专利名称：通过吸入法送递联苯胺前列腺素的方法已知联苯胺前列腺素可用于治疗许多疾病。美国专利No.5,153,222描述了优选的联苯胺前列腺素在治疗肺动脉高压症(包括原发性和继发性肺动脉高压症)的用途。具体说，该专利讨论了化合物9-脱氧-2′，9-α-亚甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-间亚苯基)-13，14-二氢-前列腺素F1(也称为UT-15)的用途。 但该专利没有特别提出通过吸入法给予这种联苯胺前列腺素或吸入法送递它们所产生的令人惊奇的好处。美国专利No.4,306,075描述了一大类碳环(carbacyclin)模拟物，包括联苯胺(benzidene)前列腺素，其能产生各种药理反应如抑制血小板凝聚、减少胃液分泌和支气管扩张，指出该化合物可用作抗血栓形成药、抗高血压药、抗溃疡药和抗哮喘药。该专利提及吸入法给药。该专利具体在实施例33中公开了化合物UT-15。但该专利仅提供了与这些化合物使用相关的有限生物学数据。在实施例31的第59栏，该专利公开了与实施例33的化合物(UT-15)结构类似的一种化合物，但不是同一个化合物。实施例31公开了(第59栏，第41-45行)“以1mg/kg剂量口服给予大鼠化合物[sic]9-脱氧-2′，9α-亚甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-间亚苯基)-PGF1甲酯，降低血压44mmHg。52分钟后，血压依旧下降14mm”。所有血液经肺循环顺序通过肺，补充氧气，然后经体循环再将氧气分送到身体的其他部分。这两种循环的流量在正常情况下是相同的，但肺循环所产生的阻力通常比体循环产生的小得多。当肺血流阻力增加时，该循环中的压力大于任何血流。这称为肺动脉高压症。通常，肺动脉高压症是通过观察到压力超过居住在同一高度和从事类似活动的大多数人所适合的正常范围而确定的。肺动脉高压症最常见的表现是阻力明显增加(可解释的)，如由肺栓塞导致的血流梗塞、心瓣膜或心肌处理通过肺以后血液的机能失调、对肺换气不足和低充氧的反射性反应而导致的肺血管管径变细、或血管容量和基本血流的不相配(如先天性异常或手术切除肺组织导致的血流分流)。这种肺动脉高压症称为继发性高血压症。但还存在一些肺动脉高压症病例，其阻力增加的原因尚不能得到解释。将它们称为原发性肺动脉高压症(PPH)，系通过排除导致继发性肺动脉高压症后而作出的诊断。除了各种病因可能性外，原发性肺动脉高压症往往包括一种公认的疾病。虽然可发生在小孩和50岁以上的患者，但约65％是女性而年轻人最常患该病。从诊断之日计算的预期寿命短暂，约为3-5年，虽然偶尔有自发性缓解和较长存活的报道，这应根据诊断方法来预测。然而通常由于昏厥和右心衰竭的进程不可改变，死亡常常相当突然。肺动脉高压症指肺动脉压(PAP)升高超过正常水平的相关疾病。对人而言，一般平均PAP约为12-15mm Hg。另一方面肺动脉高压症的标志是有时PAP比正常水平高至少5-10mm Hg。已报道过高于正常水平50-100mm Hg的PAP读数。当PAP明显增加时，血浆将从毛细管溢出进入肺间质和肺泡。肺中液体堆积(肺水肿)，可造成肺功能的相关降低，有时是致死性的。肺动脉高压症可以是急性的或慢性的。急性肺动脉高压症是一种可逆的现象通常归因于肺血管平滑肌的收缩，这可能由疾病如缺氧(如高原病)、酸中毒、炎症或肺栓塞引发。慢性肺动脉高压症的特征是肺脉管系统的主要结构变化，导致肺血管横截面面积减少。这可能是由例如慢性缺氧、血栓栓塞、或未知的原因(自发性或原发性肺动脉高压)所致。肺动脉高压症影响到几种威胁生命的临床疾病，如成人呼吸窘迫综合症(“ARDS)和新生儿持久性肺动脉高压症(“PPHN”)。