酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用制作方法

陆晓民, 丁亚锋

2003年3月12日

2002年2月5日

2002年2月5日

陆晓民

A61K47/42GK1401391SQ0211444

酪蛋白 多肽 中成药 中草药

1.一种酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用；其特征在于将酪蛋白和/或多肽添加至中草药/中成药中2.如权利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用，其特征在于在中草药/中成药中添加其总量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽3.如权利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用，其特征在于所述的多肽选自酪蛋白肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、鱼蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一种

本发明涉及一种酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用近年研究表明，以数个氨基酸结合而成的低肽具有比多个氨基酸更好的营养和生理功能，其中许多多肽类还具有原蛋白质或组成氨基酸所没有的新功能因而自80年代国内外对肽类的研究不断深入现今已有众多产品广泛用于食品加工，例如用于特制育儿奶粉、饮料、口服液、流食、运动员等专用饮料和食品、治疗食品、过敏反应专用食品、养颜护肤化妆品等领域，随着研究的不断深化新的应用领域还在不断地被拓展，特别在医药领域MARUYAMAS等从牛乳酪蛋白的蛋白水解物中获得了十二肽、七肽、五肽及六肽，这些肽的生理功效现已证实对高血压的ACE有明显明显抑制作用，即作用于产生高血压的原因，因此它对正常人而言可以长期摄取，起到保健、营养双重作用，极其安全1986、88年，Georgi、Hosono等发现酪蛋白在特定的酸制剂作用下，酪蛋白水解中有抗诱变性的活性肽存在，这些肽如继续水解到氨基酸水平将失去抗诱变性目前在国外，各种肽的研究在继续深化，酪蛋白磷肽的研究最为明朗，并且已有大量的、各类型的保健品上市酪蛋白活性多肽具有抗过敏性、抗高血压、抗诱变、免疫调节，延缓衰老、激素分泌和细胞繁殖，增强吞噬细胞，保护表皮细胞，防止黑色素沉淀等多种功效国外酪蛋白复合(活性)多肽在保健品、医药、饮料、婴儿奶制品、咖哩饭、糖果，营养强化剂、饲料添加剂、家庭副食品、食品添加剂等领域以不同的功效起着特殊的作用实践已证实它非常安全，无毒害，其独特的生理功效等优点，显示出它具有强大的优越性1998年，德国已将酪蛋白磷肽纯化后用于医药，并列入德国国家药典中在美国，含肽药物已获准用来医治某些疾病，诸如侏儒症、不育症、早熟症等还有些肽类可能用来治疗癌、抗抑郁、防治失眠等后天免疫缺乏病及老年性痴呆症等本发明的公开本发明的目的是为了提供一种将酪蛋白及多肽添加至中草药或中成药中，由肽在中草药中起导向作用，带领中草药中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治疗效果、缩短治疗时间本发明的目的可通过如下措施来实现一种酪蛋白及多肽在中草药/中成药中的应用是将酪蛋白和/或多肽添加至中草药/中成药中在中草药/中成药中添加其总量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽所述的酪蛋白及多肽选自市售产品所述的多肽选自酪蛋白多肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、鱼蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一种本发明相比现有技术具有如下优点本发明在中草药或中成药中添加酪蛋白及多肽，使在中草药的植物蛋白基础上添加大分子多肽类蛋白质；使多肽成为中草药的导向物质，带领中草药中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治疗效果，缩短治疗时间本发明的实施本发明还将结合实施例作进一步详述实施例1将酪蛋白多肽添加至中成药贞芪扶正冲剂中添加酪蛋白复合多肽的扶正冲剂的原料配伍为黄芪30g、女贞子12g、地黄20g、枸杞30g、党参30g、甘草15g、当归8g、茯苓10g、柴胡6g、大枣20g、酪蛋白多肽18g本实施例，经对衰老模型小鼠免疫作用及过氧化作用试验证实酪蛋白多肽添加至贞芪扶正冲剂中可增强衰老模型小鼠脑组织SOD的活性、降低过氧化脂质产物的含量的作用本实施例的实验方法如下1.材料 1.1材料1.1.1动物昆明种小白鼠，雌雄各半，体重20.0±1.0g，由卫生部兰州生物制品研究所提供动物合格证号医动字第14-001号1.1.2标准测试盒分别由中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所、北方放免研究所、南京建成生物工程研究所提供标准测试盒，并由兰州医学院第一附属医院核医学科及甘肃中医学院检测2.