间长，能耗高。
本发明目地在于提供一种具有更强的生命活性，脱蜡效率高，易破乳，提高生产效率的丝孢酵母菌株及其在石油精制中的应用方法。本发明提供一种用于石油精炼的丝孢酵母(Trichosporon sp.CGMCC NO.0694)菌株。本发明菌株形态学特征为细胞形态，节孢子矩形，两端圆滑，大小为2.4-4.8×4.8-9.6μm，芽殖细胞卵形至椭圆形2.4-6×2.9-9.6μm，乳白色至淡黄色，表面皱褶，暗淡，边缘有菌丝长出，产生节孢子、芽殖细胞和真菌。本发明提供一种丝孢酵母菌株石油精制的方法，酵母菌用于油品发酵，酵母培养的生物量从小容器逐渐过渡到生产容器，其工艺方法和条件是在常温下，菌种先在斜面培养，温度25~30℃，后移至小、大摇瓶培养，再顺序进入一级和三级种子罐分别发酵10~18小时，条件是通风、PH3.5-4.5，再同原料油、水、培养基一同进入生产罐混合发酵30~100h，达到控制指标后经升温、破乳制成油品。本发明还提供如下精制方法精制常温温度为25~30℃。原料油的粘度V40，18~35mm2/S。
进入生产罐油、水比是1∶1~1∶2。
培养基为通用酵母菌培养基。
升温温度为95±4℃。
控制指标是油品倾点不高于-43℃。
本发明效果如下本发明比现有使用的菌株具有更强的生命活性，脱蜡效率大幅度提高，脱蜡时间可缩短30~40小时，同时降低了单位能耗，更易破乳，可以改善基础油性质，获得使用性能更佳的低凝油产品。
现有菌种与本发明菌株发酵性能比较表

注转接周期为斜面经逐级放大，直到可用于发酵罐发酵所需时间


本发明

如下附图1为本发明实施例一工艺流程图；附图2为本发明实施例二工艺流程图；附图3为本发明实施例三工艺流程图；附图4为本发明实施例四工艺流程图。
发明实施例本发明定名为的丝孢酵母(Trichosporon sp.)；保藏单位是中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心(CGMCC)；保藏菌株编号0693(CGMCC NO.0694)。
本发明有以下形态学上特征在麦芽汁液体培养基中培养25℃下培养三天后，菌落乳白色至淡黄色，表面皱褶，暗淡，边缘有菌丝长出，产生节孢子、芽殖细胞和真菌。节孢子矩形，两端圆滑，大小为2.4-4.8×4.8-9.6μm，芽殖细胞卵形至椭圆形2.4-6×2.9-9.6μm，本发明不能发酵葡萄糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖、棉子糖。
本发明能同化半乳糖、蔗糖、麦芽糖、纤二糖、海藻糖、乳糖、蜜二糖、棉子糖、可溶性淀粉、D-木糖、L-阿拉伯糖、D-阿拉伯糖、核糖、甘油、D-甘露醇、D-山梨醇、扬梅苷、DL-乳酸、琥珀酸、柠檬酸、硝酸盐，本发明不能同化山梨糖、松三糖、L-鼠李糖、赤藓糖醇、核糖醇、半乳糖醇、肌醇。
本发明在无类淀粉物质产生；在无维生素培养基中不生长；可在37℃下生长本发明菌种是从独山子石油基地现场取含菌样本，采用通常的微生物提取方法，如经过初筛、分离单菌株、纯化，然后经过烷烃发酵筛选获得的。通过对原始菌种和连续育种，并在琼脂培养基表面接种，分离出酵母纯种，然后在此基础上，对其生化和发酵性鉴定。
从以上所述的呈不同形态特征的菌落中选出生长速度快、发酵活性高的酵母菌株，经多次转化，对挑出的酵母菌，定名为丝孢酵母(Trichosporon sp.)菌株，并通过丝孢酵母(Trichosporon sp.)菌株发酵获得-40℃以下的低凝油品及石油酵母。
本发明还提供一种丝孢酵母菌株石油精制的方法，酵母菌用于油品发酵，酵母培养的生物量从小容器逐渐过渡到生产容器，其工艺方法和条件是在常温下，菌种先在斜面培养，温度25~30℃，后移至小、大摇瓶培养，再顺序进入一级和三级种子罐分别发酵10~18小时，条件是通风、PH3.5~4.5，再同原料油、水、培养基一同进入生产罐混合发酵30~100h，达到控制指标后经升温、破乳制成油品。
本发明在常温温度为25~30℃下培养，所用原料油的粘度V40，18~35mm2/S，进入生产罐的油、水比是1∶1~1∶2，培养基为通用酵母菌培养基，升温温度为95±4℃，控制指标是油品倾点不高于-43℃。
实施例一按附1工艺流程操作，获得45#变压器油基础油。
在无菌室将本发明酵母菌转接到小摇瓶，大摇瓶，一级罐，三级罐五级培养增殖，接入含有原料油的发酵罐内，经过30小时发酵，取样测凝固点合格，停罐，破乳，沉降，离心，即可获得低凝点45#变压器油基础油及石油酵母废液。
实施例二按附2工艺流程操作，获得22#冷冻机油基础油。
在无菌室将酵母菌转接到小摇瓶，大摇瓶，一级罐，三级罐五级培养增殖，接入含有原料油的发酵罐内，经过100小时发酵，取样测倾点合格，停罐，破乳，沉降，离心，即可获得低凝点22#冷冻机油基础油及石油酵母废液。
实施例三按附3工艺流程操作，获得32#冷冻机油基础油。
在无菌室将酵母菌转接到小摇瓶，大摇瓶，一级罐，三级罐五级培养增殖，接入含有原料油的发酵罐内，经过60小时发酵，取样测倾点合格，停罐，破乳，沉降，离心，即可获得低凝点32#冷冻机油基础油及石油酵母废液。
实施例四按附4工艺流程操作，可获得8#稠化机油基础油。
在无菌室将酵母菌转接到小摇瓶，大摇瓶，一级罐，三级罐五级培养增殖，接入含有原料油的发酵罐内，经过100小时发酵，取样测倾点合格，停罐，破乳，沉降，离心，即可获得低凝点8#稠化机油基础油及石油酵母废液。
按照本发明以上实施例，在类似的工艺流程和条件下，可获得30#工程液压油、30#机械油、8#中增压柴机械油等基础油。


本发明是一种丝孢酵母菌株及其在石油精制中的应用方法，丝孢酵母(Trichosporon sp.CGMCC NO.0694)菌株，特征为乳白色至淡黄色，表面皱褶，暗淡，边缘有菌丝长出，产生节孢子、芽殖细胞和真菌。节孢子矩形，两端圆滑，大小为2.4－4.8×4.8－9.6μm，芽殖细胞卵形至椭圆形2.4－6×2.9－9.6μm。本发明提供菌株石油精制的方法，酵母培养先在斜面培养，温度25～30℃，后移至小、大摇瓶培养，再顺序进入一级和三级种子罐分别发酵10～18小时，条件是通风、pH3.5－4.5，再同原料油、水、培养基一同进入生产罐混合发酵30～100h，达到控制指标后经升温、破乳制成油品。本发明具有更强的生命活性，脱蜡效率高，易破乳，生产效率高，可以改善基础油性质，获得使用性能更佳的低凝油产品。