Zapol等人，“急性呼吸衰竭”，第241-273页，Marcel Dekker，New York(1985)；Peckham，J.Ped.931005(1978)。PPHN(一种主要影响足月婴儿的疾病)的特征是肺血管阻力增加、肺动脉高压、以及通过未闭合的动脉导管和新生儿心脏卵圆孔血流从右到左的分流。死亡率范围为12-50％。Fox，Pediatrics 59205(1977)；Dworetz，Pediatrics 841(1989)。肺动脉高压症也可能导致潜在的致死性心脏病，称为“肺心病”或肺原性心脏病。Fishman，“肺病和紊乱”，第二版，McGraw-Hill，New York(1998)。已知可通过肠胃外给予某些前列腺素内过氧化物如前列环素(也称为flolan)来治疗肺动脉高压，这是美国专利No.4,883,812的目的。已通过吸入法给予前列环素，用来治疗肺动脉高压症。“麻醉学”，第82卷，no.6，第1315-1317页。
发明概述本发明涉及用吸入法给予需要治疗的哺乳动物治疗有效量的联苯胺前列腺素。更具体说，本发明涉及一种治疗肺动脉高压症的方法，通过用吸入法给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的联苯胺前列腺素。
与肠胃外给予联苯胺前列腺素相比，吸入联苯胺前列腺素提供了意想不到的优异效果。
附图简述

图1用U44069静脉内诱导的肺血管阻力(cmH2O*分钟/升)随时间(分钟)的变化图。
图2A-2C显示以气溶胶给予高剂量UT15对绵羊血液动力学变化的影响。具体说，图2A-2C分别显示了将气溶胶化的UT15给予绵羊(已用U44069静脉内诱导的)对体动脉压(PSA或PSYS)的影响；对肺动脉压(PPA)的影响；和对肺血管阻力(PVR)的影响。
图3显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对心率的剂量反应性影响。
图4显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对体动脉压的剂量反应性影响。
图5显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对中心静脉压的剂量反应性影响。
图6显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对肺动脉压的剂量反应性影响。
图7显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对左心房压的剂量反应性影响。
图8显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对心排血量的剂量反应性影响。
图9显示了基线条件下静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对肺血管阻力的剂量反应性影响。
图10显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对心率的剂量反应性影响。
图11显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对中心静脉压的剂量反应性影响。
图12显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对体动脉压的剂量反应性影响。
图13显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对肺血管压的剂量反应性影响。
图14显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对左心房压的剂量反应性影响。
