专利名称：用于抗衰老的中药制剂及其制备方法中医理论认为“人秉天地之气而生”，“先天之精藏于肾，肾为先天之本”，肾所藏的精气包括“先天之精”和“后天之精”，人体生、长、壮、老、已的生命过程，与肾中精气盛衰密切相关，人到老年，肾中精气逐渐衰减，人体就逐渐衰老，所以出现牙齿动摇，头发斑白，耳聋失聪，面憔无华。“肾主骨生精”，“肾在体合骨、主骨生髓”，“肾气足则髓有所生，骨有所养”。肾中精气足则身体健壮，筋骨坚强，肾精不足则腰膝冷痛、筋骨无力、麻木拘挛；肾阳对机体各组织器官起着温煦、推动、兴奋和气化作用。肾阳不足及肾气不固所以出现阳痿遗精，滑精早泄，尿后余沥，小便频数而清。因此，人的生、长、壮、老、已与肾密切相关，肾阳不足可直接加快人的衰老。目前市场上用于抗衰老的药物、饮品或保健品众多，其中有些也用到了补骨脂、淫羊藿和杜仲，但这些药物、饮品或保健品的配方所包含的药味众多，少者二十几种，多者六七十种，如申请号为93114247.4、200410069137.9、93111148.X、200510002377.1、96115459.4的专利申请和专利号为97107618.9的专利。所用的中药材过多，其成本较高，难以满足工业化生产的需求。因此提供一种效果好、安全无副作用且组方简单，利于工业化生产的抗衰老药物显得非常必要。
本发明的目的在于提供一种用于抗衰老的中药制剂及其制备方法，该制剂具有补肾壮阳、强筋健骨、强身延年的功效，用于肾阳不足引起的牙齿动摇，头发斑白，耳聋失聪，面憔无华，筋骨无力，腰膝冷痛，麻木拘挛，阳痿遗精，滑精早泄，尿后余沥，小便频数而清等症状，其疗效确切，生物利用度高，无毒副作用。本发明是这样构成的它由补骨脂40～60g、淫羊藿40～120g、杜仲20～40g、橄榄油400～600ml和适量辅料制成。具体的说，它由补骨脂50g、淫羊藿50g、杜仲30g、橄榄油500ml、明胶80g、甘油20g和水100g制成软胶囊。或者由补骨脂50g、淫羊藿100g、杜仲30g、橄榄油500ml和聚乙二醇6000 700g制成滴丸剂。本发明中药制剂的制备方法为取淫羊藿、杜仲洗涤，切制成长1～3cm的小段，补骨脂粗碎，用橄榄油在室温下浸泡48小时，再置95～100℃沸水浴中加热提取3小时，药渣挤干，滤过，收得药液300ml，备用；然后加入适量辅料制成不同的制剂。
软胶囊这样制备(1)明胶液的制备取明胶加适量水使其膨胀，将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70～80℃，混合均匀后加入膨胀的明胶搅拌，溶化，保温1～2小时，静置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洁净纱布滤过，保温待用；(2)制丸将制好的明胶液转移至明胶液贮槽中控温在60℃左右；将备用药液移入药液贮槽内，以10～15℃的液状石蜡为冷却液，室温控制在20±2℃，滴头温度控制在40～50℃，滴制成丸；(3)整丸、干燥将收集的胶丸先均匀地摊于纱布上，在10℃以下低温风干4小时以上，再置擦丸机擦去表面的液状石蜡，然后再在10℃以下低温风干20小时以上取出；用乙醇∶丙酮＝1∶5的混合液或石油醚洗去胶丸表面的油层后吹干洗液，40～50℃条件下干燥，选丸，用95％乙醇洗涤，再在40～50℃条件下干燥，包装即得。
软胶囊也可以这样制备(1)明胶液的制备取明胶加适量水使其膨胀，将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70～80℃，混合均匀后加入膨胀的明胶搅拌，溶化，保温1～2小时，静置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洁净纱布滤过，保温待用；(2)制胶片将明胶液涂布于平坦的钢板表面，使厚薄均匀，然后在90℃条件下加热，使表面水分蒸发，即得韧性适宜的具有一定弹性的软胶片；(3)压制胶丸先将压制丸模钢板两面适当加温，然后取软胶片一块，表面均匀涂上润滑油，将涂油面朝下板铺平，取备用药液于软胶片上涂匀，另取一块软胶片铺在药液上面，在胶片上面均匀涂上润滑油，然后将上板对准胶片盖上，置于油压机上加压，上模板与下模板完全接合后启板，及时取出软胶丸，干燥，用乙醇洗除表面的油污，再置石灰干燥箱中干燥，包装，即得。
