专利名称：一种用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制备方法慢性前列腺炎(Chronic Prostatitis, CP)是中青年男性的一种常见病、多发病， 最新的医学研究发现，25%到50%的男性在一生中至少患过一次慢性前列腺炎，在中青年 男性常见疾病的泌尿男科门诊疾病中，CP患者比例高达40%，其发病人数还不断呈上升趋 势，因此，CP被世界卫生组织称为“21世纪病”。CP虽然不是一种致命性疾病，但患病年龄 多在20-45岁之间，给患者造成的肉体痛苦和带来的精神压力常常令人不可名状，已成为 严重影响男性生活质量与生存质量的大敌。然而，令人遗憾的是迄今为止，并没有理想的CP 治疗药物和特殊的治疗措施。虽然自抗菌药问世以来，引起CP的微生物有所改变，但发病 率并未下降，说明CP的治疗存在一定困难。因此新型的CP治疗药物的研究与开发就显得 十分必要，而且业已成为世人关注的焦点。目前市场上CP治疗药物品种虽然不少，但多数用抗生素类化学药品，治标难治 本，复发率高，且总治愈率也仅仅27%左右；中医临床辨证论治兼顾标本兼治，有效率可达 78%左右，但对于处于当今激烈竞争前沿的男性青壮年的广大CP患者，坚持长期煎煮用 药，显然不适应时代的要求，同时，由于原药材的品质、煎煮方法等又很难保证临床疗效的 稳定性；目前市场上仅有的诸如前列腺炎栓、立通清淋等也存在着或因过头广告宣传、或因 给药途径不便、或因缺乏标本兼治而令患者选择面狭小。因此，研究开发符合CP病因、兼顾 整体调节和标本兼治的新型CP中药新药，具有十分广阔的市场前景。金刚藤系百合科植物菝葜(Smilax China. L)的干燥根茎，始载于《名医别录》、《本 草纲目》，性甘、酸、平，可解毒消肿、祛风利湿，民间用于治疗乳糜尿、白带、风湿关节炎等。
本发明的任务是提供一种用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制备方法。实现本发明的技术方案是本发明提供的用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物，是以菝葜根茎为原料，按以 下方法制备得到的产物a、以菝葜根茎为原料，洗净，晾干，粉碎，过20目筛，得原料粗粉；b、将原料粗粉用3倍量60%乙醇水浴加热提取3次，每次3小时；C、合并提取液，过滤，浓缩至每Iml相当于Ig原生药的总浸膏；d、将总浸膏用HCl调节酸碱度至pH 4 5，加氯化钠至1. 5mol/L，得处理后的总 提取液；e、取与总浸膏等重的HPD100型大孔树脂，以95%乙醇浸泡12小时，随后装入层析 柱中，以95%乙醇冲洗至冲出的醇液澄清，将总提取液与处理后的大孔树脂混合，静态吸附12小时后装入层析柱中进行动态吸附至流下的液体无色后用酚酸性成分颜色反应示踪，至 反应颜色无变化时停止冲洗；f、用蒸馏水冲洗已吸附完全的样品柱，至洗出液为中性，然后用pH为7的70%乙 醇洗脱，洗脱流速2. 5BV. 1Γ1，收集上样量10倍体积的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干，即得 到本发明用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物，本专利申请中也称该用于治疗慢性前列腺 炎的菝葜提取物为菝葜大孔树脂纯化物(编号SCPD001)。本发明提供的用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物的制备方法，包括以下步骤a、以菝葜根茎为原料，洗净，晾干，粉碎，过20目筛，得原料粗粉；b、将原料粗粉用3倍量60%乙醇水浴加热提取3次，每次3小时；C、合并提取液，过滤，浓缩至每Iml相当于Ig原生药的总浸膏；d、将总浸膏用HCl调节酸碱度至pH 4 5，加氯化钠至1. 5mol/L，得处理后的总 提取液；e、取与总浸膏等重的HPD100型大孔树脂，以95%乙醇浸泡12小时，随后装入层析 柱中，以95%乙醇冲洗至冲出的醇液澄清，将总提取液与处理后的大孔树脂混合，静态吸附 12小时后装入层析柱中进行动态吸附至流下的液体无色后用酚酸性成分颜色反应示踪，至 反应颜色无变化时停止冲洗；f、用蒸馏水冲洗已吸附完全的样品柱，至洗出液为中性，然后用pH为7的70% 乙醇洗脱，洗脱流速2. 