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一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法

  • 专利名称
    一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法
  • 发明者
    张天真, 曹志斌, 王鹏
  • 公开日
    2014年1月15日
  • 申请日期
    2013年8月12日
  • 优先权日
    2013年8月12日
  • 申请人
    南京农业大学
  • 文档编号
    A01H5/00GK103509861SQ201310350208
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、纤维强度和马克隆值的分子育种方法,其特征在于包括 1)以新疆棉区品系0768为轮回亲本母本,以IL080- D6 -1和1047为非轮回亲本父本,杂交I代杂交产生BC1F1,以0768为父本,BC1F1为母本配制杂交产生BC2F1,每代都是混收混种; 2)分子标记辅助第一次选择=BC2F1种植,应用CTAB法提取DNA,采用IL080-D6 -1导入片段上的分子标记NAU3677和NAU1454及1047导入片段上的分子标记NAU3419和NAU2277进行PCR扩增,选择同时含有2个分子标记条带分别为NAU3677和NAU1454的单株与同时含2个分子标记条带分别为NAU3419和NAU2277单株进行杂交,收获杂交种子并种植得到2个片段聚合的杂合植株继续自交;其中所述的分子标记NAU3677正向引物为SEQ ID N0.1,反向引物为SEQ ID N0.2,PCR产物大小为180bp ;所述的分子标记NAU1454正向引物为SEQID N0.3,反向引物为SEQ ID N0.4,PCR产物大小为300bp ;所述的分子标记NAU3419正向引物为SEQ ID N0.5,反向引物为SEQ ID N0.6,PCR产物大小为400bp ;所述的分子标记NAU2277正向引物为SEQ ID N0.7,反向引物为SEQ ID N0.8,PCR产物大小为120bp ; 3)分子标记辅助第二次选择种植2个片段聚合F2分离群体,每株提取DNA后,再利用染色体片段A的分子标记NAU3677和NAU1454及染色体片段B的分子标记NAU3419和NAU2277进行前景选择确定F2单株的基因型,同时只有4个分子标记条带分别为180bp、300bp、400bp、120bp的单株利用62个多态性标记对这些纯合单株进行遗传背景选择,将这些纯合单株继续进行四环镜下的田间试验并自交2代至F24,在F24家系中选择纤维长度32.00 - 33.70mm,纤维强度 34.4 - 35.7cN/tex,马克隆值 3.01 - 3.45,单铃重 5.55 - 6.05g,衣分36.8 - 37.2%,背景选择显示背景恢复率为87.1%的纤维品质显著改良家系Dl即为改良棉花纤维长度、纤维强度和马克隆值的育成品系
  • 技术领域
    [0001]本发明属于分子育种领域,涉及一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法
  • 专利摘要
    本发明属于分子育种领域,涉及一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法。以IL080-D6-1和1047(IL019‐A2‐6染色体片段导入系)2个导入系为非轮回亲本分别和轮回亲本(新疆0768),进行杂交1次,回交2代,在BC2F1将含不同染色体片段的株系间互交,得到双片段聚合的F2分离群体,通过2个片段上的各2个分子标记鉴定出双片段纯合的单株,进行四环镜的田间试验,并继续自交2代得到双片段纯合且纤维长度、纤维强度和细度得到极显著改良的棉花新品系。利用这一方法,已经培育出优质、高产的棉花新品系“南农08‐66”。
  • 发明内容
  • 专利说明
    一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