滴丸剂这样制备取聚乙二醇6000置铝锅中，水浴加热至90～100℃，待全部熔融后，加入备用药液，混匀，转移到贮液瓶中密闭并保持80～90℃，用内径为3.3mm，外径为5.1mm滴管，以60～70滴/分钟的速度滴制，以10～15℃的甲基硅油为冷却剂，收集滴丸，沥干甲基硅油，选丸，包装即得。
本发明方解方中淫羊藿又名仙灵脾，为主药。辛、甘、温。归肾、大肠经。主要成份为淫羊藿苷，并含有甾醇、多糖、生物碱、挥发油、维生素E等。此外尚含有柔质、脂肪酸等，属补肾阳药物，根据《本草纲目》的记载，仙灵脾有“益气力，强志，坚筋骨，皆元阳振作之功”的作用；《本草备要》称“补命门、益精气、坚筋骨、利小便”。《本草新编》谓其“却老景昏耄，除中年健忘，益肾固筋，增力强志”。现代医学表明淫羊藿能促进阳虚动物的核酸、蛋白合成，具有雄性激素样作用，并可催淫，兴奋性欲；还能镇咳、祛痰平喘；改善心功能，镇静、降压、降血糖、降血脂；亦可抗炎、抗病原微生物，抗惊劂等。本方中淫羊藿起促进免疫功能，抗衰老的作用。补骨脂苦、辛、温。归肾、脾经，主要成分为补骨脂素、异补骨脂素，并含挥发油，黄酮类成份及单萜酚类、树脂、豆甾醇类成份。辛以润肾，温以助阳，为补肾阳，兴阳道、固精气之常用药。《药性论》“主男子腰疼，膝冷囊湿，逐诸冷痹顽，止小便利、腹中冷”。现代医学表明补骨脂可治疗白细胞减少症，慢性支气管炎，慢性原发性血小板减少性紫癜，子宫出血，以及在外科中的应用(湿疹、外阴白斑、阴道滴虫等)。杜仲甘、温，归肝、肾经。药力颇强，成份含松脂醇二-β-D葡萄糖苷，京平尼苷、桃叶珊瑚苷，β-谷甾醇，白桦脂醇等。功善温补肝肾而强筋健骨、安胎，既为治肾虚腰膝酸痛或筋骨无力之要药，又为治肝肾亏虚胎漏或胎动之品，此外还有降血压、抗衰老的作用。《本经》“主腰脊痛，补中，益精气，坚筋骨、强志、除阴下痒湿，小便余沥”。现代医学表明杜仲可促进人体的皮肤、骨路、肌肉中的胶原蛋白的合成与分解，具有促进新陈代谢、防止衰退、增强机体免疫机能、清除自由基、滋补强壮、降低血压、抗肿瘤等多方面的药理功能。橄榄油含有的抗氧化剂，能防止脑衰老，并能延年益寿。它含有多种人体所需的营养成分，不含香精和化学物质，其脂肪酸和多种天然脂溶性维生素对滋养肌肤十分有利。以上四味共奏补肾壮阳、强筋健骨、强身延年之功，通过补肾阳从而达到抗衰老的作用。
本发明的功能主治补肾壮阳、强筋健骨、强身延年。用于肾阳不足引起的牙齿动摇，头发斑白，耳聋失聪，面憔无华，筋骨无力，腰膝冷痛，麻木拘挛，阳痿遗精，滑精早泄，尿后余沥，小便频数而清等症状。
与现有技术相比，本发明制剂具有补肾壮阳、强筋健骨、强身延年的功能，用于肾阳不足引起的牙齿动摇，头发斑白，耳聋失聪，面憔无华，筋骨无力，腰膝冷痛，麻木拘挛，阳痿遗精，滑精早泄，尿后余沥，小便频数而清等症状，其疗效确切，生物利用度高，无毒副作用，且质量稳定可控，服用、携带方便。
为了确保本发明制剂具有良好的治疗效果，申请人进行了一系列试验研究，具体如下一、工艺研究申请人对制备工艺中的浸渍时间、提取时间、提取温度三个因素进行了考察，每个因素确定三水平，表头设计如下


试验安排及结果分析表

试验结果及分析

方差分析表

结果分析最优工艺组否为A3B3C1D3，即加7倍量橄榄油浸渍48小时，于100℃水浴中浸提3小时，滤过。
二、药效学试验本发明制剂具有如下药理作用(一)给予小鼠注射本发明药材提取液30-50mg，其性激素样活力与8.2μg睾丸素相当，给予小鼠灌服本发明药材提取液0.5ml/只，连续10日，能显著增加血浆睾丸酮的含量及睾丸、提肛肌的重量，具有明显的促进性机能作用。