图15显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对心排血量的剂量反应性影响。
图16显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注UT15和气溶胶UT15对肺血管阻力的剂量反应性影响。
图17显示了基线条件下静脉内灌注和气溶胶UT15对肺血管驱动压(PPA-PLA)的剂量反应性影响。
图16显示了在静脉内灌注U44069的过程中静脉内灌注和气溶胶UT15对肺血管驱动压(PPA-PLA)的剂量反应性影响。
发明详述除非特别指出，所有“一”表示至少一个。
本发明的一个实施例涉及用吸入法将联苯胺前列腺素或其药学上可接受的盐或酯送递到需要其的哺乳动物的方法。
以下是一类可按本发明的吸入法送递的优选联苯胺前列腺素或其生理可接受的盐或酸性衍生物 其中a是1-3的整数；X和Y可以是相同的或不同的，选自-O-和-CH2-；R是-(CH2)5-R1-，其中R1是氢和甲基，或R是环己基，或R是-CH(CH3)CH2C≡CCH3；点线表示一个可任选的双键。
最优选的联苯胺前列腺素是UT-15，即9-脱氧-2′，9-α-亚甲基-3-噁-4，5，6-三去甲-3，7-(1’，3’-间亚苯基)-13，14-二氢-前列腺素F1。
本文的“吸入法”送递指将活性成分或活性成分的混合物送递过呼吸道，即让需要该活性成分的哺乳动物通过哺乳动物气道(如鼻或嘴)吸入此活性成分。
用于本发明吸入法送递的气溶胶化、雾化和/或喷雾化的活性成分，包括只含有联苯胺前列腺素(如UT-15)或与其他下述活性成分混合的液体制剂。UT-15可用作游离酸或药学上可接受的盐或酯或其他酸性衍生物。另外，可以使用含有UT-15的缓释制剂，包括UT-15的PEG化的形式和/或蛋白质偶联形式。
本文使用的术语“酸性衍生物”指C1-4烷基酯和酰胺，包括其中氮被一个或二个C1-4烷基取代的酰胺。
本发明还包括UT-15的生物前体或“前体药物”，即在体内能转化成UT-15或其药理活性衍生物的化合物。
本发明另一方面涉及UT-15或其药学上可接受的盐或酸性衍生物，在制备治疗周围血管病药物中的用途。
本发明还涉及可用于制备本发明药理活性化合物的UT-15的生理上不能接受的盐。UT-15的生理上可接受的盐包括由碱衍生的盐。
碱性盐包括铵盐、碱金属盐(如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(如钙盐和镁盐)、有机碱盐(如二环己基胺和N-甲基-D-葡糖胺)、与氨基酸(精氨酸和赖氨酸)的盐。
通过与低级卤代烷(如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘)、与硫酸二烷酯、与长链卤素(如癸基、十二烷基、肉豆蔻基和硬酯酰氯、溴和碘)、和与芳烷基卤(如苄基和苯乙基溴)反应，可形成季铵盐。
任选地，在本发明的气溶胶化、雾化或气雾化制剂中还可包括一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
用喷雾器吸入法给药的优选溶液包括UT-15的无菌溶液，其包括UT-15、柠檬酸钠、柠檬酸、氢氧化钠、氯化钠和间甲酚。通过将0.125克UT-15、1.25克含水柠檬酸钠、0.125克无水柠檬酸、0.05克氢氧化钠和约250ml注射用水混合，可制备更优选的溶液。
较佳地，使用喷雾器、吸气器、雾化器或气溶胶器，从含有活性成分的溶液或液体形成微滴。较佳地微滴的直径小于10微米。一优选的喷雾器是AM-601气溶胶给药送递系统(MEDICATOR AEROSOL DELIVERY SYSTEMTM)(由Healthline Medical，Baldwin Park，CA制造的一种喷雾器)。
