灯盏花有效部位及制备工艺和制剂制作方法

孙汉董, 赵勤实, 单振光, 杨春雷, 彭丽艳, 林中文

2001年12月26日

2000年6月12日

2000年6月12日

中国科学院昆明植物研究所, 云南施普瑞生物工程有限公司

A61P9/00GK1327811SQ00113019

灯盏 制剂 制备 工艺 部位 有效

1.一种灯盏花有效部位的制备工艺，其特征在于将灯盏花原料(全草)粗粉直接通过50-90％的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮提取，原料与提取液比例为1∶5-1∶20，提取液40-60℃低温减压浓缩，放置沉淀，除去叶绿素等杂质，浓缩液上聚苯乙烯树脂柱层析，先用水洗脱，收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脱部份，水液用浓盐酸调至PH1-2，此酸性水溶液再上聚苯乙烯树脂柱，最后用50-70％稀醇洗脱，该洗脱液减压、浓缩，喷雾干躁，得黄色粉末，即为该有效部位2.按权利要求1所述的制备工艺得到的有效部位，其特征在于含以下三类物质①黄酮类化合物，②咖啡酸及咖啡酰基奎宁酸类化合物，③焦袂康酸及其衍生物3.按权利要求2所述的有效部位，其特征在于黄酮类化合物含灯盏甲素、乙素、黄芩素4.按权利要求2所述的有效部位，其特征在于咖啡酸及咖啡酰奎宁酸类化合物含咖啡酸、氯原酸、3，4，一二咖啡酰基奎宁酸、3，5，一二咖啡酰基奎宁酸和飞蓬酯A5.按权利要求2所述的有效部位，其特征在于焦袂康酸及其衍生物含焦袂康酸、飞蓬甙、6-咖啡酰基飞蓬甙6.按权利要求2所述的有效部位的制剂，其特征在于利用该有效成份可制成各种制剂注射针剂，注射用粉针剂，口服片剂、冲剂、胶囊和滴丸7.按权利要求6所述的制剂，其特征在于静脉注射液由以下成分组成(重量/体积比)灯盏花有效部位0.4-1.0％，药用碱0.8-2.0％和少量药用辅料8.按权利要求6或7所述的制剂，其特征在于药用碱可采用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、氢氧化钾、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和乙二胺四中的一种或者数种组合9.按权利要求6或7所述的制剂，其特征在于药用辅料为氯化钠、苯甲醇、吐温-60、土温-80、山梨醇、甘油和丙二醇中的一种或数种组合10.按权利要求6所述的制剂，其特征在于此制剂用于治疗中风后瘫痪、冠心病，高血压、脑栓塞等