(二)采用卵巢切除的方法建立原发性骨质疏松症的动物模型，观察本发明对去势大鼠骨组织光镜、电镜及骨组织形态计量学等指标的影响。结果表明，应用本发明治疗以后，模型大鼠的骨组织形态学发生明显改变，单位面积内骨小梁的体积增加，骨小梁宽度增加，但骨小梁之间的间距并不减少，在光镜和电镜下可以观察到类似改变，说明本发明可以在一定程度上改善骨质疏松大鼠的骨结构，恢复骨组织的形态，在骨质疏松症的治疗中发挥作用。具体试验如下1.1实验动物及饲养 10月龄健康雌性SD大鼠36只，体重350±20g。各组大鼠分笼饲养，自由摄取标准大鼠饲料，自由饮用蒸馏水，室温22±2℃。
1.2动物分组与处理 将实验大鼠随机分为4组，氯胺酮腹腔麻醉，采用背侧切口，无菌条件下切开皮肤、皮下组织，摘除双侧卵巢。假切除组只切除一小块腹腔脂肪组织。手术后，每只每天给予注射用青霉素钠盐5万单位，肌肉注射3天。术后3个月进行药物治疗，假切除组和模型组均给予生理盐水口服，倍美力组和本发明组按照体表面积法折算人等效剂量口服。各组大鼠服药3个月后处死，进行各项指标检测。
1.3光镜观察 大鼠处死以后，每组取3个右侧胫骨，去除附着的软组织，立即放入10％福尔马林中固定24小时，脱钙，石蜡包埋，在YL3回转式切片机(上海仪表厂生产)上切片，沿胫骨矢状面切成10μm厚度切片，HE染色，在Olympus光镜下观察骨小梁的形态结构。
1.4扫描电镜观察 大鼠处死后每组取3个第1腰椎标本，去除附着软组织，置于2％的戊二醛溶液中固定24小时，8％的中性EDTA脱钙7天，10％次氯酸钠溶液浸泡8小时，1％四氯化锇溶液固定2小时，乙醇逐级脱水，醋酸异戊酯保存12小时，二氧化碳临界点干燥、真空喷金，在JMS-840扫描电镜上观察骨小梁的形态结构。
1.5骨组织形态计量学研究 大鼠处死后取左侧胫骨，去除附着的软组织，立即放入Millonig’s液体中固定24小时。乙醇逐级脱水，每次24小时，最后二甲苯透吸4小时，甲基丙烯酸甲酯包埋。在Polycnt-s型硬组织切片机上沿胫骨矢状面切10μm厚度切片。切片做甲苯胺蓝染色，参照Parfitt等人〔3〕骨小梁参数计量方法，借助VIDAS图象分析系统进行测量，参数包括骨小梁的体积(total bone volume，TBV)、骨小梁的宽度(bone trabeculathickness，Th.T)、骨小梁的间隙(bone trabecula separation，Th.S)。
1.6统计学处理 各组大鼠所有观察结果均以均数±标准差(±s)表示，两组均数之间比较采用t检验。
2.结果2.1光镜观察结果 光镜观察结果显示假切除组骨小梁排列密集，互相连接成网状结构，骨小梁的厚度大，其间距小；切除卵巢以后大鼠骨小梁明显稀少，同样倍数下骨小梁的连接中断点多，骨小梁明显变细，间距加宽，甚至在部分区域出现较大的空白区域。应用本发明制剂治疗以后，骨小梁排列密集，之间的连接明显增加，厚度增宽，间隙变窄，三维结构恢复，与假切除组、倍美力组的表现类似。
2.2扫描电镜观察结果 扫描电镜观察结果显示假切除组骨小梁排列以纵向为主，并有横向骨小梁连接，构成立体网状，骨小梁间距小；切除卵巢后大鼠骨小梁明显变细，且排列稀疏，骨小梁之间的间隙增宽，部分区域的骨小梁出现断裂，残端游离，连接中断，三维结构破坏，并出现骨小梁的空缺区域。本发明制剂治疗后，可以见到不同程度的改善，骨小梁排列较密集，其间的连接明显增多，空间结构得到恢复。
2.3骨形态计量学结果 骨形态计量学观察显示切除卵巢以后，单位体积内骨小梁减少，厚度变窄，间距加宽，与假切除组比较有显着性差异；应用本发明制剂治疗以后，单位体积内的骨小梁量明显增加，厚度明显加宽，与假切除组和倍美力组比较无差异；但骨小梁之间的间距并未变窄，与切卵巢组比较无统计学差异。
骨形态计量学结果