方法及结果2.1对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及脑组织MDA含量的影响小鼠110只，雌雄各半，体重20.0±1.0g，随机分为11组，每组10只，生理盐水组ig等容量生理盐水6周；余实验小鼠分别在颈背部皮下注射5％D-半乳糖并同时ig相应的药物，模型组ig等容量生理盐水液0.5ML/日，多肽组按大、中、小剂量组ig多肽1.8g/kg及1.2g/kg、0.6g/kg；复合生命肽I组按大、中、小剂量组ig多肽1.8g/kg+贞芪扶正冲剂1.95g/kg、多肽1.2g/kg+贞芪扶正冲剂1.3g/kg、多肽0.6g/kg+贞芪扶正冲剂0.65g/kg；复合生命肽II组按大、中、小剂量组ig多肽1.8g/kg+枸杞0.03g/kg、多肽1.2g/kg+枸杞0.02g/kg、多肽0.6g/kg+枸杞0.01g/kg，每日一次，六周末分别取大脑组织制成10％的组织匀浆分别检测过氧化物岐化酶活性的检测应用放射免疫法均按标准测试盒说明测定，丙二醛含量的检测均应用7220分光度计按标准测试盒说明测定2.1.1复合生命肽I组对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响表1对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响(X±S)动物数 SODMIDA模型组 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理盐水组 10 34.793±1.762*26.328±1.222**多肽组(大) 10 28.658±0.878 27.517±0.891(中) 10 28.893±1.198 26.850±0.835*(小) 10 31.233±2.416*26.707±1.271*注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.012.1.2复合生命肽I组对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响表2对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响(X±S)动物数 SOD MDA模型组 10 27.994±0.33727.948±0.967生理盐水组 10 34.793±1.762**26.328±1.222**复合生命肽I组(大) 10 31.311±2.753**25.672±1.039**(中) 10 36.340±1.690**24.896±0.764**(小) 10 42.197±1.075**22.655±1.636**注与模型组比较**P＜0.012.1.3复合生命肽II组对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响表3对衰老模型小鼠脑组织SOD活性及MDA含量的影响(X±S)动物数 SODMDA模型组 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理盐水组 10 34.793±1.762**26.328±1.222**复合生命肽II组(大) 10 29.650±1.458*26.931±1.043*(中) 10 41.003±2.809**23.776±0.866**(小) 10 44.334±1.693**22.759±1.318**注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.012.2对衰老模型小鼠免疫功能的影响小鼠150只，雌雄各半，实验分15组及给药同上，六周末分别取血清检测白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)含量的检测均放射免疫法按标准测试盒说明测定2.2.1多肽组对衰老模型小鼠血清IL-2含量的影响表4对衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影响(X±S)动物数IL-2模型组 10 0.949±0.068生理盐水组 10 1.211±0.076**多肽组(大) 10 1.002±0.076(中) 10 1.002±0.060(小) 10 1.167±0.116*注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.012.2.2复合生命肽I组对衰老模型小鼠血清IL-2含量的影响表5对衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影响(X±S)动物数 IL-2模型组 10 0.949±0.068生理盐水组 10 1.211±0.076**复合生命肽I组(大) 10 1.190±0.095**(中) 10 1.241±0.068**(小) 10 1.330±0.125**注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.012.2.3复合生命肽II组对衰老模型小鼠血清IL-2含量的影响表6对衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影响(X±S)动物数 