专利名称：一种用于调节免疫力的中药保健食品及其制备方法免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物，处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力，现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异已”的生理反应，免疫力低下的身体易于被感染或患癌症，免疫力超常也会产生对身体有害的结果，如引发过敏反应，自身免疫疾病等。随着人们物质文化的改善及生活水平的提高，人们对自身健康越来越重视，同时，随着生活的快节奏，环境污染及食品安全等问题的出现，使人体的免疫力也受到一定程度的影响，市场上也涌现出各种的保健食品及保健性药品等，但目前保健食品普通存在价格偏高，效果却不甚理想的状况。
本发明的目的在于提供一种用于调节免疫力的中药保健食品，以调节人体免疫力。同时，本发明的目的还在于提供一种用于调节免疫力的中药保健食品的制备方法。为了实现上述目的，本发明的技术方案采用了一种调节免疫力的中药保健食品，主要包括以下组分西洋参25-40% ;龙眼肉40-50% ;赋形剂15-30%。所述的赋形剂为甘露醇，蔗糖，葡萄糖，木糖醇，淀粉或糊精中的一种或任意组口 o可以为药学上可接受的任意剂型。所述的剂型优选为咀嚼片。同时，本发明的技术方案还提供了一种调节免疫力的中药保健食品的制备方法，其特征在于包括以下步骤取西洋参粉碎，过筛；龙眼肉加溶媒提取2-3次，合并提取液，提取液浓缩，浓缩至相对密度为I. 20-1. 28的稠膏；西洋参粉与赋形剂混合均匀，加入龙眼肉提取浸膏混匀、干燥；混合干膏粉碎，过筛，制粒，过筛，湿颗粒在45-50°C干燥，控制颗粒水分在3-5%，加入1-2%的润滑剂压片，即得。所述的润滑剂为硬脂酸镁，滑石粉或微粉硅胶中的一种或任意组合。所述的赋形剂为甘露醇，蔗糖，葡萄糖，木糖醇，淀粉或糊精中的一种或任意组口 O所述的溶媒为水。所述的混合干膏粉碎用适宜浓度即60% — 90%的乙醇制粒。本发明的用于调节免疫力的中药保健食品也可以采用其余常规的片剂的制备方法来制备。I.剂型选择本发明剂型为片剂，采用现代工艺制成易于被广大消费者接受的咀嚼片，与普通片剂相比，咀嚼片具有以下优点分散状态佳，崩解时间短，药物溶出迅速，吸收快，生物利用度高，服用方便。2.工艺路线确定本发明的原料中西洋参为名贵药材，其主要成分也易于被人体直接吸收，所以采用粉碎直接投料。龙眼肉主要含葡萄糖,酒石酸,蔗糖,维生素BI，维生素B2，维生素P，维生素C，多糖等，主要为水溶性成分，龙眼果肉水溶性提取物对正常小鼠免疫调节作用大于龙 眼果浆，所以用水作为提取溶媒，采用传统的水煎煮提取。辅料选用甘露醇，由于甘露醇无吸湿性，颗粒易于干燥，同时溶解时吸热，有甜味，对口腔有舒服感，作为咀嚼片的赋形剂比较合适。同时，龙眼肉浸膏同西洋参粉和甘露醇混合后干燥，以提高干燥效率。本发明采用西洋参与龙眼肉配伍，方中龙眼肉性味甘温，功能益心脾，补气血，安神益智，主治劳伤心脾，气血不足，心悸失眠，神疲体倦，面色萎黄，饮食欠佳等症。西洋参性味甘凉，功能补益肺气，肾气，养阴生津，主治气虚阴亏虚热烦倦，消渴，口燥咽干。龙眼肉与西洋参配伍，采用龙眼肉的甘温与西洋参的甘凉相济，温而不燥，凉而不寒，补血养心，益肺生津，使机体气血充足，增强机体免疫力。既补益肾气固本，又补肺以增强气血津液的分布，同时益心脾而使营卫气血充足。西洋参的生理功能有1.提高免疫力，对中老年人脏器功能衰弱、免疫功能低下、适应环境能力减退，有一定保健作用，可增强机体对各种有害刺激的特异防御能力。2.对大脑有镇静作用，对神经中枢有中度兴奋作用。3.中医认为性凉者可补，可以补肺降火，易气生津，可安神并提高智力，具有补肾益精，调补五脏等作用。龙眼肉作为食品含有丰富的营养，同时作为药品又具有独特的生理活性，通过龙眼肉提取物生理功效及其活性成分的研究，测定相关生理指标，发现其具有抗衰老、调节免疫力、抗肿瘤、调节内分泌等作用。龙眼肉与西洋参配伍温而不燥，凉而不寒，是药食两用的滋补上品，解决一般调节免疫力保健食品容易造成体内积热的问题，而且西洋参、龙眼肉调节免疫力效果显著。制备方法如下将西洋参、甘露醇粉碎，过筛；龙眼肉加水提取3次，合并提取液，提取液浓缩，浓缩至相对密度为I. 28 (70°C)的稠膏；西洋参粉与蔗糖混合均匀，置于槽型混合机中，加入龙眼肉提取浸膏混匀、干燥；混合干膏粉碎用70%乙醇制粒，过筛，湿颗粒在48°C干燥，控制颗粒水分在4%，加入占原料总重I. 5%的润滑剂(滑石粉)压片，即得咀嚼片。