另外，根据本发明，还可吸入固态制剂(通常为粉末形式)。在这种情况中，颗粒直径宜小于10微米，更佳地小于5微米。
本发明还涉及将联苯胺前列腺素和/或其盐或酯通过吸入送递，其中吸入法送递适用于治疗特定的疾病。联苯胺前列腺素(包括UT-15和其盐或酯)已显示出可用于许多用途。例如，UT-15已表现出对血小板有强的抗凝聚作用，从而可特别用作哺乳动物的抗血栓形成药物。UT-15的其他已知用途包括治疗周围血管疾病(可参见共同申请No.09/190,450，本文将其全部纳入作为参考)。在用本发明的吸入联苯胺前列腺素来治疗周围血管疾病时，吸入的剂量(应考虑到一些活性成分被呼出，没有被吸收入血流)应充足到送递相当于每天输入25μg到250mg的剂量；通常为0.25μg到2.5mg，较佳地为7μg到285μg(每天每千克体重)。例如，每天每千克体重0.5μg到1.5mg的静脉内剂量，可方便地以0.5ng到1.0μg每千克体重每分钟的输液量给予。优选的剂量为10ng/kg/分钟。
按本发明用吸入法给予联苯胺前列腺素(包括UT-15和其盐或酯)以减少和控制胃液的过量分泌，从而减少或避免了肠胃溃疡的形成，并加速肠胃道中已存在的溃疡和病损的痊愈。另外，用本发明的吸入法给予的联苯胺前列腺素也可治疗充血性心力衰竭，减少与肺移植相关的炎症和/或肺动脉高压。
联苯胺前列腺素(包括UT-15和其盐或酯)还表现出对血管的舒张作用，并因此具有抗高血压的特殊用途，可治疗哺乳动物(包括人)的高血压。通过给予含有联苯胺前列腺素(包括UT-15)的药物组合物可实现抗高血压药(或低血压药)的用途。
用本发明的联苯胺前列腺素(包括UT-15)吸入法可治疗任何需要降低血压、抑制血小板聚合、减少血小板粘附特性、和/或治疗或预防哺乳动物(包括人)血栓的形成。例如，它们可用于治疗和预防心肌梗塞和治疗周围血管病，治疗和预防手术后的血栓形成、促进手术后血管移植的开放，和治疗动脉硬化并发症和动脉粥样硬化、脂血症引起的凝血缺陷等疾病和其他临床疾病(潜在的病因与脂类失平衡或高脂质血相关)。另外联苯胺前列腺素(包括UT-15和其盐或酯)还可用于促进哺乳动物(包括人)的伤口愈合。
联苯胺前列腺素(包括UT-15和其盐或酯)可作为血液、血液制品、血液代用品和其他液体的添加剂，用于人工体外循环和分离的身体部分(如肢和器官，无论是连接于原身体的、分离的和被保藏的或为移植而准备的、或连接于一新的身体上的)的灌注。在这些循环和灌注期间，聚合的血小板趋于封阻血管和循环装置部分。存在UT-15就可避免这种封阻。出于此目的，通过吸入法引入UT-15或其盐或酯，直到其在循环血液、供体动物血液或被灌注身体部分的血液中达到某种水平或这些等价物中的两个或全部达到稳定状态剂量，即0.001微克到10微克/升循环液体。另一实施例是UT-15在试验用动物(如猫、狗、兔、猴子和大鼠)的用途，目的是开发器官和肢体移植的新方法和技术。
对本发明而言，通过吸入法将“治疗有效量”的联苯胺前列腺素送递给需要其的患者。“治疗有效量”指对待治疗或预防的疾病有治疗作用的剂量。例如，“抗高血压有效量”指其作用能将肺动脉高压尤其是肺动脉压(PAP)降到正常水平(相对于高血压水平)或维持在正常水平的量。认为对于特定治疗目的有效的精确剂量当然取决于待治疗的患者的自身循环情况和患者医生所希望的效果程度。可采用滴定来确定合适的剂量。
本发明用于兽医和人药物使用的这类制剂包括活性成分、联苯胺前列腺素或其盐或酯，和一种或多种药学上可接受的载体和任选地其他治疗成分。载体必须是可“接受”，即与制剂的其他成分是相容的，且对接受者无害。
另外，制剂可方便的以单位剂量形式，且可用制药领域熟知的任何方法制备。所有方法包括将活性成分与载体结合的步骤，载体是一种或多种药学上可接受的附属成分。
本发明还涉及吸入联苯胺前列腺素来治疗肺动脉高压症的方法。“肺动脉高压症”指急性或慢性高血压症，包括原发性肺动脉高压症和继发性肺动脉高压症，该病与肺动脉血压超过正常水平相关。
