专利名称：一种含有复合益生素的饲料添加剂及其制备方法
本发明针对现有技术的不足，提供一种含有复合益生素的饲料添加剂及其制备方法。本发明技术方案如下一种含有复合益生素的饲料添加剂，原料组分如下，均为重量份熟化玉米皮80 100份，玉米浆10 20份，低聚异麦芽糖0. 5 5份，低聚甘露糖0. 5 4份，低聚半乳糖2 4份；以及，菌体浓度为1. 5X109cfu/ml 2. 5X 109cfu/ml 的布拉酵母(Saccharomyces boulardii)菌液5 15份，菌体浓度为5. 0 X 108cfu/ml 8. 5X 108cfu/ml的地衣芽孢杆菌(Bacillus Licheniformis) 3 10 份，菌体浓度为 1. 5 X 109cfu/ml 2. 5 X 109cfu/ml 的乳酸杆菌(Iactobacillus) 5 15份；所述低聚异麦芽糖、低聚甘露糖、低聚半乳糖均以纯品计。优选的，原料组分如下，均为重量份熟化玉米皮85 100份，玉米浆10 12份，低聚异麦芽糖3 5份，低聚甘露糖0.8 1份，低聚半乳糖2. 5 3份；以及，菌体浓度为1. 5X109cfu/ml 2. 5X109cfu/ml的布拉酵母菌液8 10份， 菌体浓度为5. 0X108cfu/ml 8. 5X 108cfu/ml的地衣芽孢杆菌4 6份，菌体浓度为1.5X109cfu/ml 2. 5X109cfu/ml 的乳酸杆菌 10 12 份。上述熟化玉米皮是将玉米皮在0. 08MPa 0. 12MPa压力下，115 °C 121 °C， pH4. 0 5. 8的条件下进行蒸气加热30 50min。熟化玉米皮的腊质表面已被破坏，熟化玉米皮较玉米皮吸附性增加，玉米皮中的大分子多糖类成分更易降解，可以提高益生素的益生菌数量。所述玉米浆为浆浓15 30wt%的玉米浆。上述布拉酵母(Saccharomyces boulardii)、地衣芽孢杆菌(Bacillus Licheniformis)、乳酸杆菌(Iactobacillus)均为普通市售菌株。上述含有复合益生素的饲料添加剂的制备方法，步骤如下(1)取布拉酵母，经28V 32°C活化培养30h 38h，然后经28°C 32°C、160r/ min 180r/min摇床扩大培养30h 36h,获得菌体浓度1. 5X109cfu/ml 2. 5 X IO9Cfu/ ml的布拉酵母菌液；(2)取地衣芽孢杆菌，经35°C 38°C活化培养IOh 16h，然后经34°C 36°C、 160r/min 200r/min摇床扩大培养IOh 15h，获得菌体浓度5. 0 X 108cfu/ml 8. 5 X 108Cfu/ml的地衣芽孢杆菌菌液；(3)取乳酸杆菌，经32°C 38°C活化培养20h 30h，然后经30°C 36°C扩大培养18h 24h，获得菌体浓度1. 5X109cfu/ml 2. 5X109cfu/ml的乳酸杆菌菌液；(4)按比例，将步骤(1)制得的布拉酵母菌液、步骤(2)制得的地衣芽孢杆菌菌液、 步骤(3)制得的乳酸杆菌菌液和熟化玉米皮、玉米浆、低聚异麦芽糖、低聚甘露糖、低聚半乳糖混合均勻，即得。所述步骤(1)中的活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比葡萄糖4% 6%，蛋白胨0.8% 1.2%，琼脂1.5% 2%，余量水。所述步骤(2)中的活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比蛋白胨0. 8% 1. 2%，NaCl 1 % 1. 2%，酵母膏 0. 5% 0. 8%，琼脂 1. 5% 2%，余量水，pH7. 0 7. 5。所述步骤(3)中的活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比葡萄糖2% 4%，蛋白胨0.8% 1.2%，牛肉膏1% 1.2%，酵母提取物 0. 5% 0. 6 %，柠檬酸二胺 0. 1 % 0. 2 %，磷酸氢二钾 0. 15 % 0. 2%，MgSO4 · 7H20 0. 05 % 0. 06 %，MnSO4 · H2OO. 02 % 0. 03 %，吐温 80 0. 1 % 0. 12 %，乙酸钠 0. 2 % 0. 5%，琼脂 1. 5%~ 2%，余量水，ρΗ6· 5 7. 0。所述步骤(1)中的扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比葡萄糖2% 4%，玉米浆8% 10%，CaCO3 0. 2% 0. 3%，余量水，ρΗ 4. 0 5. 0。所述步骤(2)中的扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比蛋白胨0.8% 1.2%，NaClO. 8% 1%，玉米浆8% 10%，余量水，ρΗ 7. 0 7. 5。