专利名称：移植装置的制作方法角膜是厚度约为500um的透明组织，位于眼球的最外层，用作视觉折射系统中的透镜的一部分。角膜由以下五层组成，从最外层依次是上皮、鲍曼氏膜、角膜基质、德斯密膜(Descemet，s membrane)禾口内皮。已知角膜内皮细胞在活体内具有非常低的增生扩散和再生能力。因此，如果内皮细胞损坏，需要移植从捐献者获得的或培养制备的角膜内皮细胞的片材(Shimmura S.等人，Br. J. Ophthalmol. 89 134-137，2005)。通过以下方式移植角膜内皮细胞的片材作为移植物切开接受者的角膜；将移植物插入角膜内部；并将移植物附着在角膜内。然而，一旦为了移植将内皮细胞的片材从多层角膜脱离时，其趋于向外卷曲并变成管状。因此，通过在移植物以膜的形式延伸的同时将这样的移植物插入接受者角膜内部而进行的移植需要熟练的技术和经验。目前，移植通过这种方法进行将卷曲状的移植物插入角膜中，接着将移植物在移植位置处延伸成片状形式(Melles G. R. J.等人，Cornea 25(8) =987-990,2006)；或者通过如下方法进行将延伸形式的移植物放置在载体或类似物上，接着将其插入角膜(Shimmura S.等人， Br.J. Ophthalmol. 89 134-137，2005)。然而，这些方法具有很多问题，诸如很难将角膜内皮细胞的片材制作成完全延伸的形式，以及由于这种难度导致的过度操作，将会对移植物和接受者移植位置周围的组织造成损坏。
技术问题本发明的目标是提供一种移植装置，其可以容易地将移植物移植到分层组织中， 而不会损坏移植物或移植位置周围的组织。解决方案本发明的一种用于将移植物移植到活体的移植装置，包括一对柔性夹持片材，用于夹持移植物，其中每一个夹持片材都包括一个夹紧部，用于夹紧该夹持片材；以及，通过在远离移植物的方向上拉动至少一个所述夹持片材的夹紧部，而暴露出夹持在所述夹持片材之间的移植物。在本发明的移植装置中，该对夹持片材中的每一个都可具有足以夹持住移植物而不会使其暴露的形状和面积。所述夹持片材可具有5-lOOum的厚度。所述夹持片材的厚度可以为50-300um，且更优选地，所述夹持片材的材料是硅树脂。在本发明的移植装置中，所述夹持片材可在一个连接部处彼此连接，且所述夹紧部可被定位在所述夹持片材的与所述连接部相对的一个边缘处。所述夹紧部可包括一个接片(tab)。所述移植装置可由单个无缝片材形成。在该移植装置中，所述夹持片材中的一个的表面涂覆有粘弹性物质，其中所述表面面向移植物。所述移植物可以是膜状的，更优选是角膜内皮细胞片材。本发明的一种移植方法，包括以下步骤将移植物放置在一对夹持片材之间；将所述夹持片材放置在移植位置处；以及在移植位置处使移植物暴露。在本方法中优选使用上述移植装置，其中成对夹持片材中的每一个都具有用于夹紧夹持片材的夹紧部，且可通过在远离移植物的方向上拉动成对夹持片材中的至少一个的夹紧部，而暴露夹持在所述夹持片材之间的移植物。该移植方法还可包括从移植位置去除夹持片材的步骤。例如，可以通过在远离移植物的方向上拉动成对夹持片材中的至少一个的夹紧部，而去除该对夹持片材。相关申请的交叉引用本申请要求2009年4月16日提交的日本专利申请No. 2009-100267和2009年11 月25日提交的美国临时专利申请Ν0.61Λ64，3 的优先权权益，这两个申请在此通过引用方式被纳入本文。图1示出本发明一个实施方案的移植装置的示意图。