通过测定与肺动脉高压症相关的血液动力学，可评估联苯胺前列腺素(如UT-15)治疗肺动脉高压症的效果。具体说，可用肺动脉压(PPA)、左心房压(PLA)、中心静脉压(PCV)、体动脉压(PSYS)、心率(HR)和心排血量(CO)的测定，来确定吸入或肠胃外送递联苯胺前列腺素的效果。
虽然可直接测定肺动脉压，且其通常用于肺动脉高压症的定量，但如公式1所示PPA受另3个变量CO、PLA和PVR的影响PPA＝(CO*PVR)+PLA (1)可从公式1看出，PLA的增加(如左心衰竭、二尖瓣狭窄、二尖瓣回流)、CO的增加(如低红细胞压积、周围血管扩张、右心房到左心房分流等)、和PVR的增加(市血管表面积减少、肺血管半径减少、肺血管梗塞等)可升高PPA。
另一方面，不能直接测得PVR，必须由以下公式2计算PVR＝(PPA-PLA)/CO (2)PVR是肺动脉高压症(PAH)的较好指数，因为如果用于治疗PAH的干预仅影响到PVR且对CO和PLA没有作用或作用极小的话，这些干预是最佳的。
用血流计脉动显示通过测定25次心跳所需的时间(秒)，确定了心率；由以下公式算得每分钟心跳(BPM)BPM＝(25心跳/t25)*60秒可用购得的转导器，如配有VALIDYNE CD19A Carrier Dmod.Amplifiers(Northridge，CA)的Model 1290A HEWLETT PACKARDTM转导器(Andover，MA)监测所有压力。可用Transonic System T101 Ultrasonic Bloodflow Meter(Ithaca，NY)测定心排血量。可在ASTROMED MT-9500 Stripchart Recorder(WestWarwick，RI)上记录压力和血流信号，用Easy Data Acquistion软件(Nashville，TN)在个人电脑上进行数字化记录。
如肺血管阻力增加所示，相对于化学诱导的减弱的肺动脉高压，已发现气溶胶化的UT-15具有更大的药效和效力。另外，与血管内给予UT-15相比，喷雾给予UT-15具有更强的效力，因为通过气溶胶送递的UT-15的实际量仅是由血管内送递的剂量的一部分(10-50％)。虽然气溶胶UT-15药效和效力较强的机理未知，但可以假设通过静脉内灌注UT-15的“第一遍”吸收低可能至少是部分原因。第一遍吸收低使大部分药物进入外周循环(包括冠状循环)，增加心率和心排血量。
在化学诱导的肺动脉高压期间，与血管内输入UT-15相比，气溶胶化的UT-15没有明显的外周作用(如对心率或心排血量)。这对那些接近右心衰竭和周围血管扩张将加剧右心负担的患者而言是特别有利的。另一方面，如果由于右心衰竭使心排血量受损，则气溶胶化的前列腺素将减少PVR，增加心排血量同时降低右心的负担。
以下提供的实施例用以说明本发明，应对本发明不构成任何限制。
实施例实施例1动物模型按如下步骤，将1.25克柠檬酸钠(含水)、0.125柠檬酸(无水)、0.05克氢氧化钠(NF/BP)、0.125克UT-15和约250ml注射用水混合，制备可吸入的溶液。
1.测量约210ml水，加到带有磁性搅拌棒的灭菌硅化玻璃烧杯中。
2.加入柠檬酸钠。混合直至溶解。
3.将柠檬酸加到步骤2的溶液中。混合直至溶解。
4.测量12.5ml水，加到无菌塑料管中。加入氢氧化钠。混合直至溶解。
5.在步骤4的溶液中加入UT-15。手工混合直至溶解。
6.将步骤5的溶液加到步骤3的溶液中，混合。
7.用盐酸和/或氢氧化钠溶液将pH调节至7.3。
8.用无菌微型过滤器将得到的最后溶液过滤到另一无菌烧杯中，然后以5ml等份将溶液分装到无菌带塞的血试管中。
9.一式两份各溶液装盒，置于-4℃ Celsius冷冻器中。