IL-2模型组 10 0.949±0.068生理盐水组 10 1.211±0.076**复合生命肽I组(大) 10 1.050±0.082*(中) 10 1.174±0.101**(小) 10 1.260±0.086**注与模型组比较*P＜0.05**P＜0.013、讨论衰老是生命过程中正常而又复杂的生理现象，是机体内各种生化反应的综合过程随着年龄的增长，自由基产生增多而清除自由基的相关酶活性下降以及机体免疫功能下降等多种因素均是机体发生衰老的重要机理超氧化物岐化酶(SOD)可催化氧自由基的岐化反应，是机体清除氧自由基的重要酶，而机体随着年龄的增长，氧自由基产生增加，同时组织SOD活性降低，导致氧自由基堆积自由基(如O2、-OOH等)可通过过氧化作用攻击细胞膜、RNA和蛋白质等成分，引起脂质过氧化和促进分子交联、DNA基因突变和DNA复制异常；促进细胞膜上的不饱和脂肪酸产生过氧化反应，形成丙二醛(MDA)等，同时可形成大分子脂褐素(Lipofascin，LK)在酶体中沉积，导致细胞功能严重受损，机体因而逐渐趋于衰老人到中年以后，正常免疫功能随着年龄增长而逐渐衰退，免疫功能衰退是人体衰老的原因之一IL-2的主要生物活性是促进CTL和NK细胞增殖；促进B细胞分化和增殖，促进抗体生成，诱导生成淋巴因子激活的杀伤细胞LI-2和IL-2受体系统，是T细胞转化和混合淋巴细胞反应的介质老年人产生IL-2能力，IL-2受体表达能力及自身混合淋巴细胞反应能力降低，是T细胞分裂能力降低的主要原因IL-2在免疫应答、免疫调节，在抗肿瘤免疫中具有重要作用，因而IL-2产生减少可加速人体衰老的过程应用中医药防治恶性肿瘤及延缓衰老亦是近年来研究的热点，并取得了长足进展传统医学从整体观点出发，如《素问、生气通天论》曰“阴平阳秘，精神乃治；阴阳离决，精气乃绝”，指出机体的衰老以及死亡的根本原因在于六淫外邪，五脏虚损所致的阴阳失调或离决，扶正固体、协调阴阳乃延缓衰老之关键恶性肿瘤属中医“癌”、“岩”、“恶肿”、“积聚”等范畴，系正气虚弱、留滞客邪、气滞血瘀、邪毒积聚、蕴郁成块所致，其治疗法则有扶正固本法、通经活络法、活血化瘀法、软坚散结法、疏肝理气法等如枸杞等为延缓衰老、抗肿瘤的要药现代药理研究发现枸杞子对KATO-III细胞有明显的抑制作用，主要表现为抑制DNA合成、干扰细胞分裂增殖；超微结构显示细胞变化、细胞器受不同程度的破坏枸杞多糖注射可显著促进脾细胞增殖，LAK细胞抗瘤活性升高，体外IL-2用量减少75％尤以提高快速LAK活性为明显枸杞子的丙酮提取液对致癌剂诱导的突变株TA98、TA100有抑制突变作用，抑制率分别为91.8％、82.6％说明枸杞子有抗突变物质和具有抗御、阻断致突变作用枸杞提取液在试管内及体内试验均有明显抑制小鼠肝过氧化脂质(LPO)的生成作用，并呈剂量反应关系；并使活体小鼠血中谷肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和红细胞超氧化物岐化酶(SOD)活力增高人体试验显示可明显抑制血清LPO生成，使血中GSH-PX活力增高预先口服枸杞，可以明显降低诱变剂丝裂霉素C诱发的老年人姐妹染色单体互换频率，说明枸杞能提高老年人DNA修复能力，对遗传物质损伤有保护作用，提示枸杞提取液具有延缓衰老作用葛根有效成分S86019对人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞增殖有明显抑制作用，是一个有效的HL-60细胞分化诱导剂有研究证实，葛根有明显诱生肿瘤坏死因子(TNF)作用将中医药与多肽类物质有机结合研制的复合生命肽保健、治疗效果更佳，应用于人们保健治疗中，适应人类医疗“回归大自然”的趋势，可以满足绿色天然药品的社会需要，为人类身体的健康开拓一片新的保健、治疗天地本实验过程观察了多肽组、复合生命肽I组(多肽+扶正冲剂)、复合生命肽II组(多肽+枸杞)对D-半乳糖所致衰老小鼠脑组织SOD活性的影响作用，实验结果发现复合生命肽I组、复合生命肽II组、复合生命肽III组均有一定的增强衰老模型小鼠脑组织SOD的活性、降低过氧化脂质产物(MDA)含量的作用，且I、II组强与I组，并与剂量呈正相关，表明该制剂具有抗过氧化作用，此作用可能为该制剂的抗衰老作用机理之一另外，多肽I组、复合生命肽I组、复合生命肽II组匀可增加衰老模型小鼠血清白细胞介素2(IL-2)含量的作用，且I、II组强与多肽组，并与剂量呈正相关综上所述，复合生命肽可增强衰老模型小鼠抗过氧化作用以及免疫功能，从而可发挥延缓衰老过程实施例二将酪蛋白添加至传统中成药香砂养胃丸中其配伍为党参20g、白术10g、茯苓8g、苍术5g、甘草5g、半夏曲6g、陈皮5g、砂仁25g、木香20g、香附10g、枳壳10g、厚朴15g、六神曲10g、南山楂20g、麦芽15g、菜菔子10g、酪蛋白36g实施例三将大豆糖聚肽添加至传统中成药朱砂安神丸中其配伍为朱砂200g、黄莲300g、生地黄200g、当归200g、甘草200g、大豆糖聚肽44g实施例四将白蛋白肽添加至传统中成药牛黄解毒片中其配伍为牛黄5g、大黄200g、黄芩150g、石膏200g、桔梗100g、雄黄50g、冰片25g、甘草50g、白蛋白肽200g