图2示出在根据本发明移植装置的一个实施方案中图1所示的移植装置中的夹持片材之间的边界处的穿孔线㈧和切口⑶的示意图，以及具有较小厚度(C和D)的示例性边界的示意图。C和D表示移植装置沿图1中所示的线X所截取的横截面图。图3示出在本发明移植装置的一个实施方案中图1所示的移植装置的夹持片材和前接片之间的边界处的穿孔线(A)和切口(B)的示意图，以及具有较小厚度(C和D)的示例性边界的示意图。C和D表示移植装置沿图1中所示的线Y所截取的横截面图。图4示出本发明一个实施方案的夹持膜移植物的移植装置的示意图。图5示出通过使用本发明一个实施方案的移植装置将移植物插入眼睛。图6示出本发明一个实施方案的夹持膜移植物的移植装置的照片。图7示出通过展开本发明的一个实施方案的移植装置的夹持片材而暴露出移植物。图8示出本发明一个实施方案的用于将移植物附着到角膜内部的方法的示意图。图9示出本发明一个实施方案的在完成将移植物移植到角膜后的照片。参考标记列表1 移植装置；2 上夹持片材；3 下夹持片材；4:前接片；5 后接片；6 连接部。
5和/或面积，但是可以由本领域技术人员适当选择，只要夹持在夹持片材中的移植物可以被插入移植位置，且移植物在被夹持在该对夹持片材之间时不暴露。更具体地，该形状可以是具有多个角部的菱形、矩形或方形，以及不具有角部的圆形或椭圆形。夹持片材的面积优选大于移植物的面积。考虑到将其间具有移植物的夹持片材插入移植位置以及在移植后去除片材的步骤，优选的形状包括其主轴线与插入/去除方向对齐的椭圆形，以及角部被倒圆处理的矩形或菱形。在本发明的移植装置被用于眼睛的眼角膜移植的具体实施方案中， 该移植装置可包括具有圆形或椭圆形的形状、以及具有直径5-20mm的面积的夹持片材。本领域技术人员还可以适当选择夹持片材的三维形状，这取决于移植物接受组织的类型或移植位置，该片材可以是平坦形状，或者其部分或整体被提升的形状，例如为圆顶状。夹持片材的颜色或清晰度并没有特别的限制，且可由本领域技术人员根据移植物的类型或移植物在移植位置处的可操作性而进行合适选择。优选地，该片材具有如下的颜色和清晰度，即，足以确保能够看到接受者的移植位置及其周围组织，以及在移植过程中能够通过自身区分夹持片材。在该对夹持片材在边界处被折叠的实施方案中，该边界可具有诸如穿孔线的切割线、位于两端的开口、和/或厚度小于夹持片材其他部分的厚度(图2)。这种构造使得更容易在边界处折叠该对夹持片材，以使移植物夹持在夹持片材之间，以及更容易在将移植物移植到移植物接受组织后在边界处将夹持片材分开。在片材材料是硅树脂且边界具有较小厚度的实施方案中，该边界可具有该移植装置的其他部分的厚度的约1/4到1/2。例如，当移植装置的其他部分的厚度为约200um时，该边界的厚度可以是50-100um，但并不限于此厚度范围，且可由本领域技术人员根据使用的移植装置或操作的简易度来适当选择。当该对夹持片材由多个单独的夹持片材构成时，夹持片材之间的连接部优选形成该边界。每一个夹紧部相对于该对夹持片材中的每一个的位置并没有特别限定，但是为了通过在远离移植物的方向上拉动该对夹持片材中的至少一个的夹紧部而暴露出保存在夹持片材之间的移植物，该夹紧部优选定位在与连接部相对的两个夹持片材中的每一个的边缘处。夹持片材中的每一个的夹紧部可组成夹持片材的一部分，更优选地，夹紧部被以接片形式添加至夹持片材。在夹持片材包含接片的实施方案中，该接片和夹持片材可由不同材料组成。更优选地，该接片和夹持片材之间没有接缝，且整个移植装置由单个片材组成。连接至夹持片材的接片的数量可以是一个或多个，该对夹持片材中的每一个可具有不同数量的接片。