一种防治急慢性心血管疾病的中药组合物的制作方法技术领域：】，具体涉及一种防治急慢性心血管疾病的中药组合物，具体的说是人参皂苷Rb1，鲁斯可皂苷元和五味子醇甲组成。该药物的筛选根据定量药理学在组方优化设计中的应用，通过实验设计，建立回归模型得到最优的配伍比例与剂量，并经实验验证而得。技术领域：】[0001]本发明涉及医药【技术领域：】，具体涉及一种防治急慢性心血管疾病的中药组合物。该组合由人参皂苷Rb1，鲁斯可皂苷元和五味子醇甲组成。【背景技术：】[0002]随着世界人口的日益老龄化，心血管疾病发病率逐年增加，严重威胁人类健康和生活质量。其发病机理复杂，目前尚未完全阐明，主要涉及氧自由基损伤、细胞内钙超载、能量代谢障碍、和炎症反应等病理环节。分别针对这些病理机制，已研发的化学药物如抗氧自由基药物、钙拮抗剂、硝酸酯类药物、β受体阻滞剂等，但至今尚未获得真正满意的效果。对于这样的复杂型疾病，依靠这种特定靶标药物和单一治疗的模式已不能完全解决，基于单一“基因-疾病-药物”研究思路的单靶点药物研发模式受到挑战，新药研发成功率明显下降，不能适应复杂疾病的防治需求。国际上从鸡尾酒疗法治疗癌症，到多效药丸治疗心血管疾病，体现了多靶点治疗在攻克复杂性疾病中的优势。传统中医药的复方由多味药物组成，治疗上具有多成分多靶点，多途径干预的特点，成为临床上的常用药，但其药效物质基础和作用机制往往不太明确，一定程度限制其国际化、现代化发展。因此，基于组效关系的组分配伍研制现代中药的理论模式和相关技术体系，为现代中药的发现与设计开拓了思路和途径。从临床有效方剂出发，研究其物质基础和作用机理，针对关键病理环节与作用途径，优化组方设计，进一步创制成分明确、机理清楚、质量可控，安全有效的新复方制剂，来源于临床，再回归到临床，是中药新药创制的重要途径之一，符合转化医学理念，具有较大的理论价值和应用前景。[0003]基于上述研究理念，发明人从临床防治心脑血管疾病疗效确切的生脉散制剂出发，筛选出人参总皂苷、短葶山麦冬总皂苷、五味子总木脂素的一定配比组合物能够显著抗心脑缺血(授权专利:ZL200710020901.7)，并以脑缺血缺氧为模型，进一步筛选其有效化学成分及其最佳配伍比例组合，得到人参皂苷Rb1和/或人参皂苷Rg1、短葶山麦冬皂苷C(DT-13)和五味子醇甲的有效成分组合(ZL200710132029.5)。然而，复方化学成分复杂，针对不同的病症，药效物质基础可能有所差异，以不同的疾病模型为导向，能得到针对性更强的不同有效成分配伍组合，即使是相同有效成分的不同配比，活性也往往有很大差异。因此，发明人在前期研究基础上，针对心血管疾病，分别选择复方中三个具有不同作用特色的有效成分，包括具有抑制钙离子超载和抗细胞凋亡的人参皂苷Rb1,具有抗氧化作用的五味子醇甲，和抗炎抗血栓活性突出的鲁斯可皂苷元，以心肌缺血缺氧为筛选模型，通过多指标测定，并在急慢性心肌缺血缺氧模型加以验证，探索具有多成分多靶点优势有效防治心血管疾病的新配伍组合。定量药理学(或称数学药理学)是在药理学中，运用数学手段，定量研究药理作用规律的一门分支学科，促使复杂生物学研究成果的转化，并以定量方式进行表达。因此，发明人根据中药复方定量设计的关键技术，结合定量药理学的方法，设计3个有效成分(人参皂苷Rb1、鲁斯可皂苷元、五味子醇甲)不同的剂量水平，基于多指标筛选模型(异丙肾上腺素致小鼠心肌缺血模型，垂体后叶素致小鼠心肌缺血模型)，应用统计学方法(正交试验与均匀设计实验相结合)，以测定的各种相关生理生化值为观测指标，通过多元回归分析的实验数据处理方法，模拟组方药效并进行分析，得到其防治心肌缺血缺氧的最优组合比例和剂量范围；再通过小鼠心肌缺血再灌注模型和慢性间歇性缺氧模型加以活性验证，阐释其多途径的作用特点，为新组合物临床用于急慢性心血管疾病防治提供药理学依据。[0004]本发明采用多个模型模拟心血管疾病，异丙肾上腺素诱导心肌缺血的机制是利用其收缩冠状动脉、增强心肌收缩力和增加心肌耗氧量等作用途径诱发心肌损伤，造成短时间的心肌梗死，此外，心肌细胞钙超载、氧自由基损伤等也参与其中(LimKH,etal.CardioprotectivepotentialofKoreanRedGinsengextractonisoproterenol-1nducedcardiacinjuryinrats[J].JGinsengRes.2013,37(3):273-282；ffangYQ,etal.ProtectiveeffectsandactiveingredientsofY1-Q1-Fu-Maisterilepowderagainstmyocardialoxidativedamageinmice.JPharmacolSc1.2013.122:17-27);垂体后叶素诱导心肌缺血的机制是导致冠状动脉痉挛，血管外周阻力增大，心肌负荷加重，进而引起心肌缺血，模拟冠心病，心绞痛，急性心肌梗死等特征(LuZQ,etal.Progressinpreparationmethologyofanimalmodelsofmyocardialischemia[J],ChinPharmacolBull.2012,28(8):1053-1057;于永军等.