注*与切卵巢组比较P＜0.05，有显著性差异；#与假切除组比较P＜0.05，有显著性差异；△与假切除组比较P＞0.05，无统计学差异。
3.讨论骨质疏松症(osteoporosis)的概念于1885年由Pommer首先提出，其意为骨质减少的一种疾病。1948年，lbright认为这种病是由于雌激素减少，导致骨小梁形成减少、蛋白质代谢异常的一种疾病。早期对骨质疏松症的认识仅限于骨量的丢失，在治疗上强调提高骨量。随着检测手段的进步和认识的深入，对骨质疏松症的概念的研究开始扩展到骨结构上，强调恢复骨结构的重要性，因此1994年WHO组织对骨质疏松症的概念进行重新定义，指出“骨质疏松症是以骨组织的量减少，骨的显微结构退化，导致骨的脆性增加，易于骨折的一类疾病”。决定骨折的主要因素为骨骼强度，我们的另一项研究表明，骨量与骨骼强度的改变并不平行，从20岁到80岁椎体骨密度约减少50％，而垂直压缩强度却只减少到20岁的25％，水平压缩强度减少到只有5％。现代临床通过对骨量在正常范围内而发生髋部骨折的患者进行骨结构的观察，发现其骨小梁发生明显的结构改变，从而指出由于骨结构的退化所引起的骨折危险性的增加要高于由骨量减低所引起的骨折危险性。
卵巢切除以后，由于雌激素水平迅速下降，破骨细胞功能活跃，骨吸收增加，而由成骨细胞形成的新骨数量难以弥补破骨细胞所形成的骨陷窝。同时，在骨转换过程中存在着短暂的骨丢失，雌激素水平降低引起的高转换状态不仅加速负平衡引起的骨丢失，同时也增加了暂时的骨丢失，从而造成骨结构上明显的改变。在静力学参数上表现为骨小梁体积减少，骨小梁厚度变窄，间隙增加；在光镜、电镜下出现三维结构的变化为小梁之间的连接减少，游离末端增加，甚至出现空隙，导致难以修复的损伤。
中医药治疗骨质疏松症多以补肾为主要治疗原则，“肾主骨”，补肾即是强骨。本发明由淫羊藿、补骨脂等药物组成，通过发挥淫羊藿“益气力，强志，坚筋骨”，从而使“元阳振作”，单位体积内的骨小梁量增加，小梁厚度增加，结构得到一定程度的恢复。根据实验结果可以看出，骨结构的代偿有一定限度，无论是倍美力还是本发明，都只能使骨小梁的宽度增加，并不能恢复骨小梁之间较宽的间距，说明当骨质疏松严重时，即使增加骨量，也只能使骨结构得到部分恢复，而无法恢复到原来的状态。因此骨质疏松症的治疗应重视预防，在骨结构尚未发生明显退变时就应给予治疗，维护骨结构的效果要优于骨结构已明显退化、骨质疏松症严重时方给予治疗。
(三)本发明药材水提液0.50mg/ml，对大鼠心、肝、脑和肾匀浆过氧化脂质的生成有显著的抑制作用。对D-半乳糖造成的亚急性衰老模型小鼠(雄性小鼠，隔日注射4mg/kg，连续8日)，在注射D-半乳糖同时，灌胃给予本发明制剂1.7g/kg，能使衰老模型小鼠T和B淋巴细胞增殖反应功能显著增强，并明显提高小鼠肝脏总SOD的活性、减少肝组织过氧化脂质的形成，减少心、肝等组织的脂竭素形成，但对脑的脂竭素减少不明显。
三、急性毒性试验小鼠ig给药最大耐受量28.8g/kg.d，相当于60公斤成人临床一日用量的576倍，表明本发明制剂临床使用是安全的。
四、长期毒性试验经大鼠灌胃给药0.45、2.25g/kg两组喂养三个月后检测血液学、肝肾功能及组织病理镜检等均在正常范围内，表明本发明制剂口服三个月安全无毒，提示本发明在临床推荐用量下是安全的。

(2)明胶液的制备取明胶加适量水使其膨胀，将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70～80℃，混合均匀后加入膨胀的明胶搅拌，溶化，保温1～2小时，静置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洁净纱布滤过，保温待用。
(3)制丸将制好的明胶液转移至明胶液贮槽中控温在60℃左右；将备用药液移入药液贮槽内，以10～15℃的液状石蜡为冷却液，室温控制在20±2℃，滴头温度控制在40～50℃；在滴制前先调整好胶皮的厚薄均匀度和重量，使之符合标准后开始滴制。