该接片的形状并没有特定的限定，只要可通过夹紧接片而抓握住夹持片材就行，该夹紧部被连接至夹持片材，使得夹持在夹持片材之间的移植物可通过在远离移植物的方向上拉动连接至该对夹持片材中的至少一个的接片而暴露。考虑到操作性，该接片可以是绳状的，更优选为带状。在一个夹持片材包括多个接片的移植装置的实施方案中，这些接片可被定位为使得可通过拉动所述接片中的一个接片而暴露出保持在夹持片材之间的移植物。或者，该接片可被定位为使得可向夹持片材施加一个稳定的力，以通过同时拉动多个接片而使移植物暴露。该接片可由具有生物无毒性的任意公知材料制成，只要其可形成为期望形状作为接片，优选实例包括硅树脂、硅树脂水凝胶、压克力、蚕丝蛋白、聚乙烯醇、聚羟乙基异丙烯酸酯、棉、聚酯、胶原质等。该接片的材料与夹持片材的材料可以相同或不同，但是考虑到移植装置的操作性，夹持片材和接片优选由相同材料形成，且连续地形成，在它们之间没有接缝。在夹持片材和接片由不同材料形成的实施方案中，它们可通过公知的适于所述材料的连接方式或粘接方式而彼此连接。该接片的尺寸并没有特别限制，只要该接片可用作移植装置的夹紧部，且能够实现平滑移植。在其中接片为带状的实施方案中，其长度可以为3-15mm。在接片为带状且当夹持移植物的移植装置被插入移植位置时夹持移植物的移植装置在夹持片材和接片之间的边界处折叠的实施方案中，该边界可具有诸如穿孔线的切割线、其两端处的切口、和/或小于夹持片材其他部分的厚度，以使折叠容易进行(图3)。在其中移植装置的材料是硅树脂且该边界具有小于该移植装置的其他部分的厚度的实施方案中，该边界可具有该移植装置其他部分的厚度约1/4到1/2。例如，当移植装置的其他部分的厚度约200um时，该边界的厚度可以是50-100um，但并不限于此厚度范围， 且可由本领域技术人员根据使用的移植装置或操作的简易性来适当选择。当夹持片材和接片由不同材料组成时，其间的连接部优选形成该边界。该对夹持片材之间的边界优选比接片和夹持片材之间的边界强度小，例如，通过具有更多穿孔的切割线、更深的切口、和/或比接片和夹持片材之间的边界更小厚度来实现。这种构造使得能够通过在保持所述接片和夹持片材之间的边界连接的同时相互远离拉动该对接片来断开该对夹持片材之间的边界。制造移植装置的方法本发明的移植装置包括一对夹持片材和夹紧部。制造该移植装置的方法并没有特别限定，其可以由本领域技术人员从多种公知的方法选择。例如，可以将具有期望厚度的材料片材切割成移植装置的形状来制造该移植装置。在这种情况下，整个装置可被切割成一块片材。或者，每个夹持片材和夹紧部可单独切割，然后连接每个部分以形成移植装置。这些方法适于用已具有片材形式的材料制造移植装置。在替代实施方案中，可以制造具有期望厚度和形状的模具，接着将液体形式的材料注入该模具中，并允许该材料凝固以形成移植装置。当使用可根据条件液化的材料(例如硅树脂或聚乙烯醇)时，这种方法是适合的。本文中的“硅树脂”指的是这样一种材料其可通过硬化聚合物来形成，该聚合物主要由在硅和氧之间具有硅氧烷键的全链的有机聚硅氧烷构成。用作制造夹持片材的材料的优选硅树脂具有以下的物理特性肖氏A硬度30-90，抗拉强度40-100kg/cm2，延展性 50-500%，以及抗裂强度7-40KN/m。可通过由JIS K6301标准限定的定量分析来测量除了硬度外的其他属性。硅树脂可通过本领域技术人员使用适合的任一公知方法来制造，且还可通过从诸如 Momentive Performance Materials、Dow Corning Toray 禾口 Shin—Etsu Chemical等公司来购买商业产品。