一种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法[0002]棉花是世界性的重要经济作物。中国是棉花的生产大国,消费大国和纺织大国。作为棉花生产大国,我国主产棉区覆盖16个省、市(自治区),常年植棉面积7000— 8000万亩,总产约600万吨,占世界总产的四分之一。随着纺织技术的进步,纺织产品也从粗支纱发展到高支纱甚至达到100支的细沙,加工对象也由一般中绒棉发展到中长绒棉、长绒棉和超长绒棉。王延琴等通过2003— 2007年连续5年在三大主产棉区选取546个基点,2201份棉花样品进行纤维质量检测发现我国陆地棉样品的纤维长度平均28.8mm,变幅24.0~34.7mm,主要处于细绒棉的中绒(28.0~31.0mm)范围,即中与长的范围;断裂比强度平均 28.3cN/tex,变幅 19.7-38.3cN/tex,多数处于中等(26.0 ~29.0cN/tex)范围,即中到强的范围;马克隆值平均4.2,变幅2.0~5.2,多数在(3.7~4.9)范围(王延琴,杨伟华,许红霞,周大云,冯新爱,匡猛.中国棉花生产中存在的主要问题及建议.中国农学通报,2009,25(14):86-90)。中国棉花基本能满足纺织工业的需要,但缺乏长度在31mm以上,断裂比强度在34cN/tex以上,马克隆值在3.7~4.2之间的特优质品种,来满足纺60支以上高支纱的需要。[0003]一般棉花品种纤维品质性状的遗传分析均表现出典型数量性状遗传方式,易受环境条件影响。在不同分离群体中,加性、显性或上位性效应均可能占主导地位。利用野生种的高强力性状和海岛棉的优良品质基因杂交渐渗和转育,是当代育种家获取高强力纤维的主要途径。海岛棉生育期长,成熟晚,铃小,产量低于陆地棉,但纤维细强,是纺高支纱原料;而陆地棉的产量高,适应性广,纤维品质中等,但显著优于亚洲棉和草棉。陆地棉、海岛棉两者杂交的F1可育,表型正常,且有明显的产量、品质的杂种优势,印度、以色列、中国已成功培育出海、陆杂交种在生产上大面积推广利用。但是,两者杂交的后代表现典型的种间杂交的疯狂分离,棉花育种家一直努力想培育出既具陆地棉的高产,又有海岛棉优质的新品种,一直没有成功。分子标记技术在纤维品质改良育种中的应用大大减少了育种过程中选择的盲目性,快速实现外源优良种质向栽培品种渗透,拓宽了品种的遗传基础。国内外研究人员对纤维品质进行了大量的QTL定位,有的已经用于标记辅助选择育种实践。[0004]染色体片段导入系(Chromosomesegment introgression lines,CSIL)是利用杂交,回交和分子标记辅助选择(marker-assisted selection, MAS)构建的覆盖作物整个基因组的一系列近等基因系。它的基因组内只有来自供体亲本的一个纯合的染色体片段,而基因组的其余部分与轮回亲本相同。它是进行基因组研究,特别是QTL定位和分子设计育种的理想材料。万建民已利用由粳稻Asominori (轮回亲本)和籼稻IR24 (非轮回亲本)构建的染色体片段置换系进行了分子育种的实践。
[0005]本发明的目的是针对现有技术的上述不足,提供一种改良棉花纤维长度、纤维强度和马克隆值的分子育种方法。[0006]本发明的目的可通过如下技术方案实现:[0007] —种通过聚合染色体片段导入系同步改良棉花纤维长度、强度和细度的分子育种方法,包括:[0008]I)以新疆棉区品系 0768 为轮回亲本(早),以 IL080 - D6 - 1(ZL201110127252.7)和1047(IL019 - A2 - 6染色体片段导入系)为非轮回亲本(? ),杂交I代,回交2代获得BC2F1,每代都是混收混种;[0009]2)分子标记辅助第一次选择=BC2F1种植,应用CTAB法提取DNA,采用IL080 -D6 -1导入片段上的分子标记NAU3677和NAU1454 (表1)及1047 (IL019 -Α2 -6染色体片段导入系)导入片段上的分子标记NAU3419和NAU2277 (表1)进行PCR扩增,选择同时含有2个分子标记条带分别为180bp (NAU3677);300bp (NAU1454)的单株与同时含2个分子标记条带分别为400bp (NAU3419) ;120bp (NAU2277)单株进行杂交,收获杂交种子并种植得到2个片段聚合的杂合植株继续自交;
[0010]表1引物特征带大小及序列

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