专利名称：一种治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂及其制法的制作方法黄蜀葵在临床上主要作为治疗心脑血管性疾病，心肌缺血、脑缺血、冠心病等，对缺血、缺氧性脑损伤有保护作用。其有效部位为其所含的黄酮类化合物。目前黄蜀葵花总黄酮有效部位达到80％以上作为注射用制剂原料没有文献报道，仅有单体金丝桃苷等的分离方法及药理活性报道，其分离常采用聚酰胺柱进行分离，洗脱溶剂基本上为毒性较大的有机溶剂，且收率低，因此，现有的提取分离方法不适合于工业化生产。本发明所用的提取分离方法适合工业化生产，为黄蜀葵作为生产注射用制剂打下了基础，且具有工艺简单、收率高的特点。同时也为临床应用提供了一种新的中药制剂，一种新的黄蜀葵药物剂型，也给临床上治疗心脑血管性疾病，包括心肌缺血、脑缺血、冠心病等提供了又一高效，安全的药物。
本发明就是解决现有技术存在的上述问题，提供一种分离黄蜀葵注射用有效部位的提取分离方法，以及其有效部位制剂的处方和制备方法。治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂药物，其特征在于有效部位制剂是一种注射剂，各组份的配方为黄蜀葵花有效部位10-50g甘露醇 20-60g注射用水加至5L。治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂，其特征在于取处方量的黄蜀葵花有效部位置烧杯中加适量注射用水使溶解，再加入甘露醇使溶解；测pH为2-8；加入0.01～0.5％的活性炭40～90℃加热搅拌15分钟；脱炭过滤，补加水至规定体积用0.45μm及0.22μm滤膜过滤，测定含量，灌装(5ml/支)，冻干即得。治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂，有效部位的制备方法其特征在于包含黄蜀葵花上柱液的制备步骤、由吸附柱进行吸附分离的步骤、用洗脱剂对吸附柱进行洗脱以及对洗脱液进行减压浓缩的步骤，以黄蜀葵花为原料、吸附柱为聚酰胺柱，在洗脱中采用40-95％的乙醇洗脱、80℃以下减压回收溶剂、真空干燥得粗品有效部位。治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂，有效部位的制备方法其特征在于在用40-95％的乙醇洗脱前，先用水对聚酰胺柱进行洗脱至洗脱液近无色；采用10-40倍55-95％的乙醇溶液回流制备上柱液；粗品有效部位经用乙酸乙酯提取2-3次，每次1-3h，提取液浓缩，真空干燥可精制得有效部位含量大于80％的注射用制剂原料。治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂，其特征在于有效部位中各组份的含量比例为金丝桃苷20-35％，异槲皮苷10-25％，槲皮素-3′-葡萄糖苷5-20％。
本发明是采用如下技术方案实现的将干燥的黄蜀葵花粉碎成粗粉，用10-30倍量的55-95％乙醇加热回流提取或冷浸渗漉法，提取2-3次，每次1-3小时，然后将提取液于80℃以下减压浓缩至无醇味，加入4 6倍量热水，搅拌，放冷，离心，液体上聚酰胺层析柱，先以水洗脱至洗脱液颜色极淡，再以40％-95％的乙醇洗脱，洗脱至洗脱液颜色极淡，收集乙醇洗脱液，于80℃以下减压浓缩洗脱液，真空干燥得有效部位粗提物。粗提物中有效部位含量在40％左右，为了进一步富集有效部位中总黄酮含量，我们采用乙酸乙酯加热回流提取，所得提取物为注射用制剂原料。所用提取方法为20-40倍量混合溶剂加热回流提取2-3次，每次1-3小时，提取液浓缩，真空干燥即得注射用制剂原料。
处方黄蜀葵花有效部位30g甘露醇 40g注射用水加至5L制成1000支取处方量的黄蜀葵花有效部位置烧杯中加适量注射用水使溶解，再加入甘露醇使溶解；测pH3.4；加入0.1％的活性炭60℃加热搅拌15分钟；脱炭过滤，补加水至规定体积用0.45μm及0.22μm滤膜过滤，测定含量，灌装(5ml/支)；预冻24小时再置冷冻干燥机干燥；干燥完毕，压盖即得1000支。
本发明所用吸附树脂为聚酰胺树脂。
本发明通过聚酰胺柱吸附，再以醇洗脱，该工艺适用于工业化生产，所得有效部位总黄酮含量高，达到80％以上，因此本发明为提纯、生产黄蜀葵中药注射用原料药提供了高效、可行且适应于工业应用的方法，为进一步进行黄蜀葵制剂研究打下了基础。并为临床应用提供了一种新的中药制剂，一种新的黄蜀葵药物剂型。
下面用药理实验结果阐明其药理作用黄蜀葵花有效部位(TFA)对小鼠断头后张口喘气时间的影响表TFA对小鼠断头后张口喘气时间的影响