10.如上所述，制备安慰剂溶液(但不加UT-15)，将其量调至50ml。
在UT-15原液或安慰剂溶液中加入无菌盐水稀释至所需量制备工作液(取决于所需的剂量、绵羊的体重、和气溶胶化持续的时间)。然后将此溶液加到喷雾器(体积不超过5ml)至所用的全量。
对于35kg的绵羊，UT-15的剂量为250ng/kg*分钟(30分钟)，如下计算250×35×30＝262，500ng UT-15或262.5微克UT-15。喷雾速率为每分钟0.28ml，则含有262.5微克UT-15需要8.4ml溶液。但需要有一定量的溶液“残留”(残留在喷雾器中的体积)。所以制备了9ml溶液含有总量为281.25微克的UT-15(或0.5625ml原液)。
测量0.5625ml UT-15，加到8.4375ml无菌盐水中。此溶液可准确喷雾30分钟。
选择绵羊作为这些试验的动物模型出于若干原因。首先是因为绵羊温顺。它们可以在试验笼子里安静的站着，而不需要使用镇静剂(镇静剂可能使试验结果复杂化)。第二，绵羊足够大可以直接测定CO、PPA、PLA、PCV和PSYS。而且绵羊也大到足以通过气管造口术直接将气溶胶化的物质送递到肺，从而防止药物的吞咽并因此消除了UT-15给药可能的其他路径。第三，绵羊能承受大量仪器，仅有极少不适或没有不适。第四，作为肺动脉高压症动物模型，绵羊已使用许多年，因此有大量的历史资料可用于结果比较。
选择用于诱导肺动脉高压的试剂是PGH2模拟物U44069(9，11-二脱氧，9α，11α-环氧亚甲基前列腺素F2α)。使用U44069的原因，是因为其具有极强的肺血管收缩性，且它的特性与内源性形成的血栓素A2非常相似，且可将其滴定来诱导肺血管收缩性到所需程度。在使用前即刻将U44069与无菌普通盐水混合，用铝箔包裹此溶液以避光。将U44069的浓度调节至灌输到绵羊的最小流速为每分钟0.8ml。如此进行是因为更浓的U44069必须以极低的流速灌输，且由于滚动泵的输液特性往往造成U44069“脉冲”。U44069脉冲会导致血管收缩“峰”，从而诱导不稳定状态。
手术过程将6只一岁绵羊(3只雄性，3只雌性；21-37kg)饥饿18-24小时，然后用短效巴比妥酸盐(硫喷妥)作初始麻醉进行绵羊插管术。然后用氟烷气体麻醉(1.5-2.5％)进行手术。通过右侧开胸术，将Transonic(超声)血流探针置于肺主动脉周围，硅胶导管置于肺主动脉和左心房。约7天后，再麻醉绵羊，在左颈动脉插入导管，在左颈静脉插入Corids Introducer Sheath，并切开气管。在试验前让绵羊恢复3-5天。在进行基线测定(最少30分钟)后，用这些绵羊来测定肺动脉压(PPA)、左心房压(PLA)、中心静脉压(PCV)、体动脉压(PSYS)、心率(HR)和心排血量(CO)。
实施例2长时间U44069静脉内灌输对肺血管阻力的作用在4只绵羊中，测定到U44069有维持PVR稳态增加的能力。在基线30分钟后，以每千克体重每分钟1微克的速率灌注U44069，180分钟。如图1所示，由静脉内注入U44069诱导的PVR的增加很稳定，超过3小时。(在本文的图中，所示的所有数据都是平均值±SEM。“*”表示与相应的静脉内灌注UT-15的送递速率有明显差异。“#”表示与相应的基线值有明显差异。“&”表示与相应的U44069值有明显差异。)还用多重配对t-检验进行了统计分析，其不像One-way ANOVA/Dunnett检验那样严格。具体说，图1显示静脉内灌注U44069使PVR达到稳态增加30分钟，且该稳态增加至少持续180分钟。在这180分钟灌注期间，U44069还使其他变量相对于它们的基线值有明显的改变(没有显示数据)PPA增加、HR减少、CO减少。PSYS增加超过其基线值，但除U44069灌注过程的120、150和180分钟外，差异没有达到统计学差异水平。在U44069灌注过程中PCV也增加，但仅在30和60分钟时的增加有显著性。在所观察的任一时间点PLA都没有明显变化。