实施例3本实施例的调节免疫力的中药保健食品主要是以下重量百分含量组分组成西洋参40% ;龙眼肉40% ;甘露醇20%。制备方法如下将西洋参、甘露醇粉碎，过筛；龙眼肉加水提取3次，合并提取液，提取液浓缩，浓缩至相对密度为I. 20 (70°C)的稠膏；西洋参粉与木糖醇混合均匀，置于槽型混合机中，加入龙眼肉提取浸膏混匀、干燥；混合干膏粉碎用90%乙醇制粒，过筛，制粒，过筛，湿颗粒在50°C干燥，控制颗粒水分在5%，加入占原料总重2%的润滑剂(微粉硅胶)压片，即得咀嚼片。调节免疫力功能实验一、材料和方法I 样品实施例I所制备的咀嚼片，用粉碎机粉碎后作为受试样品。2 动物雌性BALB/c小鼠，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证书0191492，SPF级。实验动物房许可证号SYXK (豫)2007-0008，屏障环境。将小鼠分为四批，每批48只，体重18g 22g，每批按体重随机分为四组，每组12只。免疫一批进行脏器/体重比值、小鼠碳廓清试验；免疫二批进行迟发型变态反应、抗体生成细胞检测、HC5tl测定；免疫三批进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验；免疫四批进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定。3剂量选择三个剂量组低、中、高分别为人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即0. 34g/kg、0. 68g/kg、2. 04g/kg，分别取I. 7g、3. 4g、10. 2g样品加蒸馏水至100ml，作为低、中、高三个剂量组的受试液，另设溶剂对照组为蒸馏水。经口给予每日一次，灌胃量为20ml/kg，各试验组均连续灌胃30天后测相应的免疫指标。4实验方法和观察指标①脏器/体重比值测定小鼠称重后脱白处死，取脾脏与胸腺，滤纸吸干表面血污称重，计算脾脏/体重比值和胸腺/体重比值。②小鼠碳廓清试验小鼠尾静脉注射1:3稀释的印度墨汁，按每IOg体重0. Iml计算，待墨汁注入，立即计时。墨汁注入后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20iU，并立即将其加到2ml 0. 1%碳酸钠溶液中。用半自动生化分析仪在600nm波长处测定光密度(0D)，以碳酸钠溶液作空白对照。将小鼠处死，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，称重，计算吞噬指数a K= (IgOD1-IgOD2) / (Vt1) a=体重 + (肝重 + 脾重)XK"3③迟发型变态反应、
绵羊红细胞诱发小鼠DTH(足跖增厚法):取羊血，用生理盐水洗涤3次(2000r/min，10分钟)，每只鼠经腹腔注射2% (v/v，用生理盐水配制)压积SRBCO. 2ml，致敏后4天，测量左后足跖部厚度，同一部位测量三次，取平均值；然后在测量部位皮下注射20% (v/v，用生理盐水配制)压积SRBC20 u 1，于注射后24小时测量左后足跖部厚度，以攻击前后足跖厚度的差值来表示DTH的程度。④抗体生成细胞检测(Jerne改良载片法)将压积SRBC用生理盐水配成2%的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0. 2ml进行免疫，五天后，将小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，放在盛有Hank’ s液的研磨器内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心(1000r/min) lOmin，用Hank’ s液洗2遍，最后将细胞悬浮在8ml RPMI 1640培养液中。将表层培养基(Ig琼脂糖加双蒸水至IOOml)加热溶解后，放45°C水浴保温，与等量pH7. 2-7. 4、2倍浓度的Hank’ s液混合，分装小试管，每管0. 5ml，再向管内加50 u I 10%SRBC (v/v，用SA液配制)，25yl脾细胞悬液，迅速混匀，倾 到于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中温育I. 5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1:6)加入到玻片架凹槽内，继续温育I. 5h后，计数溶血空斑数。