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美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用制作方法

  • 专利名称
    美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用制作方法
  • 发明者
    吴燕玲, 方明, 李鹏, 杜磊, 谢静莉, 魏东芝
  • 公开日
    2012年8月1日
  • 申请日期
    2012年3月23日
  • 优先权日
    2012年3月23日
  • 申请人
    华东理工大学
  • 文档编号
    C12P21/06GK102618608SQ20121008165
  • 关键字
  • 权利要求
    1.美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用2.如权利要求I所述的应用,其特征在于,所述美国大杏仁为果仁经蛋白酶水解、酸性水解或碱性水解后的产物3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述美国大杏仁包括脱脂和未脱脂的果仁4.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述蛋白酶选自常见蛋白酶,比如胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶、胰蛋白酶以及菠萝蛋白酶5.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述酸性水解的pH为2 66.如权利要求2所述的应用,其特征在于,所述碱性水解的pH为8 117.美国大杏仁用于制备降血压食品或保健品的应用,其特征在于,所述降血压食品或保健品用于抑制血管紧张素转化酶的活性
  • 技术领域
    本发明属于食品领域,具体地说,是关于美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶 (Angiotensin Converting Enzyme, ACE)抑制剂的应用
  • 背景技术
  • 具体实施例方式
    以下结合具体实施例,对本发明作进一步说明应理解,以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围以下实施例中,ACE抑制活性的测定原理及方法步骤如下美国大杏仁蛋白水解物(多肽)的ACE抑制活性测定采用体外模拟测定,体外ACE 抑制率测试原理为底物马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)在ACE的催化作用下,可以生成一分子马尿酸(Hip)、一分子由组氨酸和亮氨酸结合的二肽,通过高效液相色谱的方法测定Hip的含量,进而可以间接测定ACE的酶活;而ACE抑制剂的存在可以抑制ACE的活性,致使Hip 的生成减少,从而间接反映了 ACE抑制肽的活性测试方法步骤如下选取Eppendorf(EP)管作为反应器,编号1、2、3、4等,I号管加入20 u L去离子水作为对照,2、3、4等管加入20 ii L的ACE抑制剂,同时各管内加入10 y L 的底物HHL,37°C温浴5min,然后加入10 y L的ACE启动反应,在37°C水浴中反应40min,反应结束后,加入IOOuL的HCl(IM)终止反应反应液在12000rpm,4°C离心lOmin,上清液用0. 45 ii m的醋酸纤维薄膜过滤,然后在高效液相色谱(HPLC)上进行测定HPLC条件是 15%乙腈85%水(0. 1% TFA),检测波长228nm,柱温30°C,上样量10 u L ;ACE抑制率(X)按下式计算X = (A 对照-Al) /A 对照 X 100 %式中X_ACE抑制率)A对照-对照组生成Hip的峰面积Al-实验组生成Hip的峰面积实施例1-18、未脱脂美国大杏仁多肽水解物的制备美国大杏仁捣碎研磨,收集粉末按表I所示,对获得的未脱脂美国大杏仁粉末分别用酸性溶液、碱性溶液不同的蛋白酶处理,具体如下酶水解称取5g磨碎美国大杏仁粉末,加水50ml ;蛋白酶选自常见蛋白酶,如胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶、胰蛋白酶以及菠萝蛋白酶,按照表I 所列的蛋白酶水解条件,调至蛋白酶相应的pH值,加蛋白酶0. 1% (w/v),分别在最适温度下水解取酶解液离心(12000r/min,10min,4°C ),上清液于4°C冷藏酸、碱水解称取5g粉末加50ml去离子水,分别用IM HCl和IM NaOH调pH值至2、4、6、8、10、11,于55°C水浴水解分别取酸解液和碱解液离心(12000r/min,10min,4°C ),
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  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用的制作方法美国大杏仁(Amygdalus comnnis)又称扁桃(在中国俗称巴旦杏、巴旦木)蔷薇科扁桃属,是一种重要的干果油料及药用树种。其世界年总产量在120万吨左右,居世界四大干果之首。美国加州是大杏仁最佳的生长地点,美国大杏仁含有蛋白质21. 22% ;油脂 49. 42%;粗纤维12. 2%;糖类3. 89%;水4. 70% 每100克大杏仁中含钾800mg、钙264mg、 镁268mg、磷484mg、维生素E 26. 22mg,不含胆固醇和咖啡因(悅莉等,美国大杏仁寒热性的研究[J],中国食品学报,2008 (5) 58-63 ;杨凌等,美国大杏仁保健功能的研究进展[J],中国食物与营养,2009 (12) :55-57 ;Hyson DA, Schneeman BO, Davis PA. Almonds and almond oil have similar effects on plasma lipids and LDL oxidation in healthy men and women. The Journal of Nutrition. 2002,132 :703-707 ;http://ndb. nal. usda. gov/ndb/ foods/show/)。ACE(血管紧张素转化酶,Angiotensin Converting Enzyme)在人体内的作用是把血管紧张素I (Angiotensin I)转化成血紧张素II (Angiotensin II),同时还会使血管舒缓激肽失活,而血管紧张素II为强烈的血管收缩物质,从而使体内血压升高。ACE是一种金属肽酶,含有2个结合Zn2+的位点,这就是与底物结合的“必须结合位点(Obligatory Binding Site)”。Zn2+结合位点是ACE催化反应的活性基团所在部位。 各种ACE抑制物的共同作用是与ACE活性部位的Zn2+结合,使之失活。降血压肽是由数个氨基酸组成的肽,是对ACE活性区域亲和力较强的竞争性抑制剂,它们与ACE的亲和力比血管紧张素I或舒缓激肽更强,而且也较不容易从ACE结合区释放,降低ACE活性或使其失去活性,从而阻碍ACE催化血管紧张素I转化成血管紧张素II,使血管不收缩,以及催化水解舒缓激肽成为失活片段的两种生化反应过程,起到降血压的作用。到目前为止,未发现有关于利用美国大杏仁制备ACE抑制物或降血压药物的报道。
本申请的发明人在研究美国大杏仁的用途的过程中发现,美国大杏仁的水解产物具有明显的抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性。本发明的目的在于,提供一种美国大杏仁提取血管紧张素转化酶抑制剂的应用。根据本发明,所述美国大杏仁为大杏仁经蛋白酶水解、酸性水解或碱性水解后的 产物。根据本发明的优选实施例,所述美国大杏仁包括脱脂和未脱脂的杏仁。根据本发明的优选实施例,所述蛋白酶选自胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、 木瓜蛋白酶、风味酶、胰蛋白酶以及菠萝蛋白酶。根据本发明的优选实施例,所述蛋白酶水解时间为0. 5 19hr。根据本发明的优选实施例,所述酸性水解选择的pH为2 6。根据本发明的优选实施例,所述碱性水解选择的pH为8 11。基于美国大杏仁具有抑制血管紧张素转化酶活性的作用,美国大杏仁可进一步用于开发具有降血压功能的食品或保健品。本发明为美国大杏仁的开发利用开辟了一条全新的途径,具有非常广泛的应用前景上清液于4°C冷藏。表I、蛋白酶、酸、碱水解条件
本发明公开了一种美国大杏仁用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。优选的,所述美国大杏仁为大杏仁经蛋白酶水解、酸性水解或碱性水解后的产物。本发明为美国大杏仁的开发利用开辟了一条全新的途径,具有非常广泛的应用前景。



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