由于所有的U44069时间值与基线值不同，而配对t检验未测试到彼此的差异，这强烈表明在U44069灌注过程中的任何时间点都没有差异。这些数据表明UT-15引起的PVR改变是因为UT-15的作用，且未因血管收缩反应的减弱而复杂化。
实施例3以高剂量给予的气溶胶UT-15对基线血液动力学的作用在载体/盐水气溶胶化(0.28mg/分钟)过程中监测30分钟组成基线测定。基线测定后，用UT-15原液(500ng/ml)替换气溶胶送递系统中的载体/盐水溶液，以0.28ml/分钟气溶胶化90分钟。
图2仅显示了高剂量气溶胶化UT-15(每千克每分钟3800-5700ng)90分钟后，观察到的统计学变化的变量。PSYS减少了7.5％，PPA减少了约18％，和PVR减少了约19％(相对于它们各自的基线值)。
这些数据非常重要，因为这将表明与静脉内灌注UT-15不同，可以高剂量给予气溶胶化的UT-50而对肺以外的器官没有明显影响(即心率、心排血量)。在这些试验中喷雾送递的UT-15约是图16所示的最小有效测试剂量(每kg每分钟250ng)的15-27倍左右。
实施例4对照静脉内(给予)UT-15和对照气溶胶化的UT-15对基线血液动力学的剂量反应作用进行两个分开的试验来确定静脉内灌注UT-15对基线血液动力学和气溶胶化的UT-15对基线血液动力学的剂量反应作用。对灌注试验流程而言，建立基线后30分钟，以3种速率(每kg每分钟250、500和1000ng)静脉内灌注UT-15。在三只绵羊中，将这些灌注速度各持续30分钟，在另三只绵羊中灌输各持续60分钟。
气溶胶化UT-15流程包括建立30分钟基线，然后通过切开的气管以每kg体重每分钟250、500和1000微克的速度给予气溶胶化的UT-15，气溶胶化的速率为0.28ml/分钟。再次将三只绵羊喷雾灌注30分钟，另3只绵羊喷雾灌注60分钟。
在30分钟和60分钟之间以3种速度给予UT-15的送递中没有发现差异。图3显示了静脉内灌注和喷雾UT-15对心率的剂量性反应。在以每kg每分钟250、500和1000ng速度静脉内给予UT-15的过程中，心率明显增加。而喷雾UT-15对心率没有影响。以3种速率通过喷雾和静脉内灌注UT-15之间存在明显差异。
图4显示了以所用的任一给药速率，喷雾和静脉内给予UT-15对PSYS都没有明显作用。
图5显示了UT-15对PCV的影响。相对于其基线值，任何剂量都不存在统计学差异，且以各剂量静脉内和喷雾给予UT-15间也不存在统计学差异。如图6所示对于PPA也观察到相同的作用，虽然当UT-15气溶胶化时，PPA一般有减低的趋势。
令人感兴趣的是，无论静脉内或喷雾给予UT-15都不能引起PLA从它们各自的基线值发生显著变化(虽然在喷雾给药时平均值有所增加，而静脉内给药时有所减少)，但在以各种送递速率喷雾和静脉内给予UT-15之间存在明显的差异。见图7。
图8显示了对CO的作用以任一送递速率，相对于各基线值没有观察到明显的变化，且两种给药模式间也没有观察到明显的变化。
图9显示了喷雾和静脉内灌注UT-15对肺循环(PVR)的总体作用。在所有3种送递速率，静脉内UT-15对PVR没有明显作用，而气溶胶化的UT-15导致其明显减少。
以每kg每分钟250、500和1000ng速率喷雾UT-15引起的PVR减少，是由于PLA的小量增加和PPA的小量减少造成的。虽然这些变量与各基线值的差异并不显著，但联合起来(即PPA减去PLA，用于公式2)就非常明显，如图17所示。静脉内灌注UT-15对PVR没有影响，但对心率有明显作用。用严格的双途径(two-way)ANOVA和Student-Newman-Keuls检验对这些数据进行统计分析，可得到可信的统计学差异。