⑤半数溶血值(HC5tl)的测定将压积SRBC用生理盐水配成2%的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0. 2ml进行免疫，五天后,摘眼球取血,分离血清。血清用SA缓冲液稀释300倍，取稀释后的血清1ml，依次加入10%SRBC0. 5ml，补体Iml (用SA缓冲液按1:6稀释)，另设不加血清对照管(用SA缓冲液代替)。置37°C恒温水浴30min，冰浴终止反应。2000r/min离心lOmin，取上清液1ml，都氏剂3ml于试管内，同时取10%SRBC (v/v) 0. 25ml，加都氏剂至4ml于另一试管内，充分混匀，放置IOmin后，于540nm处测定各管光密度值。
样品光密度值
样品HC5q= -X稀释倍数
SRBC半数溶血时的光密度值⑥小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(体外法)实验前4天给每只小鼠腹腔注射2%压积绵羊红细胞0. 2ml。用颈椎脱臼法处死小鼠，经腹腔注射给予小鼠含有5%小牛血清的Hank’s液5ml/只，轻揉腹部20次后抽取腹腔清洗液2ml，取0. 5ml腹腔清洗液加入盛有Hank’ s液配制成1%鸡RBC悬液0. 5ml的试管内，混匀，取混悬液0. 5ml涂片，放入垫有湿纱布的瓷盘内，置37°C温箱内15min，取出后用生理盐水从玻片背面冲洗，固定、染色、阅片。计算吞噬率和吞噬指数。⑦ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’ s液的研磨器内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤。用他111^液洗2次，每次离心101^11(100017^11)。然后将细胞悬浮于2mL的完全培养液中，计数活细胞数，调整细胞浓度为3 X IO6个/ml。再将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔lml，在其中一孔加75 ill ConA液(相当于7. 5 y g/ml)，另一孔作为对照，置5%C02，37°C CO2培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0. 7ml，加入0. 7ml不含小牛血清的RPMI 1640培养液，同时加入MTT (5mg/mL) 50 yl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入Iml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。用半自动生化分析仪以570nm处测光密度值。淋巴细胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值减去不加ConA孔的光密度值表不。⑧NK细胞活性测定无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’ s液的研磨器内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤,用Hank’s液洗2次,每次离心10min( 1000r/min),最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2 X IO7个/ml，取靶细胞和效应细胞各100 ill (效靶比50 :1)，加入U型96孔培养板；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100 yl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1%NP40各100 ill ;上述各项均设三个复孔，于37°C、5%C02培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100 U I置平底96孔培养板，同时加入LDH基质液100 ill，反应3min，每孔加入lmol/L的盐酸30 yl，在酶标仪490nm处测定光密度值(OD)。


本发明涉及一种用于调节免疫力的中药保健食品及其制备方法，中药保健食品主要包括以下组分西洋参25-40%；龙眼肉40-50%；赋形剂15-30%。西洋参和龙眼肉都具有抗衰老、调节免疫力、抗肿瘤、调节内分泌等作用，且增强免疫力效果显著。龙眼肉与西洋参配伍温而不燥，凉而不寒，是药食兼用的滋补上品，解决一般增强免疫力保健食品容易造成体内积热的问题。