5BV. 1Γ1，收集上样量10倍体积的洗脱液，将洗脱液减压浓缩至干， 即得到本发明提供的用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物，即菝葜大孔树脂纯化物(编号 SCPDOO1)。实验资料本发明提供的用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物的药效学评价本实验以非细菌性前列腺炎模型、细菌性前列腺炎模型以及经典的抗炎抗菌模 型，采取平行比较法对菝葜总提取物(SCE001)和由总提取物进一步分部得到的乙酸乙酯 提取物(SCFE003)、正丁醇部位(SCFB004)及菝葜大孔树脂纯化物(SCPD001)治疗慢性前列 腺炎作用进行了平行比较评价，为综合确定菝葜治疗慢性前列腺炎有效提取物提供实验依 据，奠定科学基础。1.本发明提供的用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物治疗非细菌性前列腺炎的 实验资料1. 1仪器试剂与动物XF9030自动血液细胞分析仪(南京普朗医用设备有限公司)；戊巴比妥钠(中国 医药集团上海化学试剂公司，批号F20050915)；消痔灵注射液(吉林省集安益盛药业股份 有限公司)；硫酸庆大霉素注射液(河南辅仁怀庆堂制药有限公司)。SD大鼠，雄性，体重250 300g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。实验动物从业证湖北省实验动物从业人员考核合格证(证书编号G20080516)。1. 2 方法1. 2. 1非细菌性前列腺炎模型的建立取65只SD大鼠，腹腔注射戊巴比妥钠(l%，4ml/100g)麻醉，将大鼠四肢固定在 固定板上，剪除下腹两后肢之间的毛发，于无菌条件下沿腹中线切开腹壁，逐层打开下腹， 暴露膀胱，用镊子轻轻提起膀胱及两侧精囊，前列腺体位于精囊底部，暴露附于精囊内侧的前列腺背叶，于两侧分别注入25%消痔灵注射液0. 2ml，将前列腺、精囊和膀胱复位，缝合 腹壁肌肉和皮肤，在伤口处喷庆大霉素，消毒纱布包扎，放回鼠笼。另取13只大鼠，操作如上，但不注入致炎剂，作为手术对照组。造模后，各组大鼠精神状态较差，活动减少，食欲不佳，大鼠死亡6只，其余的大鼠 于术后第3天开始逐步恢复。连续观察7天，各组大鼠伤口愈合良好，精神状态恢复。1.2.2分组与给药造模7天后将造模成功的72只模型大鼠(包括注入致炎剂的尚存活60只和没 有注入致炎剂的存活的12只)随机分为生理盐水组、SCE001组、SCFE003组、SCFB004组、 SCPDOO1组，每组12只，分别以生理盐水、SCEOO 1、SCFE003、SCFB004、SCPDOO1灌胃，剂量按 临床用药和与试验结果总和折算为IOg (原生药)/kg,每日1次，每天上午9 00 10 30灌 胃，连续8天。正常对照组给予等量生理盐水，其他条件与前面5组一致。第9天称取禁食 12h空腹的动物体重，尾静脉取血，然后用生理盐水稀释后测定白细胞总数。取血完毕，断头处死动物，剖腹观察前列腺的形态、大小，与周围组织粘连情况等， 并取出前列腺，用分析天平称取腺体重量。腺体常规固定，石蜡切片，HE染色，光镜下观察 组织病理学改变。1. 2. 3统计方法所有数据用i±s表示，采用单因素方差分析和多重比较，数据统计用SPSS12.0软 件包处理。1. 3实验结果及分析1. 3. 1对非细菌性前列腺炎大鼠模型血液中白细胞数的影响见表1。表1菝葜各用药组对大鼠白细胞的影响本发明提供了一种用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物及其制备方法，本发明以菝葜根茎为原料，将菝葜根茎干燥粉碎后，在80～85℃下用3倍量60%乙醇回流提取3次，每次3小时。将提取液合并，过滤，再经过对总提取液的处理，用HPD100型大孔树脂进行纯化，得到大孔树脂纯化物，即本发明用于治疗慢性前列腺炎的菝葜提取物。该提取物不仅对非细菌性前列腺炎、细菌性前列腺炎，还是对经典的抗菌消炎模型，均显示出良好的药效作用，不仅能抑制炎性细胞的产生，还能显著改善前列腺炎的纤维增生，对慢性前列腺炎具有明显的标本兼治作用。