所述步骤(3)中的扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比葡萄糖2% 4% 4%，蛋白胨0.8% 1.2%，牛肉膏 1.2%，酵母提取物 0. 3 % 0. 5 %，柠檬酸二胺 0. 1 % 0. 2 %，磷酸氢二钾 0. 1 % 0. 2 %，MgSO4 · 7H20 0. 05% 0. 06%，MnSO4 · H2O 0. 02% 0. 03%，吐温 80 0. 1 % 0. 12%，乙酸钠 0. 2% 0.5%，琼脂 1. 5% 2%，余量水，pH 6.8。上述培养基均采用121°C灭菌20min的条件进行灭菌处理。所述低聚异麦芽糖、低聚甘露糖、低聚半乳糖均为普通市售食品添加剂。有益效果本发明所述的饲料添加剂不但含有三种重要的益生菌，还添加玉米加工副产物熟化玉米皮、玉米浆作为益生素的填充材料，同时添加了多种功能性益生元，强化益生素的作用效果，不仅克服了现有饲料添加剂原料单一的缺陷，而且产品中益生菌的存活菌量高；此外该饲料添加剂还具有安全、环境可降解及成本低的特点，可显著改善抗生素过度使用对养殖业的影响，提高畜禽产品的安全性和实用性。图1是地衣芽孢杆菌(Bacillus Licheniformis)发酵培养生长曲线；图2是乳酸杆菌(lactobacillus)发酵培养生长曲线；图3是布拉酵母(Saccharomyces boulardii)发酵培养生长曲线；

1.5X109cfu/ml 2. 5X109cfu/ml 的菌液；〔0050〕 所述活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比 〔0050 4^葡萄糖，1^蛋白胨，2^琼脂，余量水。 〔0052〕 所述扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比 〔0053〕 葡萄糖2^，玉米浆10^，0.2^，余量水，邱4.5。
〔0054〕 口)取地衣芽孢杆菌出肌111118 [化&！！丨伪！“！！！化)，经37。0活化培养12、直到菌膜
覆盖整个培养基表面为止，然后取3环菌种，接种至活化培养基，经371、18017111111摇床扩
大培养12、获得菌体浓度5丨0父108辻11加1 8’ 5 X川8。^!/^的菌液；
〔0055〕 所述活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比
〔0056〕 1^蛋白胨，體，0’ 5^酵母膏，2^琼脂，余量水，邱7’ 5。
〔0057〕 所述扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比
〔0058〕蛋白胨，1^妝以，川^玉米浆，余量水，邱7.5。
〔005幻 ^取乳酸杆菌(仏。^^肌丨二卯)，经371活化培养2处，然后取3环菌种，接种至 活化培养基，经37。0恒温扩大培养2处，获得菌体浓度1. 5父109411加1 2’ 5 X川9。^!/“ 的菌液；
〔0060〕 所述活化培养，培养基组分如下，均为重量百分比
〔0061〕 葡萄糖2^，蛋白胨1^，牛肉膏，酵母提取物0.5^，柠檬酸二胺0.2^，磷酸氢 二钾 0丨 ，悔304 ‘ 7只20 0丨 058^，111304 ‘ ！！20 0丨 025^，吐温 80 0丨 1^，乙酸钠 0丨 琼脂，余量水，邱6.8。
〔0062〕 所述扩大培养，培养基组分如下，均为重量百分比
〔0063〕 葡萄糖2^，蛋白胨1^，牛肉膏1^，酵母提取物0丨5^，柠檬酸二胺0丨2^，磷酸氢 二钾 0丨 ，悔304 ‘ 7只20 0丨 058^，111304 ‘ ！！20 0丨 025^，吐温 80 0丨 1^，乙酸钠 0丨 琼脂，余量水，邱6.8。
〔0064〕(幻按比例，将步骤(丨)制得的布拉酵母菌液、步骤^制得的地衣芽孢杆菌菌液、 步骤^制得的乳酸杆菌菌液和熟化玉米皮、玉米浆、低聚异麦芽糖、低聚甘露糖、低聚半 乳糖混合均勻，装入塑料袋中，抽真空，制得含有复合益生素的饲料添加剂。 〔0065〕 上述培养基均采用1211灭菌200111的条件进行灭菌处理。 〔0066〕 活菌的检测方法采用定期取保存的益生素样品，稀释后涂布平板，培养48小时左 右，计数菌落数量，根据稀释倍数计算活菌的数量，益生素活菌的存活率的检测结果见表 1
〔0067〕 表 1〔0068〕


本发明涉及一种含有复合益生素的饲料添加剂及其制备方法，其原料组分如下熟化玉米皮，玉米浆，低聚异麦芽糖，低聚甘露糖，低聚半乳糖；以及，布拉酵母(Saccharomyces boulardii)菌液，地衣芽孢杆菌(Bacillus Licheniformis)菌液，乳酸杆菌(lactobacillus)菌液；本发明所述的饲料添加剂不仅克服了现有饲料添加剂原料单一的缺陷，而且产品中益生菌的存活菌量高，具有安全、环境可降解及成本低的特点。