专利名称：东紫苏在制备治疗流感病毒及艾滋病毒药物中的应用的制作方法 东紫苏Elsholtzia bodinieri Van.为一种唇形科植物，它为多年生草本，长10～20厘米，根茎短，黑褐色，断面黄色，须根多，茎四棱形，直径2～5毫米，表面绿色或紫色，被毛，断面黄白色。叶多卷缩，部分叶缘具圆齿，绿色或紫红色，被疏柔毛，背面密被腺点。穗状花序单生于枝顶，偏于一侧，花冠紫红色，密生白色长毛。气清香，味辛、微苦。嫩叶可代茶用。原收载于《中药大辞典》，曾报道有解表，升清阳，清肝热的功效，但未有报道治疗甲型、乙型流感病毒，更未有其能用于制备治疗抗艾滋病的药物的报道。
本发明的目的在于提供东紫苏在制备治疗甲型流感病毒药物中的应用。本发明的另一个目的是提供东紫苏在制备治疗乙型流感病毒药物中的应用。本发明的另一个目的是提供东紫苏在制备治疗艾滋病药物中的应用。东紫苏在制备上述治疗各种疾病的药物时，可以是以单独的东紫苏为原料制备成药剂，也可以将东紫苏与其他药物配合制备成复方制剂。一般将东紫苏制备成具有上述新用途的药物时，将东紫苏提取物单独地或加入复方中以常规提取及制剂工艺制备成药剂。这里所说的对东紫苏的提取，可以是用东紫苏的水提物，如水煎剂，水煎液的浓缩液，或东紫苏水提液醇沉后经喷雾干燥得到的粉剂；也可以是以乙醇或其他有机溶剂对东紫苏进行提取。
当然也可以将东紫苏原药直接制备成单方或复方的制剂。
为了更好地理解本发明的实质，下面将用东紫苏的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。
一、毒性试验结果表明＜5％浓度的药物和10倍人体用量的胶囊样品对鸡胚没有明显的毒性作用。证明本提取物使用安全。
二、抗流感病毒试验流感病毒选用蜀防-296株(H3N2)，培养方法采用流感病毒经典的鸡胚培养法，培养结果采用血凝试验鉴定。结果表明抗流感病毒效果很好。
三、抗流感甲型病毒活性筛选测试方法MDCK细胞接种96孔培养板，置5％CO2，37℃培养24小时。MDCK细胞分别加入流感甲型病毒10-3(60倍TCID50)、37℃吸附2小时后倾去病毒液，分别加入不同稀释度药物。设病毒对照和细胞对照，37℃培养36小时，观察结果，记录CPE，计算样品抗流感病毒半数抑制浓度(IC50)。阳性对照药病毒唑(RBV)，浙江康裕药业有限公司(批号960501)。
测试结果表1 样品抗流感甲型病毒活性测定结果

注TC50药物半数有毒浓度；IC50药物对病毒半数抑制浓度；SI选择指数，SI＝TC50/IC50。
结论样品东紫苏样品有抗流感甲型病毒活性。IC50为231.12μg/ml四、抗流感乙型病毒活性筛选测试方法MDCK细胞接种96孔培养板，置5％CO2，37℃培养24小时。MDCK细胞分别加入流感乙型病毒10-2.3(10倍TCID50)，37℃吸附2小时后倾去病毒液，分别加入不同稀释度药物。设病毒对照和细胞对照，37℃培养36小时，观察结果，记录CPE，计算样品抗流感病毒半数抑制浓度(IC50)。
阳性对照药病毒唑(RBV)，浙江康裕药业有限公司(批号960501)。
测试结果表2 样品抗流感乙型病毒活性测定结果

结论样品东紫苏样品有抗流感乙型病毒活性。IC50为333.33，SI为3.0五、体外抗HIV-1蛋白酶(HIV-1PR)活性筛选测试方法样品稀释后加入含有荧光标记底物的反应缓冲液中，并加入基因工程靶酶，在最佳反应条件下孵育，用FLUO star Galaxy荧光仪测定荧光值。阳性对照药印地那韦(indinavir)，葛兰索公司提供。
实验结果表3 样品抗HIV-1蛋白酶活性测定结果

结论样品东紫苏样品对HIV-1PR有抑制活性。
六、样品体外抗HIV-1逆转录酶(HIV-1RT)活性筛选测试方法样品稀释后加入含有Biotin-dUTP和基因工程靶酶的反应Buffer中，在最佳反应条件下孵育，以亲合素标记的辣根过氧化物酶系统显色，测定OD450值。
阳性对照药磷甲酸钠(PFA)，由常州三厂生产测试结果表4 样品抗HIV-1逆转录酶活性测定结果

结论样品东紫苏样品对HIV-1RT酶有抑制活性，对HIV-1RT酶活性抑制的IC50为4.7μg/ml。
七、样品体外抗HIV-1整合酶(HIV-1IN)活性筛选测试方法样品稀释后加入供体底物包被96孔扳中，并加入含有基因工程靶酶和biotin-靶底物的反应Buffer中，在最佳反应条件下孵育，以生物素标记的碱性磷酸酶系统显色，测定405nm吸收值OD值。
阳性对照药S-y，上海有机所提供。
测试结果表5 样品抗HIV-1整合酶活性测定结果

结论样品东紫苏样品对HIV-1 IN酶有抑制活性，IC50为6.25μg/ml八、抑菌试验检测方法采用钢圈法。结果表明对肺炎双球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌等与上呼吸道有关细菌有明显抑制作用。
本发明的优点在于1、本发明提供了植物东紫苏可作为药物组份的提取物，该提取物可以单独使用，也可以与其他植物提取物混合使用。
2、本发明对已知植物东紫苏发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
3、本发明的东紫苏安全无毒，药理作用强，预示着很好的药用前景。
4、本发明的东紫苏配制成的药物可为多种剂型，如口服胶囊剂、片剂、粉剂、丸剂、颗粒剂、口服液、软胶囊剂、膏剂、酊剂、散剂、针剂等。

实施例1取东紫苏1000克，加入5000毫升水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次2小时，过滤，滤液浓缩、干燥获得东紫苏水提取物浸膏，加入通用药用辅料微粉硅胶、微晶纤维素，按照通常工艺制成片剂。用于治疗甲型流行性感冒。
实施例2取东紫苏300克、千里光300克、黄芪400克、羌活350克，用5000毫升50～70％乙醇在80℃温度条件下热回流提取三次，过滤，滤液减压回收乙醇，浓缩得提取物浸膏，加入通用药用辅料糖粉，按照通常工艺制成颗粒剂。用于治疗乙型流行性感冒。
实施例3取东紫苏1000克，用3500毫升乙醇室温浸泡提取三次，过滤，77℃回收乙醇，浓缩得提取物浸膏，上大孔树脂柱，取醇洗部分，浓缩干燥得精制物；加入通用药用辅料微粉硅胶，按照通常工艺制成胶囊剂。用于治疗艾滋病。


本发明公开了东紫苏新的药物用途，东紫苏可用于制备抗甲型流感病毒、抗乙型流感病毒、抗艾滋病等疾病的药物。