专利名称：一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法手性β-羟基酯类化合物的ー项重要用途是作为合成药物奥利司他(Orlistat)的中间体。奥利司他是ー种脂肪酶抑制剂。它在胆汁盐的參与下，与胃肠道脂肪酶形成无活性的中间体，对酶产生不可逆抑制，从而削弱脂肪的消化和吸收，使肠道内长期处于油相状态，使胆固醇隔离出来并经粪便排泄，从而減少热量摄入，控制体重。奥利司他(Orlistat)以其独特的生物活性被各国研究者广泛的研究，并于1999年6月被批准上市。瑞士的弗·哈弗曼-拉罗切有限公司在中国申请的ー项专利中公开了制备奥利司他中间体的合成路线(专利申请号01111916. O)。具体做法是先将5，6- ニ氢吡喃-2-酮氢化还原，然后将生成的手性S-内酯在碱性条件下进行开环反应并分离，得到β-羟基酯类的奥利司他中间体。开环反应时，还需要用手性试剂(PG)与5位羟基反应，将5位羟基保护起来，同时使得β_羟基具有手性。如该专利中所描述的，这种利用化学合成方法合成手性β_羟基酯化合物的方法在产业上并不实用和经济，原因是1)合成路线长，使β_羟基酯的生产成本高；2)控制5位羟基的手性试剂比较昂贵，导致这种合成路线的实用价值较低。因此，开发一种高效、低成本且易于产业化生产的手性β_羟基酯化合物的合成方法是十分有必要的。
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种手性羟基酯类化合物的酶催化合成方法。为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案 一种手性β_羟基酯类化合物的酶催化合成方法，合成路线和步骤如下 1)、使化合物α)与化合物(ii)在0°c 室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应，所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流，然后重结晶得化合物(iii)； 2)、将化合物(iii)、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6 8的磷酸缓冲液中，15 40°C下反应疒24小时，得到所述手性β_羟基酯类化合物(iv);其中，按质量计，酮还原酶在反应体系中的加入量与化合物(iii)的加入量的比为广10:1 ;所述辅酶为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(MD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)。优选地，所述化合物(i)至化合物(i V)中的R1和R2各自独立地选自烷基或芳基。进ー步地，所述化合物(i)至化合物(iv)中的R1选自碳原子3 15之间的饱和烷基，R2选自碳原子在f 6之间的饱和烷基。本发明的ー个是，所述化合物⑴至化合物(iv)中的R1选自C11H23-, R2 选自 CH3-。优选地，步骤2)的反应体系中还加入了用于辅酶再生的辅酶再生系统，所述辅酶再生系统选自如下几种辅酶再生系统中的一种①葡萄糖和葡萄糖脱氢酶、②异丙醇、③甲酸铵和甲酸铵脱氢酶。优选地，步骤2)中还加入了助溶剂，所述助溶剂选自二甲亚砜、乙二醇、聚乙二醇400 (即PEG400)和甘油中的一种或多种的混合物。由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有如下优点
本发明采用酶催化合成方法制得手性3 -羟基酯类化合物，无需使用昂贵的手性试齐U，具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点，因此具有很高的实用价值。

是用酶催化合成方法制备出一种用于合成奥利司他的中间体(S)-3-羟基十四碳酸甲酯，具体步骤如下
1)、使月桂酰氯I与丙二酸环亚异丙酯II在0°C至室温、吡啶做缚酸剂、二氯甲烷做溶剂的条件下反应2小时左右，所得产物经萃取浓缩，再加入甲醇中回流4飞小时，然后重结
晶，得到月桂酰乙酸甲酯III。合成路线如下


本发明涉及一种手性β-羟基酯类化合物的酶催化合成方法，合成路线如式(1)所示。通过使化合物i与化合物ii在0℃~室温、吡啶做缚酸剂的条件下反应，所得产物经萃取浓缩后再在R2OH中回流，然后重结晶得化合物iii；再将化合物iii、酮还原酶以及辅酶一起加入pH=6~8的磷酸缓冲液中，15~40℃下反应2~24小时，得到本发明的手性β-羟基酯类化合物iv。本发明采用酶催化合成方法制得手性β-羟基酯类化合物，无需使用昂贵的手性试剂，具有生产工艺条件温和、原料易得、转化率高、生产成本低等诸多优点，宜于大规模工业化生产。