当归芍药散煎剂对垂体后叶素致小鼠心肌缺血的影响[J].中国实验方剂学杂志，2013，18(6):243-246)，上述模型用于有效成分组合的筛选。结扎小鼠冠状动脉左前降支诱导心肌缺血再灌注损伤，包括钙超载、氧自由基损伤，炎症等损伤，模拟临床冠心病造成心肌梗死，复灌后使血液中的氧与受损心肌细胞或坏死心肌细胞的溶解物质反应形成氧自由基对部分心肌的二次损伤(GaoEH,etal.Anovelandefficientmodelofcoronaryarteryligationandmyocardialinfarctioninthemouse[J].Circ.Res.2010.107:1445-1453；AhnDetal.1nductionofmyocardialinfarctsofapredictablesizeandlocationbybranchpatternprobability-assistedcoronaryligationinC57BL/6mice[J].AmJPhysiolHeartCircPhysiol.2004，H1201-H1207.);结扎小鼠冠状动脉左前降支诱导急性心肌梗死损伤，包括心肌细胞坏死，钙超载，氧自由基损伤，模拟临床冠状动脉闭塞或冠状动脉病变的基础上，由于冠状动脉供血急剧减少或中断，使相应区域的心肌发生严重而持久的缺血(GaoEHetal.Anovelandefficientmodelofcoronaryarteryligationandmyocardialinfarctioninthemouse[J].Circ.Res.2010.107:1445-1453;崔文章等.川芎嗪对急性心肌梗死模型大鼠的保护作用及机制[J].中国实验诊断学，2007，11(12)=1599-1602);慢性间歇性缺氧小鼠模型可模拟心悸、心肌肥大，最终导致心脏功能不全，心衰等，还可模拟中医气阴两虚证的表观指征等(王文萍等.基于“方证相应”理论验证慢性间歇性缺氧模型气阴两虚证候属性的初步研究[J].中国中医基础学杂志.2012,18(I):50-52；ChaiCZ,etal.MiceexposedtochronicIntermittenthypoxiasimulateclinicalfeaturesofdeficiencyofbothQiandYinSyndromeintraditionalChinesemedicine[J].EvidBasedComplementAlternatMed.2011,1-7),上述模型用以有效成分组方的活性验证。【
发明内容】:[0005]本发明公开了一种由人参皂苷Rb1、鲁斯可皂苷元和五味子醇甲作为活性成分的中药有效化学成分组成的复方药物组合物。不同比例的化学成分组合，药效各不相同，从中得出最优配伍组合，具有多成分、多途径防治心肌缺血缺氧的作用特点。[0006]本发明得到的有效成分组合物，成分明确，质量可控，在保证疗效的基础上同时降低服药剂量，提高了临床用药的安全性，减少不良反应的隐患，有利于制成现代剂型的以组分配伍的现代复方中药。[0007]本发明根据中药复方定量设计的关键技术，通过正交实验与均匀实验设计相结合，采用多元回归分析法，建立多元回归方程，模拟最佳药效，经反复筛选得到最佳组合，该方法合理可行。[0008]本发明优选三个有效成分的配伍比例以及最佳给药剂量，其中组合物中三个单体成分的重量份数比优选:人参皂苷Rbd~24份，鲁斯可皂苷元0.1~1.2份，五味子醇甲4~12份，进一步优选的三组分的重量份数比是:人参皂苷RbJ2~24份，鲁斯可皂苷元0.1~0.8份，五味子醇甲6~12份，或者人参皂苷Rb^~12份，鲁斯可皂苷元0.3~1.2份，五味子醇甲4~8份。最佳给药剂量范围16~20mg/kg。最终获得三组分的重量份数比是:人参皂苷Rbj~7份，鲁斯可皂苷元0.4~0.8份，五味子醇甲5~7份，最佳给药剂量范围12~18mg/kg。[0009]本发明选择的三个有效成分，来源广泛易得，均可在市场上买到纯度为98%以上的样品。以下是本发明有效化学成分复方药物组合物的部分药理学试验及结果:[0010]一:正交实验初步筛选三个有效成分组合比例[0011]I以异丙肾上腺素模型筛选三个有效成分组合比例[0012]设计正交实验，人参皂苷RbJ简写为GRb1),鲁斯可皂苷元(简写为Rus)，五味子醇甲(简写为SchA)为正交实验的三个因素，每个因素选择3个剂量，为其三个水平。根据正交表L9(34)安排实验(表1，2)。取110只ICR小鼠，每组10只，分别为空白组，模型组，正交实验1-9组。各给药组腹腔(ip)给药10ml/kg,空白组与模型组给予等剂量的溶媒，30min后皮下注射(Sc)异丙肾上腺素25mg/kg，连续3天。第三天注射异丙肾上腺素15min后，将小鼠放入装有15g钠石灰的广口瓶中,瓶口密闭，记录缺氧状态下各组小鼠的存活时间。实验结果见表3。[0013]表1正交实验因素水平表[0014]寇俊萍,余伯阳,褚纯,柴程芝,庄先飞申请人:中国药科大学