当制备硅树脂时，作为主要原料的有机聚硅氧烷并没有特别地限定，且可以是商用的聚二甲基硅氧烷、或由本领域技术人员通过任一公知方法进行化学改性的聚二甲基硅氧烷。硬化聚合物以制备硅树脂的方法并没有特别地限定，可以由本领域技术人员根据使用的聚合物的属性适当选择。移植装置的使用本发明的移植装置可被应用至的移植物接受组织并没有特别的限定，且使用移植装置将会对移植特别有效的组织包括管状组织(诸如血管)、具有内腔的组织(诸如心脏、 肠、结肠)以及层状组织(诸如眼睛的眼角膜和视网膜)。在此所使用的“移植物接受组织” 指的是在移植中接受移植物的接受者的组织。使用本发明移植装置进行移植手术的动物物种并没有特别的限制，只要该动物具有上述的管状组织、具有腔的组织、和层状组织中的任一种就行，该动物的优选实施例是哺乳动物，且更优选是人。移植物的形状并没有特别的限制，使用移植装置将会对移植特别有效的移植物的实施例包括膜移植物和片材形式的移植物。移植物的来源并没有特别的限制，移植物可以是来自捐献者的一片组织、由培养细胞制备的培养细胞片材、或人造合成移植物。捐献者和接受者可以是同一个体。在移植物是来自捐献者的一片组织的实施方案中，移植物可以从任一组织获取， 优选从与移植位置处的组织相同的一个组织中获取。在移植物是由培养细胞制备的一片组织的实施方案中，细胞可以从任一来源获取，且该细胞优选是存在于移植位置处的组织中的细胞类型，或者是类似于移植位置处的组织中存在的细胞类型的一种细胞类型。在移植物是合成移植物的实施方案中，移植物的材料可以是聚酯或硅树脂，但并不限于此，且其可以由本领域技术人员从公知材料中适当选择。当在移植中使用移植装置时，移植物被放置在该对夹持片材的其中之一上，另一夹持片材被放置在移植物上方，使得移植物被夹在这两个夹持片材之间。下文中，在接下来的暴露移植物的步骤中将被去除的夹持片材被称作上夹持片材，而保持夹持移植物的另一夹持片材被称作下夹持片材。在移植装置由单片无缝片材形成的实施方案中，可以通过在成对夹持片材的连接部处谷形折叠移植装置而将移植物夹持在该对夹持片材之间。在移植装置包括接片作为夹紧部的实施方案中，上夹持片材和连接至其的接片(也称为前接片)之间的接缝可被设定为山形折叠。移植装置以及接片折叠的方式可以反向，这取决于外科医生是用左手实施移植，还是用右手实施移植。为了将移植物放置在夹持片材上，可将通过由镊子等拾取的移植物安装在夹持片材上。或者，夹持片材可以被放置在伸展的移植物的顶部上，接着夹持片材可以从其一端拾取，同时保持移植物通过表面张力附接至夹持片材。在移植物是单片组织的替代实施方案中，移植物可以通过在夹持片材上方进行细胞培养或组织培养来制备。移植物被夹持在夹持片材之间，使得移植物的将接触移植物接受组织的一侧朝向上夹持片材。在其中移植物是单片组织或培养细胞片材的实施方案中，由于细胞的极性，移植物将获得方向性(在移植物作为单片组织或培养细胞片材时，将接触移植位置的组织或基膜的侧面在文中指的是基面，另一侧面指的是顶面)。在这一实施方案中，移植物可被夹持，使得基面朝向上夹持片材，顶面朝向下夹持片材。在移植之前，夹持移植物的移植装置被插入接受者的移植位置，S卩，插入管状组织或具有腔的组织的内部、或者插入层状组织的层之间的空间中。插入方法并没有特别的限制，只要整个移植装置可被插入移植位置，而移植物在插入步骤期间不暴露就行。移植装置可被卷起，同时夹持移植物，接着通过使用注射器等被插入移植位置。