专利名称：一种菌种保存方法实验室和工厂菌种室对菌种常用的保藏法是斜面低温保藏法，即将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2-8°C的冰箱中保藏，其优点是操作简单，使用方便，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等；但是其缺点是容易变异，因为培养基与菌种同时处在2-8°C保存条件下，菌种仍会缓慢利用培养基残留成分而缓慢生长，影响微生物的性状；同时因菌种屡次传代会使微生物的代谢改变，进而影响微生物的性状；贮存空间大，器皿保管困难；污染杂菌的机会较多
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种菌种保存方法，该方法能实现菌种无需屡次传代，保证菌种性状稳定，不易变异；并能够缩小贮存空间，确保菌种保存环境安全可靠；减少或避免杂菌污染。有利于提高生产效率和质量。为达到上述目的，本发明所提出的技术方案为一种菌种保存方法，其特征在于包括如下步骤步骤I :将固体斜面培养基上生长成熟的菌种中灭菌洗脱液洗脱制成菌悬液； 步骤2 :过滤菌悬液去除培养基； 步骤3 :过滤后的菌悬液进行冷冻管分装； 步骤4 :将分装后装有菌悬液的菌种置于_75°C—-86°C下超低温保存。进一步，所述的灭菌洗脱液为灭菌甘油。进一步，步骤2中所述的过滤为采用双层无菌纱布过滤。优选的，所述的灭菌甘油为质量分数为10-30%的灭菌甘油。进一步，所述的冷冻管体积为l_60mL。优选的，所述的冷冻管为PV材质。采用上述技术方案，本发明所述的菌种保存方法，具有显著优点如下一是采用该发明保存方法，去除了培养基，避免了菌种在保存期内有生长的营养条件，稳定了菌种的性状；二是采用该发明保存方法，对菌种采用了 10-30%的灭菌甘油作为保护剂保护，在确保菌种在保存期内的存活稳定性同时也确保了菌种的性状；三是采用该发明保存方法，大大缩小了菌种的贮存空间，同时因其采用PV材质冷冻管保存，不易造成破碎，使菌种保存安全可靠；四是采用该发明保存方法实现了每支分装菌种的一次性使用，减少或避免发生杂菌污染尤其是交叉污染。，对本发明做进一步说明。
一种菌种保存方法，包括如下步骤
步骤I :将固体斜面培养基上生长成熟的菌种中灭菌洗脱液洗脱制成菌悬液；
步骤2 :过滤菌悬液去除培养基，过滤采用双层无菌纱布过滤；
步骤3 :过滤后的菌悬液进行l-60ml冷冻管分装；
步骤4 :将分装后装有菌悬液的菌种置于_75°C—-86°C下超低温保存。进一步，所述的灭菌洗脱液为灭菌甘油，优选的，所述的灭菌甘油为质量分数为10-30%的灭菌甘油。进一步，所述的冷冻管体积为l_60mL，优选的，所述的冷冻管为PV材质。上述菌种保存方法可以应用于如金霉素、盐霉素、枯草芽胞杆菌、大肠埃希氏菌、 金黄色葡萄球菌、滕黄微球菌、黑曲霉、白色念珠菌等几乎所有菌类均可采用此种保存方法。如金霉素采用此种菌种保存方法对其主菌种和工作菌种进行保存，主菌种在10年的保存期内及工作菌种在180天的保存期内能达到保持性状稳定、生产水平稳定的效果。尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。


本发明公开了一种菌种保存方法，其特征在于包括如下步骤步骤1将固体斜面培养基上生长成熟的菌种中灭菌洗脱液洗脱制成菌悬液；步骤2过滤菌悬液去除培养基；步骤3过滤后的菌悬液进行冷冻管分装；步骤4将分装后装有菌悬液的菌种置于-75℃～-86℃下超低温保存。采用上述技术方案，本发明所述的菌种保存方法，具有显著优点如下该方法能实现菌种无需屡次传代，保证菌种性状稳定，不易变异；并能够缩小贮存空间，确保菌种保存环境安全可靠；减少或避免杂菌污染。有利于提高生产效率和质量。