专利名称：酒糟中可发酵性淀粉发酵测定方法白酒酒糟是酿酒工业中的主要副产品，如果酒糟不及时加以处理，就会腐败变质，不仅浪费了宝贵的资源，还会严重污染周围环境，因而充分而有效的对酒糟加以综合利用，既可以减轻环境污染，又可以节约粮食、降低成本，因此，酒糟的综合利用对我国的资源开发和环境保护具有十分重要的意义。利用酒糟再发酵生产优质白酒，通过技术手段进一步利用酒糟中的可发酵性淀粉，降低粮耗，实现资源的循环利用，节约成本。酒糟中可发酵性淀粉的定义在合适温度、PH值等的条件下，酒糟中能够被淀粉酶水解为小分子的糊精或麦芽糖，然后被糖化酶糖化为可发酵性的糖类，如葡萄糖、果糖等，最后被酵母菌充分利用，发酵产生酒精和二氧化碳，放出一定生物热量的淀粉。目前，酒糟中可发酵性淀粉含量的测定尚无国家标准、行业标准、地方标准和企业标准，所以，酒厂的酒糟都没有测定过其中的 可发酵性淀粉含量，不能够准确的评估酒糟的可利用价值。
本发明的目的就是提供一种测定结果准确，可为酒糟的综合利用提供理论依据的酒糟中可发酵性淀粉发酵测定方法。本发明的酒糟中可发酵性淀粉发酵测定方法，包括以下步骤 I、酵母活化，称取I. Og活性干酵母，加入16ml、20g/L蔗糖溶液，溶液温度38-40°C，摇勻，置于32°C恒温箱内活化I小时，备用。2、液化，每甑各取等量刚出甑的酒糟，相互混合均匀，称取酒糟样品质量m=300-500g,置于放有滤纸的抽滤漏斗内，用500ml水洗去可溶性糖类，控制压力为-0. 05MPa - -0. 06MPa，真空抽滤掉水分，将残留物移入IOOOml烧杯内，并用IOOml水洗滤纸,洗液并入烧杯内，再加入390-410ml水于烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60°C以下，加20ml、5g/L淀粉酶溶液，在55-60°C保温lh，并同时搅拌，然后取I滴此液加I滴碘溶液，若显蓝色，再加热糊化并加淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止，加热至沸，冷后移入1000 ml三角瓶中，并加水至刻度，混匀； 所述的淀粉酶为a -淀粉酶，酶活力大于或等于20000u/g。3、蒸煮，将装有已液化好酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水纸封口后，放入高压蒸汽灭菌锅，于压力0. IMPa保压lh，取出，冷却至60°C。4、糖化，用硫酸溶液调整蒸煮液pH值至4. 3-4. 6，按每克酒糟加入150u_200u糖化酶，当糖化酶活力为150000U /g，酒糟的量为500g，加入糖化酶的量为500X200 + 150000(g)=0. 67 (g)，搅匀，放入60°C恒温箱内，糖化60min，冷却至30-35。。。5、发酵，将糖化液倒入500ml碘量瓶中，于碘量瓶中加入活性干酵母活化液2.0ml，摇匀，盖塞，将碘量瓶放入40°C恒温箱内发酵65小时。6、蒸馏，用氢氧化钠溶液中和发酵醪pH值至6. 0-7.0，将发酵醪液全部倒入IOOOml蒸馏烧瓶中，用IOOml水冲洗碘量瓶，并将洗液倒入蒸馏烧瓶中，加入消泡剂I滴_2滴，进行蒸馏，用IOOml容量瓶，外加冰水浴，接收蒸馏液；当蒸馏液至约95ml时，停止蒸馏，取下，待温度平衡至室温后，定容至100ml。7、测量酒精度，将定容后的馏出液全部倒入干燥的IOOml量筒中，静置，待液中气泡消失后，放入精密酒精计，静置后，水平观测与弯月面相切处的刻度示值，同时插入温度计记录温度，根据测得的温度和酒精示值，换算成20°C时的酒精度A。8、计算，酒糟中可发酵性淀粉含 量X= (1.76 * A1Vm * 100，其数值以％表示， X--IOOg酒糟中可发酵性淀粉的含量，单位为克； I. 76--淀粉转化成酒精的换算系数；
