专利名称：醋酸精氨酸口服制剂及其在临床的应用的制作方法 精氨酸是一种条件必须氨基酸，它能提高机体免疫功能，促进蛋白合成，降低分解代谢，保护胃肠粘膜，是目前“营养药理学”重点研究的热点。研究发现，精氨酸能改善烧伤大鼠蛋白代谢，促进创面愈合。烧伤患者经肠道补充精氨酸能减轻烧伤后肠道受损程度，提高免疫功能，缩短住院时间。目前国内外市售的用于治疗方面的精氨酸只有L一精氨酸和盐酸精氨酸两种；但用它们做原料制备供口服用的制剂，存在以下缺陷L一精氨酸碱性较强，pH在10.5～12.0，口服后对胃肠道的刺激较强，会造成胃部不适的症状，且长期大量应用可影响血液PH值，而盐酸精氨酸又偏酸性，pH在4.7～6.2，而且氯离子含量高，达16.5％～17.1％，口服后对胃肠道同样有一定的刺激，不仅会造成胃部不适，而且长期使用可引发代谢性酸中毒和高氯血症。因此，国内没有L一精氨酸和酸精氨酸口服制剂上市。经过文献检索，仅在日本药局方第13版、美国药典23版和中国药典2000年版收载有盐酸精氨酸及其注射液；尚未见到有关醋酸精氨酸口服制剂的文献报导。
为克服上述缺陷和填补空白，拟用pH在6.0～7.5的精氨酸醋酸盐制备一种醋酸精氨酸口服制剂，作为非特异性免疫增强作用的药物。采用的技术方案如下。一种醋酸精氨酸口服制剂，含有粘合剂和矫味剂，其特征在于还含有精氨酸醋酸盐，各组分的重量百分配比为精氨酸醋酸盐60～90，粘合剂5～20，矫味剂5～20。精氨酸醋酸盐用树脂从精氨酸盐酸盐中脱除盐酸，再用冰醋酸中和制取；或者将L一精氨酸直接用冰醋酸中和制取。适宜的药用粘合剂，可以从淀粉、糊精、羧甲基淀粉钠或羧甲基纤维素中任选一种。适宜的药用矫味剂是蔗糖和/或木糖醇和橘子香精。
本发明的醋酸精氨酸口服制剂，可以是药剂学上所说的任何一种剂型，如颗粒剂、片剂、胶囊剂、糖浆剂、混悬剂、乳剂和散剂等。
本发明口服制剂的药效成分为精氨酸醋酸盐，酸碱度适中，pH在6.0～7.5，不存在氯离子酸根，口服后对胃肠道不会产生刺激，长期服用不会产生高氯血症。我们用30％III度体表烧伤家兔灌胃盐酸精氨酸7天后出现了血pH、HCO3-降低，碱储备下降等一系列代谢性酸中毒的表现，同时血浆氯离子含量也明显增高，而灌胃醋酸精氨酸的烧伤家兔情况较好，未出现明显的代谢性酸中毒，氯离子含量也明显低于盐酸精氨酸组。试验证明，在肝肾功能正常的情况下，服用醋酸和盐酸两种精氨酸盐都是安全的。但对严重创伤、烧伤、大手术或严重感染的患者，因其肝肾功能都受到不同程度的损害，机体对酸碱平衡和电解质代谢的调节能力下降，此时口服使用盐酸精氨酸显然是不合适的，应用醋酸精氨酸原料制备的口服制剂，才能做到安全、有效。
通过动物药效学试验表明，本品能促进免疫细胞增值和分化，提高淋巴细胞转化率，增强免疫细胞吞嗜、趋化功能；提高NK及LAK细胞活性，促进抗肿瘤免疫；增强体液免疫，促进免疫球蛋白合成。烧伤家免经肠道每天补充1.2g醋酸精氨酸，7天后其免疫功能明显增强，动物死亡率降低；本发明产品还可促进机体蛋白合成，降低分解代谢，促进创面愈合，保护胃肠粘膜，维护肠粘膜屏障。
本发明的醋酸精氨酸口服制剂，是一种免疫增强剂，在临床上主要用于严重创伤、烧伤、大手术及肿瘤病人放化疗后机体免疫功能受抑制的患者。
为验证本发明的醋酸精氨酸口服制剂的药效，我们采用30％体表面积III度烧伤家兔模型，动物随机分成8组盐酸精氨酸(1.2g/kg)对照组、阳性药物对照组、阴性药物对照组及4个不同剂量的醋酸精氨酸试验组，观察精氨酸对烧伤家兔免疫功能的影响。试验结果如下表
表1 醋酸精氨酸对烧伤大白兔死亡率的影响存活只数总只数 死亡率(％)正常对照组 8 8 0盐酸精氨酸对照组 8 10 20.00阳性药物对照组(左旋咪唑) 8 11 27.27阴性药物对照组(酪氨酸) 9 14 35.71醋酸精氨酸2.4g/kg组9 12 25.00醋酸精氨酸1.2g/kg组9 10 10.00醋酸精氨酸0.6g/kg组9 10 10.00醋酸精氨酸0.3g/kg组8 10 20.00实验结果表明，30％III度烧伤大白兔死亡率较高。