本发明涉及治疗心血管疾病的药物，具体地说是灯盏花有效部位及制备工艺和制剂灯盏花，又名灯盏细辛，属菊科植物短亭飞蓬[Erigeron breviscapus(vant) Hand.-Mazz.]的全草，具有散寒解表、舒筋活血、心痛消积等功效，民间长期用于治疗中风偏瘫、冠心病、心绞痛等症，效果显著自80年代以来，已有多家单位研究开发了与灯盏花有关的制剂并用于临床，已职得了相当的社会和经济效益然而，过去一直认为灯盏花素〔灯盏乙素(黄芩素甙)为主和少量的灯盏甲素(芹菜素-7-β-D-葡萄糖醛酸甙)〕是主要活性成分，因此各种制剂均以灯盏花素或总黄酮为质量控制标准由于以往认识的局限，致使工艺不尽合理，药物原料利用率低，产品不能完全真实反映该药的疗效本发明的目的是对灯盏花进行深入研究后，提供一种技术含量高，合理、安全，高得率、低成本的提取灯盏花新的有效部位的制备方法，及其有效部位用于临床的各种制剂本发明是对灯盏花的化学活性成分进行了深入研究和再认识，发现灯盏花的活性成分不仅仅是盏花素等黄酮类化合物，而是包括三类物质黄酮类；咖啡酰奎宁酸类和焦袂康酸及其衍生物在药理配合下，对上述有效部位按以下方法进行了提取，即将灯盏花原料(全草)粗粉直接通过50-90％的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮提取，原料与提取液比例为1∶5-1∶20，提职液40-60℃低温减压浓缩，放置沉淀，除去叶绿素等杂质，浓缩液上聚苯乙烯树脂(Dion-HP20，D101，DM130t等)柱层析，先用水洗脱，收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脱部份，水液用浓盐酸调至PH1-2，此酸性水溶液再上聚苯乙烯树脂柱，最后用50-70％稀醇洗脱，该洗脱液减压、浓缩，喷雾干躁，得黄色粉末，即为该有效部位上述的制备工艺得到的有效部位即为①黄酮类化合物，②咖啡酸及咖啡酰基奎宁酸类化合物，③焦袂康酸及其衍生物上述有效部位中的黄酮类化合物含灯盏甲素、乙素、黄芩素上述有效部位中的咖啡酸及咖啡酰奎宁酸类化合物含咖啡酸、氯原酸、3，4，一二咖啡酰基奎宁酸、3，5，一二咖啡酰基奎宁酸和飞蓬酯A(erigosterA)上述有效部位中的焦袂康酸及其衍生物含焦袂康酸、飞蓬甙、6-咖啡酰基飞蓬甙该有效部位质量稳定，经HPLC定性、定量分析，该有效成分含量在70-90％之间利用该有效部位可制成临床上各种制剂注射针剂，注射用粉针剂，口服片剂、冲剂、胶囊和滴丸等由该有效部位制备的各种制剂，在临床上用于治疗中风后瘫痪、冠心病等心脑血管病，疗效显著，是新一代的灯盏花制剂其中，静脉注射液由以下成分组成(重量/体积比)灯盏花有效部位0.4-1.0％，药用碱0.8-2.0％和少量药用辅料上述的药用碱可采用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、碳酸钾、氢氧化钾、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠和乙二胺四中的一种或者数种组合上述药用辅料为氯化钠、苯甲醇、吐温-60、土温-80、山梨醇、甘油和丙二醇中的一种或数种组合上述制剂用于治疗中风后瘫痪、冠心病，高血压、脑栓塞等本发明与现有技术比较具有如下积极效果1、现有技术有效部位主要特征是灯盏花素，并以分光光度法测总黄酮作为质量控制指标，此法误差很大而本发明的有效部位包含了三类有效成分(黄酮类、咖啡酰基奎宁酸类和焦袂康酸及其衍生物)，以HPLC定性、定量分析，建立了严格质量控制标准，所认识的化学成分含量占有效部位70-90％之间2、现有技术的工艺得率为1％左右，本发明有效部位得率为2-3％，提高了利用率，降低了成本3、该有效部位在药理作用方面与现有技术的产品显著不同在于具有显著的抗氧化、清除自由基作用脑缺血后，特别是缺血/再灌后，生成大量的自由基和脂质迷氧化物，这加重了神经细胞缺血性损伤，该有效部位及其制剂能促进神精功能改善，恢复因此，该有效部位在治疗脑率中后遗症方面优于现有产品本发明的有效部位制备的各种制剂用于治疗中风后瘫痪、冠心病，高血压、脑栓塞等，疗效显著，是新一代灯盏花制剂本发明涉及的有效部位具有显著药理作用1、抗血小板聚集，在浓度为500Kg/ml(体外)时，对ADD诱导的血小板聚集抑制率为75％，在体内，当静注15mg/Kg时，对胶原所致聚集抑制率为60％2、抗血栓作用，剂量为40mg/KgI，P，对AA诱导的血栓形成抑制率为80％(P＜0.05)3、抗氧化、清除自由基作用，在有效部位浓度分别为10，30，100μg/ml时，对氧自由基消除率分别为75.6％，71.7％，52.9％以下结合实施例对本发明作进一步的详述实施例11、灯盏花有效部位的制备方法职灯盏花全草粗粉50公斤，加入70％丙酮-水溶液1000升，分三次室温浸提，合并提取液，低温40-60℃减压浓缩至约100升体积，室温放置，过滤除去叶绿素等杂质滤液在已预处理的80KgD 101柱上吸附分配，先用约250升水洗脱，继以200升60％丙酮-水溶液洗脱水洗液用6N盐酸(HCl)酸化至PH1-2，访该水溶液再次上D101柱吸附分配，依然是用水洗至无酸性(约为200升水)，继以用约200立升60％丙酮-水洗脱60％丙酮水洗部分低温减压浓缩至约100升，喷雾干躁，得黄色粉有效成分，得量为1.1公斤，得率为2.2％(以灯盏花粗原料计)该有效部位主要含三类活性物质黄酮类、咖啡酰基奎宁酸类和焦袂康酸及其衍生物化学成分，经HPLC定性、定量分析，该化学成分含量达70-90％2、精制灯盏花静脉注射液的制备方法精制灯盏花静脉注射液由发以下成分组成(重量/体积比)灯盏花有效部位0.4-1.0％，药用碱0.8-2.0％，和少量药用辅料配制方法职配制量50％注射用水1000毫升，量于容器中，加热至80℃左右，依次加入灯盏花有效部位(半成品)原料110克，药用碱20克(？)，氯化钠170克搅拌溶解，再加入药用辅料20克搅拌，然后再加水10000毫升，搅拌均匀调节PH值，测定含量，合格后用玻璃砂棒和微孔滤膜串联过滤，滤液按每支2毫升分装密封，100℃流通蒸汽进行15分钟消毒灭菌，然后用冷水使其降温本品为黄色澄明液体，2ml/支，每毫升含有效部位5克，PH值为6.5-7.5，一般卫生学检查和其它检查均符合国家有关规定