专利名称：双孢菇液体菌种配方及其制备方法食用菌是人们所喜欢的营养价值高的食品，近年来食用菌人工栽培技术有很大的发展。食用菌中有杏鲍菇、香菇、双孢菇等。其中，双孢菇肉质肥美、口味鲜美、口感厚实，广受人们的青睐。而在培育双孢菇的过程中，会涉及到很多环节，其中双孢菇的菌丝培养是双孢燕培养的一个重要环节之一。在双孢菇的生产过程中，双孢菇生产所用的菌种有固体菌种和液体菌种，液体菌种相对固体菌种具有培养时间短、发菌快、生物转化率高、菌种纯度高等优势，且更便于规模化、连续生产，是食用菌产业工厂化法杖技术革新的趋势。但是，目前双孢菇的液体菌种培养基存在制备成功率低、菌丝生长不适应，在培养后期容易出现菌丝老化退变的问题，且操作专业技术要求高，在大规模生产过程中，会直接影响到双孢菇培育的效率与其经济效应。
本发明的目的在于，提供一种双孢菇液体菌种配方，解决以上技术问题。本发明的另一目的在于，提供一种双孢菇液体菌种的制备方法，解决以上技术问题。本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现双孢菇液体菌种配方，包括原料、水溶液，其特征在于，所述原料在所述水溶液中的重量百分比如下酵母粉O. 1-1.0%、糖分I. 5-3%、磷酸二氢钾O. 05-0. 3%、硫酸镁O. 05-0. 3%、蛋白胨 O. 1-0. 5%O本发明中，采用酵母粉作为双孢菇液体菌丝生长所需的主要氮源，所述糖分作为主要的碳源，而蛋白胨则既可以作为氮源也可以作为碳源，在双孢菇液体菌丝生长过程中，可起到调节补充的作用，而磷酸二氢钾与硫酸镁的添加为双孢菇的生长提供必要的微量元素，确保双孢菇液体菌丝能得到足够丰富的养料，更具生命力、增强菌丝的抗病能力。所述糖分可以采用蔗糖，也可以采用葡萄糖或者麦芽糖，优选采用蔗糖，相对其他糖分，蔗糖更适合作为双孢菇的碳源，所述蔗糖与酵母粉之间的反应，相对葡萄糖、麦芽糖与酵母粉之间的反应更为稳定，成本更为低廉，利用效果更佳。所述水溶液中包括如下重量百分比的原料酵母粉O. 2%、蔗糖2%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 3%ο所述原料还包括马铃薯粉；所述水溶液中含有以下重量比的原料马铃薯粉0-1. 0%。所述水溶液中包括如下重量百分比的原料酵母粉O. 3%、蔗糖2. 5%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 2%、马铃薯粉O. 5%。上述组分大都来源丰富，价格低廉，便于大量使用，进行量产。且采用本发明培育出的双孢菇菌丝，菌丝体生长快速，活力强，在同样的萌发时间内菌丝密度偏高。所述水溶液中还包括以下比重的原料大豆肽O. 05-0. 5%、硫酸钙O. 01-0. 1%。适当的加入所述大豆肽作为氮源，可为所述双孢菇的生长提供足够的养料。而在双孢菇生长的过程中，需要微量的钙元素，所述硫酸钙的添加可为双孢菇的生长提供需要的营养成分。所述原料在所述水溶液中的重量百分比如下酵母粉O. 3%、蔗糖2. 5%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 2%、马铃薯粉O. 5%、大豆肽O. 2%、硫酸钙O. 03%。双孢菇液体菌种的制备方法，其特征在于，包括如下步骤I)培养基配置将原料按比例倒入水溶液中，并充分搅拌后去泡，制成培养基液体。2)培养基调整对所述培养基液体的PH值进行测试，并用PH调节剂调整所述培养基液体的PH值，使其PH值保持6. 5-7. O。3)培养基灭菌将所述培养基液体放入灭菌设备进行高温灭菌至少15分钟，然后将处于高温的所述培养基液体在无菌条件下进行以150-200rpm的搅拌速度进行搅拌。4)菌种接种将培养基液体进行冷却，使所述培养基液体的温度保持在20-25°C后，接入双孢菇菌种，将含有双孢菇菌种的培养基液体通过净化空气进行有氧培养7-10天，即可制得优质的双孢菇菌种。步骤I)中，所述原料在所述水溶液中的重量百分比如下酵母粉O. 1-1.0%、糖分I.5-3%、磷酸二氢钾 O. 05-0. 3%、硫酸镁 O. 05-0. 3%、蛋白胨 O. 1-0. 5%。步骤2 )中，所述PH调节剂可以采用磷酸氢二钾、磷酸二氢钾中的至少一种。所述PH调节剂优选采用磷酸氢二钾，所述培养基液体的原料内含有磷酸二氢钾偏于酸性，可通过加入所述磷酸氢二钾将其PH值调和为中性。步骤3)中，有氧培养时，保持所述培养室内的温度为20-23°C，并对含有所述双孢菇菌种的培养基液体进行振荡培养。有益效果采用上述技术后，本发明所培育出的双孢菇菌丝，菌丝生命力旺盛，不易衰老，发菌速度快，抗病能力强，易大规模种植。