盐酸精氨酸、阳性药物及阴性药物对照组分别为20.00％、27.27和35.71％，醋酸精氨酸4个剂量组为10-25％，其中0.6g/kg和1.2g/k醋酸精氨酸组的死亡为10％，明显低于其它组(P＜0.01)。表2 醋酸精氨酸对烧伤大白兔淋巴细胞转化率、白细胞吞噬率及趋化指数的影响淋转率(％)吞噬率(％) 趋化指数正常对照组(n＝8)68.38±5.07 36.75±2.821.95±0.25盐酸精氨酸组 (n＝8)52.50±4.87**Δ32.13±3.14**Δ1.89±0.18ΔΔ阳性对照组(左旋咪唑) (n＝8)56.88±5.01**Δ29.88±2.85**Δ1.61±0.23**ΔΔ阴性对照组(酪氨酸)(n＝9)48.00±3.09**##22.33±3.50**##1.61±0.15**醋酸精氨酸2.4g/kg组 (n＝9)55.22±5.41**ΔΔ30.89±3.38**Δ1.92±0.22ΔΔ##Δ醋酸精氨酸1.2g/kg组 (n＝9)58.44±4.90**ΔΔ30.56±2.95**Δ1.92±0.33ΔΔ##Δ醋酸精氨酸0.6g/kg组 (n＝9)46.89±4.18**##27.11±4.01**1.60±0.21**醋酸精氨酸0.3g/kg组 (n＝8)46.25±4.35**##19.88±3.10**##1.51±0.14****与正常组比较P＜0.01；ΔΔ与阴性对照组比较P＜0.01；##与阳性对照组比较P＜0.01烧伤7天后，各组动物上述三项指标均明显低于正常组(P＜0.01)。在醋酸精氨酸的4个剂量组中，1.2g/kg和2.4g/kg组的淋转率、吞噬率和趋化指数均明显高于阴性药物对照组，其中趋化指数显著高于阳性药物对照组，与盐酸精氨酸对照组相比无显著差异。0.6g/kg、0.3g/kg组与阴性药物对照组比较无显著差异(P＞0.05)。结果表明烧伤后淋巴细胞功能下降，醋酸精氨酸能促进淋巴细胞功能恢复。
表3 醋酸精氨酸对淋巴细胞亚型的影响CD3(％)CD4(％) CD8(％) CD4/CD8正常对照组(n＝8)65.13±5.51 36.75±3.03 24.25±1.641.52±0.08盐酸精氨酸组 (n＝8)51.50±2.18*30.63±2.91**23.13±1.621.33±0.17ΔΔ阳性对照组(左旋咪唑) (n＝8)50.38±5.02*28.63±3.16**22.00±2.121.31±0.17阴性对照组(酪氨酸)(n＝9)41.78±2.82**22.22±2.70**21.89±1.911.02±0.11**醋酸精氨酸2.4g/kg组 (n＝9)52.33±5.85*30.67±3.78ΔΔ22.33±1.491.37±0.13ΔΔΔ醋酸精氨酸1.2g/kg组 (n＝9)52.33±3.94*33.78±2.86Δ23.78±1.541.42±0.10ΔΔΔΔ醋酸精氨酸0.6g/kg组 (n＝9)46.44±4.35**27.22±3.74**23.22±2.201.17±0.10**醋酸精氨酸0.3g/kg组 (n＝8)44.50±3.12**23.38±1.93**22.13±1.621.06±0.12***与正常组比较P＜0.05，**与正常组比较P＜0.01；Δ与阴性对照组比较P＜0.05，ΔΔ与阴性对照组比较P＜0.01烧伤7天后，淋巴细胞亚型数量发生明显变化，其中CD3、CD4含量及CD4/CD8比值均显著下降，CD8含量变化不明显。醋酸精氨酸治疗的4个组中，2.4g/kg和1.2g/kg组的CD3、CD4、CD4/CD8显著高于阴性药物对照组(P＜0.05-0.01)，略高于阳性药物对照组，但相差不显著(P＞0.05)，与盐酸精氨酸组相比无显著差异。而0.6g/kg和0.3g/kg组与阴性药物对照组比较相差不显著(P＞0.05)。结果表明醋酸精氨酸能有效维护淋巴细胞亚型的稳定，有利于伤后免疫功能的恢复。