或者，夹持移植物的移植装置的端部可通过镊子等被夹住，且拉至移植位置。在这种情况下，夹持移植物的移植装置被插入移植位置，使得移植装置的上夹持片材将朝向接受者的移植物接受组织。接着，使用镊子等夹住两个夹持片材的夹紧部中的每一个，通过在远离移植物的方向上拉动而移动夹紧部中的至少一个，将上夹持片材从移植物去除，使得暴露出放置在夹持片材之间的移植物。例如，如果移动去除的是上夹持片材，则移植物将保留在下夹持片材上。另一方面，如果移动的是下夹持片材，则移植物仍保存在下夹持片材且与其一起移动，导致上夹持片材去除且移植物暴露。在这些情况下，可在反方向上轻拉住另一夹持片材，使得其不移动。或者，可同时在反方向上拉动两个夹持片材，使得两个夹持片材都移动而使移植物暴露。如上所述，面向移植物一侧的下夹持片材的表面涂覆有粘弹性物质等，这将确保当移植物的另一侧暴露时所述移植物仍保持在下夹持片材上，由此使得能够容易地将上夹持片材移除，同时保持移植物伸展。在移植物的一侧暴露之后，下夹持片材可以可选地移动，以调整保持在下夹持片材上的移植物相对于移植物接受组织的位置。接下来，可将移植物的暴露侧按压向移植物接受组织。将移植物按压向移植物接受组织可以通过将力施加至下夹持片材施加在与面向移植物的侧相对的侧上而进行，由此实现移植物有效粘合至移植物接受组织。在一个实施方案中，可通过向所述下夹持片材的与面向移植物的侧相对的侧注入空气或粘弹性物质而按压移植物。或者，生物粘合剂(诸如纤维蛋白胶)可被注入移植物和移植物接受组织之间的空间中，以将移植物粘附至移植物接受组织。在由此将移植物移植到接受者的移植物接受组织之后，可从移植位置处取出下夹持片材。可通过以下方式在一个方向上拉出下夹持片材用镊子等夹紧下夹持片材的夹紧部并在远离移植位置的方向上拉动移植装置。在成对夹持片材由单片材形成的实施方案中，可在远离移植位置的方向上拉动成对夹持片材中的任一个的夹紧部。或者，两个夹持片材的夹紧部可分别由镊子等夹紧，且在反方向上相互远离拉动它们，使得片材的一部分被撕裂，且在两个方向上拉出由此分离的移植装置。应注意，在移植装置由生物可溶解材料制成的实施方案中，该装置可被留在移植位置。移植装置的示例性使用下文将参考示例性移植装置来描述使用移植装置的方法，该移植装置如图1所示，具有两个相同圆形的夹持片材和作为夹紧部的成对的接片，其中夹持片材和接片由单个无缝片材形成。当使用移植装置进行移植时，如图1和2所示，移植物被放置在下夹持片材3上， 该下夹持片材是成对夹持片材的其中之一，移植装置的连接部5被谷形折叠，作为上夹持片材2的另一个夹持片材被放置在移植物的顶部上，由此将移植物夹持在该对夹持片材2 和3之间。接着，接片4的其中之一(也称为前接片)和上夹持片材2之间的接缝被山形折叠。优选地，在使用移植装置之前，将下夹持片材3的面向移植物的表面涂覆粘弹性物质寸。将由此夹持着移植物的移植装置插入接受者的移植位置。接着，通过镊子等夹住前接片4和后接片5的每一个端部，且在远离移植物的方向上拉动前接片4 (图4，虚箭头)。 此时，可以在远离移植物的另一相反方向上轻拉住接片5，使得下夹持片材3不会移动。由此将上夹持片材2和下夹持片材3展开，以暴露保存在里面的移植物，然后将下夹持片材3按压到移植物接受组织。之后，通过镊子等夹住相应夹持片材2和3的任一接片4或5，且在远离移植位置的方向上拉动移植装置，以在一个方向上去除移植装置。或者，接片4和5可分别由镊子等夹紧且在两相反方向上相互远离地拉动，使得移植装置在连接部6处被撕开，且在两个方向上去除由此分离的夹持片材。