专利名称:一种大肠杆菌高密度培养的培养基的制作方法随着生物制药的发展,利用重组DNA技术克隆大肠杆菌制得的工程菌,生产生物药数量越来越多,为生物技术获得生物药物产品的主要途径。一般情况下,生物药物的产率与大肠杆菌发酵密度密切相关,大肠杆菌的收率直接关系到生物药物的产率。所以在菌体表达蛋白效率相当的情况下,大肠杆菌的发酵密度直接影响到生物药物的生产成本。特别是在同样的纯化技术条件下。不断有学者进行这方面的研究,如根据化学计量模式(stoichiometric model)的方法重新对培养基配方进行设计和优化。在发酵策略方面,为了提高细菌发酵密度,发酵工艺普遍采用补料-分批发酵(fed-batch)的方式提高菌体生长密度和目标产物的表达总量。有必要开发出一种适用于工程菌高密度发酵培养的培养基。对于不同生物工程菌有不同的高密度发酵配方。我们开发了一种新的大肠杆菌高密度发酵配方。
本发明的目的在于提供一种工程菌高密度发酵培养的培养基。本发明的目的是通过以下措施来达到的,本发明的培养基每升包含有下列配比组分:表一:批培养基:__本发明一种大肠杆菌高密度培养的培养基属于生物领域,本发明的批培养基每升包含有下列配比组分酵母提取物5.00g/L,甘油7.75ml/L,硫酸铵3.0g/L,磷酸氢二钠6.0g/L,磷酸二氢钾3.0g/L,柠檬酸1.7g/L,硫酸镁1.2g/L,培养基用1Mol/LNaOH等碱性溶液调pH值至6.8。补料培养基每升包含有下列配比组分酵母提取物40g/l;甘油631g/l;二水钼酸钠0.02g/l;七水硫酸镁2.0g/l;五水硫酸铜0.007g/l;二水氯化钙0.665g/l;六水氯化钴0.007g/l;六水氯化铁0.20g/l;硼酸0.002g/l;七水硫酸锌0.05g/l;生物素 0.002g/l;一水硫酸锰0.04g/l;盐酸1.25ml/l;谷氨酸钠5.0g/l。本发明的培养基能显著提高大肠杆菌工程菌发酵密度,同时不降低每单位菌体蛋白表达量。提高目的蛋白表达总量,可减少试剂的消耗,节约成本。
一种大肠杆菌高密度培养的培养基制作方法
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