专利名称：用于产生连续浓度梯度和输出独立浓度的微流控芯片的制作方法[0002]化合物的浓度是所有化学和生物反应中的重要参数。一般而言，要测定化合物作用于一个生物体系的有效浓度时，需要制备一系列递升或递降的浓度，并对每个浓度进行测试。由于递升或递降的浓度均以串行形式产生，且最高与最低浓度往往相差几个数量级， 因此化合物浓度梯度的制备对化学和生物实验影响非常大。[0003]微流控芯片能实现浓度梯度的并行生成，且具有自动化和高重复性等性质，所以一直备受关注。以微流控芯技术产生浓度梯度的代表结构有T型微流管。该结构有两个进样和一个出样口，化合物与缓冲液在T型管交叉点接触后沿出样管下游以扩散作用混合， 由于出样管的管径不变，因此T型管的扩散距离不变。[0004]在对现有技术的研究和实践过程中，本实用新型的发明人发现，在低流速的条件下，T型管所产生的浓度梯度只集中在仅仅数百微米内，难以有效地利用。提升流速虽然有助于增宽T型管的浓度梯度，但对于脆弱的生物细胞而言，提升流速所增加的剪切力对细胞活性有不良影响。因此以T型微流管进行的细胞实验通量也一般较低。由于溶液的高效扩散混和使得宽的浓度梯度很难获得，而形成特定的浓度梯度在很多生物和化学研究过程中具有极其重要的作用。实用新型内容[0005]本实用新型实施例提供种用于产生连续浓度梯度和输出独立浓度的微流控芯片。[0006]一种用于产生连续浓度梯度和输出独立浓度的微流控芯片，包括二个进样微流管道，一个微流池和若干个输出独立浓度的微流管道；所述进样微流管道和输出浓度的微流管道均直接与微流池相连接。[0007]可选的，所述的微流控芯片中的微流池的横切面可以是等腰三角形；可选的，所述的二个进样微流管道直接与等腰三角形样品池的底边相连接；所述的输出浓度的微流管道直接与等腰三角形样品池的两个侧边相连接。[0008]在本实用新型提供的微流控芯片中，由于微流池的横切面是一等腰三角形且二个进样管从三角形的底部进样，增大了溶质扩散的距离，而这距离是由等腰三角形的底部至顶部逐渐减少，因而在低流速情况下也能降低混合效率，使整个微流池的两等边都维持着一定的浓度差，有效地增加浓度梯度的覆盖率。本微流控芯片的微流池两侧边与输出独立浓度的多支管相接可进一步增加浓度梯度的覆盖率，因为一部份的水流经支管离开微流池时把一部份溶质一并带走，能增加微流池中浓度梯度与起始浓度之间的差距，是一种基于对流运输达到生成更宽的浓度梯度的设置。而传统T形微流管道只有一个既短且不变的扩散距离，在低流速下溶质仅能够在数百微米内混合，即使T形管道的下流管道长度增加也无法获得更宽的浓度梯度。[0009]本实用新型的有益效果是微流控芯片的三角形结构有利于减小扩散混和效率， 使得在低流速下也能够获得很宽的浓度梯度。微流池两侧边接上的支管能通过对流运输进一步扩宽浓度梯度。由于三角形微流池的面积有限，获得的连续性浓度梯度较难被充分利用，支管能从微流池中引出连续性浓度并混合成多个独立浓度，随着支管的延伸运输至芯片其他区域，更有效地利用生成的浓度梯度。本微流控芯片还具有制作简单、微型化、操作方便且不须依赖主动式器件产生浓度梯度等优点。[0010]本实用新型提供的微流控芯片可以与现有的用于细胞固定的微流控芯片整合，通过固定神经细胞瘤细胞，以实现高通量麻痹性贝类毒素的检测。[0011]图1是本实用新型实施例提供的微流控芯片中等腰三角形微流池及出入口的位置图；[0012]图2是本实用新型实施例提供的微流控芯片中产生的浓度梯度经过支管后形成独立浓度的实验数据；[0013]图3是在于图2相同实验条件下利用软件Fluent 6. 0生成的数学模拟图。[0014]本实用新型实施例提供一种用于产生连续浓度梯度和输出独立浓度的微流控芯片，以下进行详细说明。[0015]理论上，三角形微流管的两侧边能产生无限个连续性浓度，实际上可用的独立浓度数目则受三角形的几何尺度所限。要进一步提升独立浓度的数目可以增大等腰三角形结构和/或缩小输出微流管的宽度。本实用新型实施例以八个输出管道为例，进一步阐述本实用新型内容。[0016]请参见图1，图1所示的是微流控芯片中等腰三角形微流池及出入口的位置图微流控芯片由缓冲液入口，试剂入口及A-H八个出口组成，微流控芯片是用聚二甲基硅氧烷注塑成型。试剂入口可以输入单一或多种溶质的混合液，本实施例以荧光素与Cy5-dUTP的混合试剂液为例在二个进样口分别加入缓冲液和荧光素(IOyM)与Cy5-dUTP(10yM)的混合试剂。以共聚焦荧光显微镜观察，其中荧光素激发波长为488nm，发射滤光片选择为 505-530nm, Cy5_dUTP激发波长为633nm，发射滤光片选择为LP 650nm，并以光电倍增管拍摄记录。如图1的显微镜照片(只显示荧光素的荧光信号)所示，三角形微流管的两等边能产生浓度梯度。图1中的荧光强度与距离关系图是沿显微镜照片中两条白色虚线处读取芯片内不同且连续的浓度梯度分布情况，可见靠近混合试剂进口端的浓度最高，浓度沿三角形底端往顶端方向续渐下降，与由缓冲液端往顶端方向的浓度分布情况成镜像关系。[0017]请参阅图2，图2是芯片中产生的浓度梯度经过支管后形成独立浓度的实验数据， 图2所示为图1中连续性浓度经过支管A-H后形成的不连续独立浓度，信号读取位置处于距微流池等边Imm的各条支管下游。由支管B可见，利用不同溶质的扩散系数差异，微流池对荧光素与Cy5-dUTP的输出作出了一定程度的分馏。图3是在于图2相同实验条件下生成的数学模拟图利用Fluente. 0构建最少有300000结节的等腰三角形池及相关支管模型，4并设定三个维度方向的流速、试剂浓度、连续性参数的收敛准则为10_5。图3可证明实验和模拟结果中的分馏及浓度梯度趋势均一致。[0018] 以上对本实用新型实施例所提供的用于产生连续浓度梯度和输出独立浓度的微流控芯片进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本实用新型的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本实用新型的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本实用新型的思想，在及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本实用新型的限制。