实施例5收缩的静脉内和气溶胶化UT-15的剂量反应进行了两个分开的试验以测定静脉内灌注UT-15和喷雾UT-15在U44069诱导的肺动脉高压中的剂量反应作用。建立基线后30分钟，以每kg每分钟1ng的速率静脉内灌注U44069。静脉内给予UT-15并让绵羊达到稳态30-60分钟后，静脉内给予UT-15的剂量反应与实施例4中的类似。喷雾给予UT-15并让绵羊达到稳态30-60分钟后，静脉内给予UT-15的剂量反应与实施例4中的类似。在各试验方案中，将UT-15给予3只绵羊30分钟，另3只绵羊60分钟。
以三种给药速率在30分钟和60分钟UT-15送递之间未发现差异。图10显示了U44069对心率的作用和在U44069灌注过程中UT-15随后的对心率的剂量-反应作用。静脉内给予UT-15导致心率增加超过在U44069条件下的值，而喷雾UT-15对心率没有影响。具体说，对静脉内给予UT-15，相对于基线心率仅在每kg每分钟1000ng的送递速率时有明显差异，而以每kg每分钟500和1000ng速率静脉内送递UT-15，与U44069的值有统计学差异。每kg每分钟500和1000ng喷雾送递速率与它们相应的静脉内灌输送递速率不同。
图11显示了中心静脉压的数据。对于静脉内给予UT-15观察到中心静脉压的某些差异，即以每kg每分钟500和1000ng送递速率时，其数值与U44069的值有差异。仅在每kg每分钟500ng时喷雾送递的值与相应的静脉内UT-15灌输值有差异。
对这些系列试验，体动脉压不存在统计学差异(图12)。图13显示了肺动脉压反应。U44069明显增加了PPA(相对于基线)，所有3种药物送递气溶胶化的UT-15速率都明显高于静脉内送递。事实上，以每kg每分钟500和1000ng速率喷雾UT-15，PPA回到正常水平。
U44069不明显改变左心房压。但以所有3种送递速率静脉内灌输UT-15将导致其明显降低(自U44069值)，且与每kg每分钟500和1000ng速率的基线值不同。所有3种喷雾送递速率都增加超过基线，而每kg每分钟250和500ng时增加超过了U44069值。如图14所示，所有三种喷雾送递速率的影响与静脉内灌注送递速率的都不同。
从这两种模式UT-15给药的最明显作用是对心排血量和“肺变量”的影响。如图15所示，U44069导致心排血量自基线下降。喷雾UT-15对心排血量没有影响。静脉内给予UT-15导致心排血量的剂量反应性增加，在每kg每分钟500和100ng时明显。在每kg每分钟1000ng时，气溶胶UT-15给药与静脉内灌注UT-15之间存在明显差异。
图16显示静脉内和喷雾送递UT-15在U44069过程中对肺血管阻力的总体效应。其显示了虽然肺血管阻力因静脉内灌注和喷雾UT-15而明显减弱，但喷雾UT-15的作用更强。具体说，U44069导致PVR明显增加，其在每kg每分钟500和1000ng速率静脉内灌注UT-15时明显减弱。喷雾UT-15导致PVR降低，故而三种送递速率相对于基线PVR均没有明显差异。令人感兴趣的是，静脉内和喷雾送递UT-15开始减弱PVR增加的时间非常类似(4-5分钟)，而对喷雾UT-15反应结束时间比静脉内送递UT-15的要长得多(43分钟与12分钟)。
图18显示了虽然静脉内送递UT-15使PPA自UT44069值明显下降，但这种下降与PLA的下降相称。所以肺血管驱动压(PPA-PLA)没有变化。
本发明已详细地并参考本发明的优选实施例进行了描述，本领域技术人员可以理解对本发明的各种改变和改进都属于本发明的精神和范围。
本文所引用的参考文献本文将其分别全部纳入作为参考。


公开了一种通过吸入法将联苯胺前列腺素送递给患者的方法。与肠胃外给予患有诱导的肺动脉高压的绵羊UT－15相比,当用吸入法给予称为UT－15的联苯胺前列腺素时具有出人意料的优异效果。