图I为本发明制备方法的流程图。

O.1-0.5%。糖分可以采用蔗糖，也可以采用葡萄糖或者麦芽糖，优选采用蔗糖，相对其他糖分，蔗糖更适合作为双孢菇的碳源，蔗糖与酵母粉之间的反应，相对葡萄糖、麦芽糖与酵母粉之间的反应更为稳定，成本更为低廉，利用效果更佳。水溶液中包括如下重量百分比的原料酵母粉O. 2%、蔗糖2%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 3%。
原料还包括马铃薯粉0-1.0%。水溶液中包括如下重量百分比的原料酵母粉
O.2%、蔗糖2%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 3%、马铃薯粉O. 5%。上述组分组分大都来源丰富，价格低廉，便于大量使用，进行量产。且采用本发明培育出的双孢菇菌丝，菌丝体生长快速，活力强，在同样的萌发时间内菌丝密度偏高。原料还包括以下比重组分大豆肽O. 05-0. 5%、硫酸钙O. 01-0. 1%。适当的加入大豆肽作为氮源，可为双孢菇的生长提供足够的养料。而在双孢菇生长的过程中，需要微量的钙元素，硫酸钙的添加可为双孢菇的生长提供需要的营养成分。原料在所述水溶液中的重量百分比如下酵母粉O. 3%、蔗糖2. 5%、磷酸二氢钾O. 08%、硫酸镁O. 08%、蛋白胨O. 2%、马铃薯粉O. 5%、大豆肽O. 2%、硫酸钙O. 03%。
实施例I :将20g蔗糖、O. Sg硫酸镁、O. Sg磷酸二氢钾倒入1000毫升的水溶液中搅拌，直至溶解成半成品；再将3g酵母粉、5g马铃薯粉、3g蛋白胨放入半成品中，充分搅拌后去泡，制成培养基液体。对培养基液体的PH值进行测试，并用磷酸氢二钾调整培养基液体的PH值，使其PH值保持6. 5-7.0。将培养基液体放入灭菌设备进行灭菌温度为121_123°C，气压为I. 3个标准大气压的高温灭菌，高温灭菌时，至少保持15分钟的高温灭菌状态。然后将处于高温的培养基液体在无菌条件下进行以150-200rpm的搅拌速度进行搅拌后，将培养基液体进行冷却，使培养基液体的温度保持在20-21. 9°C后，接入双孢菇菌种，将含有双孢菇菌种的培养基液体通过净化空气进行有氧培养7-10天，有氧培养时，保持培养室内的温度为20-23°C，并对含有双孢菇菌种的培养基液体进行振荡培养。实施例2 将15g蔗糖、IOg麦芽糖、O. Sg硫酸镁、O. Sg磷酸二氢钾、3g酵母粉、3g蛋白胨一起倒入倒入1000毫升的水溶液中，并用搅拌机进行充分搅拌后，进行去泡。利用PH试纸对培养基液体进行PH值测试，用磷酸氢二钾和磷酸二氢钾对培养基液体的PH值进行调试呈中性。然后将培养基液体放入灭菌设备进行高温高压灭菌30分钟，灭菌时，将灭菌的温度调至124-125 ，气压为I. 3个标准大气压。灭菌完毕后，在无菌状态下取出培养基液体并对其进行冷却至22-23. 9°C后，如上述实施例I一样进行接种并有氧培育。实施例3 将25g葡萄糖、O. 8g硫酸镁、O. 8g磷酸二氢钾、倒入1000毫升的水溶液中，并搅拌使其溶化，然后放入3g酵母粉、5g马铃薯粉、3g蛋白胨、3g大豆肽，通过搅拌机进行充分搅拌成为培养基液体，对培养基液体进行去泡。并用PH测试仪对培养基液体进行PH值测试，用盐酸和氢氧化钠对培养基液体的PH值进行调至6. 5-7. O。然后将培养基液体放入超声波灭菌装置进行消毒灭菌至少30分钟，然后对培养基液体进行降温至24-25 °C后，接入双孢菇菌种，将含有双孢菇菌种的培养基液体通过净化空气进行有氧培养7-10天，有氧培养时，保持培养室内的温度为20-23°C，并对含有双孢菇菌种的培养基液体进行振荡培养。以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。


本发明涉及一种生物工程领域，特别涉及一种培养基及其制备方法。双孢菇液体菌种配方，包括原料、水溶液，水溶液内含有原料，水溶液中原料包括以下重量比的组分酵母粉0.1-1.0%、糖分1.5-3%、磷酸二氢钾0.05-0.3%、硫酸镁0.05-0.3%、蛋白胨0.1-0.5%。双孢菇液体菌种的制备方法，包括如下步骤培养基配置、培养基调整、培养基灭菌、菌丝接种。采用上述技术后，本发明所培育出的双孢菇菌丝，菌丝生命力旺盛，不易衰老，发菌速度快，抗病能力强，易大规模种植。