(4)整丸、干燥将收集的胶丸先均匀地摊于纱布上，在10℃以下低温风干4小时以上，再置擦丸机擦去表面的液状石蜡，然后再在10℃以下低温风干20小时以上取出；用乙醇∶丙酮＝1∶5的混合液或石油醚洗去胶丸表面的油层后吹干洗液，40～50℃条件下干燥，干燥后的胶丸经选丸除去不合格的丸粒，用95％乙醇洗涤，再在40～50℃条件下干燥，包装即得软胶囊1000丸，0.5g/丸。本制剂口服，一次2～3粒，一日3次。
本发明的实施例2补骨脂50g、淫羊藿100g、杜仲30g、橄榄油500ml、聚乙二醇6000700g(1)药液的制备取淫羊藿、杜仲洗涤，切制成长1～3cm的小段，补骨脂粗碎，用橄榄油在室温条件下浸泡48小时，再置沸水中水浴加热(95～100℃)提取3小时，药渣挤干，滤过，收得药液300ml，备用。
(2)滴制取聚乙二醇6000(PEG6000)置铝锅中，水浴加热至90～100℃，待全部熔融后，加入备用药液，混匀，转移到贮液瓶中密闭并保持80～90℃，用内径为3.3mm，外径为5.1mm滴管，以60～70滴/分钟的速度滴制，以10～15℃的甲基硅油为冷却剂，收集成型的滴丸，沥干甲基硅油，选丸，规格为48～52mg/丸，包装即得滴丸剂20000丸。本制剂口服，一次6～8丸，一日3次。
本发明的实施例3补骨脂40g、淫羊藿40g、杜仲20g、橄榄油400ml、明胶80g、甘油20g、水100g(1)药液的制备取淫羊藿、杜仲洗涤，切制成长1～3cm的小段，补骨脂粗碎，用橄榄油在室温条件下浸泡48小时，再置沸水中水浴加热(95～100℃)提取3小时，药渣挤干，滤过，收得药液300ml，备用。
(2)明胶液的制备取明胶加适量水使其膨胀，将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70～80℃，混合均匀后加入膨胀的明胶搅拌，溶化，保温1～2小时，静置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洁净纱布滤过，保温待用。
(3)制胶片将制得的明胶液涂布于平坦的钢板表面，使厚薄均匀，然后在90？条件下加热，使表面水分蒸发，即得韧性适宜的具有一定弹性的软胶片。
(4)压制胶丸制备前，先将压制丸模钢板两面适当加温，然后取软胶片一块，表面均匀涂上润滑油，将涂油面朝下板铺平，取计算量的药液于软胶片上涂匀，另取一块软胶片铺在药液上面，在胶片上面均匀涂上润滑油，然后将上板对准胶片盖上，置于油压机上加压，压制好后启板，及时取出软胶丸，剔除废品后干燥，用乙醇洗除表面的油污，再置石灰干燥箱中干燥，包装，即得软胶囊。
本发明的实施例4补骨脂60g、淫羊藿120g、杜仲40g、橄榄油600ml、聚乙二醇6000700g(1)药液的制备取淫羊藿、杜仲洗涤，切制成长1～3cm的小段，补骨脂粗碎，用橄榄油在室温条件下浸泡48小时，再置沸水中水浴加热(95～100℃)提取3小时，药渣挤干，滤过，收得药液300ml，备用。
(2)滴制取聚乙二醇6000(PEG6000)置铝锅中，水浴加热至90～100℃，待全部熔融后，加入备用药液，混匀，转移到贮液瓶中密闭并保持80～90℃，用内径为3.3mm，外径为5.1mm滴管，以60～70滴/分钟的速度滴制，以10～15℃的甲基硅油为冷却剂，收集成型的滴丸，沥干甲基硅油，选丸，规格为48～52mg/丸，包装即得滴丸剂。


本发明提供了一种用于抗衰老的中药制剂及其制备方法，它由补骨脂40～60g、淫羊藿40～120g、杜仲20～40g、橄榄油400～600ml和适量辅料制成。与现有技术相比，本发明制剂具有补肾壮阳、强筋健骨、强身延年的功能，用于肾阳不足引起的牙齿动摇，头发斑白，耳聋失聪，面憔无华，筋骨无力，腰膝冷痛，麻木拘挛，阳痿遗精，滑精早泄，尿后余沥，小便频数而清等症状，其疗效确切，生物利用度高，无毒副作用，且质量稳定可控，服用、携带方便。