实施例在该实施例中，本发明的移植装置用于眼睛内的角膜内皮细胞片材的移植。接受者将四只驯养兔(雌性，3kg，Shiraishi实验动物繁殖场)中的每一个都通过肌肉注射細1克他命/甲苯噻嗪混合麻醉剂(1 7)而麻醉，并接着局部注射利多卡因。进一步局部注射了托吡卡胺，以使瞳孔散大，且眼睛的前腔被注满肝磷脂(5U/ml)。在角膜巩膜边缘的两个相对位置向下到静脉窦(Schlemm’ s canal)的平面作两个5mm开口(图5A)， 且通过使用27G针头将0. 04%台盼蓝注射到上述德斯密空间中而将德斯密膜水法切开。在将空气注入前腔中之后，德斯密膜的圆形段使用27G针头通过CCD方法而被去除。捐献者将两只驯养兔(雌性，3kg)中的每一个注射致命剂量的戊巴比妥。在角膜巩膜的边缘制做一个3mm切口，且通过注入6. 25mg/ml的吲哚菁绿而将德斯密膜切开，使得捐献者的德斯密膜可通过吲哚菁绿而被染成绿色。巩膜和角膜分离，且使用环锯制造一段具有6mm 直径的德斯密膜。由此获得的德斯密膜的内皮由粘弹性物质(透明质酸)保护，且用作移植物。移植装置如图1所示，使用的移植装置包括一对具有8mm直径的夹持片材(2，；3)和一对具有8mm长度的接片0，5)。这些部分由具有IOOum厚度的单个无缝蚕丝蛋白片材形成。两个夹持片材之间的连接部(6)包括穿孔线。面向移植物的夹持片材C3)的表面涂覆有粘弹性物质。移植通过镊子拾取如上制备的来自捐献者的移植物，将其安装在移植装置的夹持片材 (3)上，且通过镊子将其伸展。如图4和6所示，移植装置的连接部( 被谷形折叠，且前接片(4)和上夹持片材( 之间的接缝被山形折叠。将一把镊子通过角膜上的开口之一插入接受者的角膜，且移植装置的该对夹持片材(2，；3)和前接片(4)通过镊子被抓在一起且拉入(图5A)，使得移植装置插入角膜(图 5B)。后接片(5)被保留从角膜中突出。接着，通过镊子夹住移植装置的前接片，且在远离角膜的方向上将其拉动通过另一开口，该开口与用于将移植装置拉入角膜中的开口相对，使得移植装置伸展(图7A)且移植物暴露(图7B)。将空气注入下夹持片材(3)的不面向移植物的表面和内皮之间的空间(图8A)，且允许移植物附接至待要接受该移植物的角膜基质(图8)。接下来，穿过相应的开口从角膜突出的前接片(4)和后接片( 分别由镊子夹紧，且在远离移植物接受位置的相反方向上拉动，以使移植物与下夹持片材分离(图8B)。前接片(4)和后接片(5)进一步在相反方向上被拉动，以将夹持片材在上夹持片材( 和下夹持片材C3)之间的连接部(6)内的穿孔线处撕开，接着从每个开口拉出角膜(图9A)，由此仅将移植物留在角膜内 (图 9B)。如上所述，通过使用本发明的移植装置，移植物可被平滑地移植到移植位置中，而不需要过度的操作。通过这种方式，原本会卷曲的膜移植物可以轻易地被移植，同时保持平坦地伸展。实用性可以使用本发明的移植装置将移植物容易地移植到层状组织中，而不会损坏移植物或移植位置周围的组织。


本发明旨在提供一种移植装置，其可容易地将移植物移植到层状组织中，而不会破坏移植物或移植位置周围的组织。本发明的移植装置(1)是一种用于将移植物移植到活体的移植装置，包括一对柔性夹持片材(2，3)，用于夹持移植物；其中每一个夹持片材都包括一个夹紧部，用于夹紧该夹持片材；以及，通过在远离移植物的方向上拉动成对的夹紧部(4，5)，而暴露夹持在夹持片材之间的移植物。通过使用该移植装置，可容易地将移植物移植到层状组织中，而不会破坏移植物或移植位置周围的组织。