与NS比较，P＜0.05。本研究结果显示，TFA24，12mg.kg-1在小鼠断头后张口喘气模型上，可显著延长小鼠断头后张口喘气时间。以上初步研究结果表明TFA对缺血性脑损伤具有保护作用。

例1取黄蜀葵花5000克，将25倍75％的乙醇溶液分2-3次回流，每次1.5-2小时，将所得的滤液合并，于80℃以下减压回收乙醇至无醇味，以4-6倍的热水溶解，放冷，离心，液体上清液上聚酰胺柱，柱先用去离子水洗至颜色极淡，再用75％的乙醇洗至颜色极淡，洗脱液于70℃以下减压干燥，得粗品有效部位105克。
粗品的精制
注射用制剂原料的精制取粗品40g，以乙酸乙酯15-20倍分两次回流提取，合并滤液，回收溶剂，真空干燥得产品21g。
分别测定上述原料中有效部位含量，结果如下测定结果收率％有效部位金丝桃苷异槲皮苷槲皮素-3′-葡含量％ 含量％ 含量％ 萄糖苷含量％原料1.10％83％26.4％ 14％12％例2取黄蜀葵花5000克，用25-30倍，85％的乙醇分2-3次提取，每次1.5-2.5小时，合并提取液于70℃以下减压回收乙醇至无醇味，加入生药量4-6倍热水溶解，放冷，离心，液体上清液上聚酰胺树脂柱，柱先用去离子水洗至颜色极淡，再用80％乙醇洗脱，收集洗脱液，于80℃以下减压回收乙醇，浸膏真空干燥得粗品有效部位112克。
粗品有效部位的精制注射用原料的精制取粗品有效部位40克，以乙酸乙酯15-20倍分2次加热回流提取，每次1.5-2小时，合并提取液，回收溶剂，真空干燥得有效部位19.5克。
测定结果收率％有效部位金丝桃苷异槲皮苷槲皮素-3′-葡含量％ 含量％ 含量％ 萄糖苷含量％原料1.09％84％27.2％ 14.5％ 12.3％例31、规格30mg/支2、处方
黄蜀葵花有效部位30g甘露醇 40g注射用水加至5L制成1000支3制法取处方量的黄蜀葵花有效部位置烧杯中加适量注射用水使溶解，再加入甘露醇使溶解；测pH3.4；加入0.1％的活性炭60℃加热搅拌15分钟；脱炭过滤，补加水至规定体积用0.45μm及0.22μm滤膜过滤，测定含量，灌装(5ml/支)；预冻24小时再置冷冻干燥机干燥；干燥完毕，压盖即得1000支。


本发明公开了一种治疗心脑血管性疾病的有效部位制剂及其制法。分离黄蜀葵注射用有效部位的提取分离方法，以及其有效部位制剂的处方和制备方法。本发明所用的提取分离方法适合工业化生产，为黄蜀葵作为生产注射用制剂打下了基础，且具有工艺简单、收率高的特点，同时有效部位制剂也为临床应用提供了一种新的中药制剂，一种新的黄蜀葵药物剂型，也给临床上治疗心脑血管性疾病，包括心肌缺血、脑缺血、冠心病等提供了又一高效，安全的药物。