表4 醋酸精氨酸对烧伤大白兔血浆免疫球蛋白含量的影响IgA(g/L) lgM(g/L)IgG(g/L)正常对照组 (n＝8) 2.36±0.501.35±0.14 11.75±3.12盐酸精氨酸组(n＝8) 1.74±0.351.22±0.29ΔΔ8.31±1.47ΔΔ阳性对照组(左旋咪唑)(n＝8) 1.72±0.201.14±0.28ΔΔ8.32±2.16阴性对照组(酪氨酸) (n＝9) 1.72±0.370.61±0.14**5.51±1.53**醋酸精氨酸2.4g/kg组 (n＝9) 1.69±0.261.15±0.22ΔΔ8.37±1.78ΔΔ醋酸精氨酸1.2g/kg组 (n＝9) 1.75±0.331.26±0.21ΔΔ8.61±1.25ΔΔ醋酸精氨酸0.6g/kg组 (n＝9) 1.56±0.43**0.91±0.26**#7.00±0.93**醋酸精氨酸0.3g/kg组 (n＝8) 1.78±0.290.78±0.31**##6.59±0.55**##**与正常组比较P＜0.01；ΔΔ与阴性对照组比较P＜0.01；##与阳性对照组比较P＜0.01伤后7天各组动物血浆免疫球蛋白IgA、IgM、IgG均有不同程度下降，其中IgG和IgM的变化较为明显，而IgA的变化不明显。醋酸精氨酸2.4g/kg和1.2g/kg组的IgG和IgM明显高于阴性药物对照组(P＜0.01)，与盐酸精氨酸组和阳性药物组比较无显著差异。而0.6g/kg和0.3g/kg组与阴性药物组相比变化不明显(P＞0.05)。结果表明每天提供1.2-2.4g/kg醋酸精氨酸能提高伤后免疫球蛋白水平，维护正常的机体免疫功能。
表5 醋酸精氨酸对烧伤大白兔血浆白介素-2和一氧化氮含量的影响白细胞介素-2(ng/ml) 一氧化氮含量(μmol/L)正常对照组(n＝8)9.05±2.176.14±1.55盐酸精氨酸组 (n＝8)6.23±1.43**ΔΔ9.12±3.06阳性对照组(左旋咪唑) (n＝8)5.14±1.16**ΔΔ8.76±3.51**阴性对照组(酪氨酸)(n＝9)3.22±0.82**7.55±2.66醋酸精氨酸2.4g/kg组 (n＝9)7.18±2.46ΔΔ##14.09±3.09**ΔΔ##醋酸精氨酸1.2g/kg组 (n＝9)6.96±1.33**ΔΔ##9.41±2.34**醋酸精氨酸0.6g/kg组 (n＝9)4.31±1.07**6.58±1.70醋酸精氨酸0.3g/kg组 (n＝8)4.03±1.12**6.68±1.22**与正常组比较P＜0.01；ΔΔ与阴性对照组比较P＜0.01；##与阳性对照组比较P＜0.01烧伤7天后各组动物血浆IL-2含量明显下降，而NO含量则呈上升趋势。醋酸精氨酸2.4g/kg和1.2g/kg组血浆IL-2含量明显高于阴、阳性药物对照组(P＜0.01)，与盐酸精氨酸组相比相差无显著意义，0.6g/kg、0.3g/kg组变化不显著。在精氨酸的4个剂量组中，2.4g/kg组的血浆NO水平明显高于其它几组。结果表明每天摄入1.2g/kg～2.4g/kg醋酸精氨酸能提高血浆IL-2和NO含量，促进淋巴细胞分泌功能，维护机体免疫功能。
本发明涉及的醋酸精氨酸口服制剂的最佳有效剂量为1.2g/kg.d。该剂量安全有效。
四.

实例1 醋酸精氨酸颗粒的制备配方醋酸精氨酸 2500g蔗糖 300g糊精 177g木糖醇 20.0g桔子香精 适量制成 1000袋制备工艺按配方量称取醋酸精氨酸、蔗糖、糊精混合均匀，再将混合粉与处方量的木糖醇，采用等量递加混合法混合均匀，粉碎，过80目筛；制成均匀的软材，通过16目筛制粒。60℃以下干燥4小时，收粉，喷入适量桔子香精，用14目筛整粒，送检，检验合格，分装，包装即得。
实例2 醋酸精氨酸胶囊剂的制备配方醋酸精氨酸400g糊精 50g蔗糖 50g制成 1000粒制备工艺按配方量称取醋酸精氨酸、蔗糖、糊精混合均匀，粉碎，过80目筛；制成均匀的软材，通过16目筛制粒。60℃以下干燥4小时，收粉，用14目筛整粒，送检，检验合格，装入硬胶囊或肠溶胶囊中。


本发明属于非特异性免疫增强药物，是一种醋酸精氨酸口服制剂，其药效组分为精氨酸醋酸盐，酸碱度适中，pH为6.0～7.5，不存在氯离子酸根，口服后对胃肠道不会产生刺激，长期服用不会产生高氯血症。它作为一种免疫增强药物，在临床上主要用于严重创伤、烧伤、大手术及肿瘤病人放、化疗后机体疫功能抑制的患者，安全、方便、效果好。