A1与馏出液在20°C时的酒精度A相对应的酒精质量百分比，单位为％ (w/w),查附表根据A可得A1 ；
m-称取酒糟的质量，单位为克。上述步骤中，除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯。酒糟从取样到液化的时间控制在2小时之内完成。糖化酶酶活力大于或等于50，000u/g。所述碘溶液称取3. 6 g碘化钾溶于20ml水中，加入I. 3 g碘，溶解后加水定容至 100mlo本发明的酒糟中可发酵性淀粉发酵测定方法，试样经去除可溶性糖后，淀粉用淀粉酶水解成糊精和小分子双糖，再用糖化酶糖化成可发酵性的单糖，经酵母发酵，将发酵醪进行蒸馏，测量馏出液的酒精度，最后换算成可发酵性淀粉含量，该方法测定结果准确，通过测定酒糟中的可发酵性淀粉，为酒糟的综合利用提供理论依据。

I、酵母活化称取I. Og耐高温活性干酵母(安琪酵母股份有限公司生产)，加入16ml、20g/L蔗糖溶液，溶液温度38-40°C，摇匀，置于32°C恒温箱内活化I小时，备用。2、称取酒糟300g，置于放有滤纸的抽滤漏斗内，用500ml水冲洗酒糟样品，控制压力为-0. 05MPa - -0. 06MPa，真空抽滤掉水分，将残留物移入IOOOml烧杯内，并用IOOml水洗滤纸,洗液并入烧杯内，再加入400 ml水于烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15 min，使淀粉糊化，冷却至60°C以下，加20ml、5g/L淀粉酶溶液，在55°C _60°C保温lh，并同时搅拌，然后取I滴此液加I滴碘溶液，若显蓝色，再加热糊化并加淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止，300g酒糟的用淀粉酶溶液300ml，加热至沸，冷后移入IOOOml三角瓶中，并加水至刻度。3、蒸煮，将装有已液化好酒糟糊的三角瓶用棉塞和防水纸封口后，放入高压蒸汽灭菌锅，于压力0. IMPa保压lh，取出，冷却至60°C。4、糖化，用10%的硫酸溶液调整蒸煮液pH值至4. 5-4. 6，加入糖化酶量0. 6g，搅勻，放入60°C恒温箱内，糖化60min，冷却至35°C。5、发酵，将糖化液倒入IOOOml碘量瓶中，于碘量瓶中加入耐高温活性干酵母活化液2. Oml，摇匀，盖塞，将碘量瓶放入40°C恒温箱内发酵65小时。6、蒸馏，用4 mol/L的氢氧化钠溶液中和发酵醪pH值至6. 5，将发酵醪液全部倒A IOOOml蒸馏烧瓶中，用IOOml水多次冲先碘量瓶，并将洗液倒入蒸馏烧瓶中，加入食用油1-2滴，进行蒸馏，用IOOml容量瓶，外加冰水浴，接收蒸馏液；当蒸馏液至约95ml时，停止蒸馏，取下；待温度平衡至室温后，定容至100ml。(7)、测量酒精度，将定容后的馏出液全部倒入洁净、干燥的IOOml量筒中，静置数分钟，待液中气泡消失后，放入洗净、擦干的精密酒精计，静置后，水平观测与弯月面相切处的刻度示值，同时插入温度计记录温度；根据测得的温度和酒精示值，换算成20°C时的酒精度A。这里A=4. 5，查表A1=3. 5813。


一种酒糟中可发酵性淀粉发酵测定方法是，试样经去除可溶性糖后，淀粉用淀粉酶水解成糊精和小分子双糖，再用糖化酶糖化成可发酵性的单糖，经酵母发酵，将发酵醪进行蒸馏，测量馏出液的酒精度，最后换算成可发酵性淀粉含量，该方法测定结果准确，通过测定酒糟中的可发酵性淀粉，为酒糟的综合利用提供理论依据。