含有外源性乳脂肪球膜组分的营养组合物的制作方法[0001]背景[0002]目前市场上有多种类型的营养组合物。根据营养组合物的具体成分，营养组合物可以定向于某个食用者类型，例如年青者、年老者、运动员等。营养组合物还可以根据意欲用该营养组合物治疗或改善的某些生理状况来进行配制，或者可以基于该营养组合物的预期的物理或感官性质。[0003]营养支持的一个目标是在营养组合物中提供特定类型和量的营养物，以给使用者提供足以获得预期生物学结果的量的营养素。例如，年老者和患有某种疾病的个体可以多次经历低度炎症、骨骼肌细胞膜不稳定和瘦体重减少(至少部分归因于肌肉蛋白合成减少)。瘦体重减少可导致生活独立性、生活功能性和生活质量以及胰岛素敏感性/葡萄糖耐量的损失。可以配制营养组合物来治疗或预防这类病症。[0004]但是，在营养组合物中用于对抗这些类型的衰老-和/或疾病-相关性状况的多种营养物使组合物具有不期望的口味或气味。其结果是，当使用者由于组合物的感官性质不佳而拒绝摄入该组合物时，不能获得预期的生物学结果。因此，期望提供这样一种营养组合物，其具有特定类型和量的对抗衰老效应的营养物，同时提供了可耐受的物理和感官性质。[0005]简述[0006]本公开内容涉及含有乳脂肪球膜组分(“MFGM”)和至少一种营养物的营养组合物。本公开内容还涉及用于治疗一系列生理病理学状况如低度炎症、瘦体重损失、骨骼肌细胞膜不稳定、关节炎症、骨健康不佳或其组合的营养组合物。该营养组合物特别适用于年老者或需要治疗上述状况的个体。但是，本领域技术人员将理解，本发明的营养组合物可以给具有本文未清楚提及的状况的个体提供益处。[0007]在一项实施方案中，提供了营养组合物，其包含乳脂肪球膜(“MFGM”)和至少一种营养物。营养物可以选自乳清蛋白胶束、α-羟基异己酸(“α-HICA”)、瓜氨酸、支链脂肪酸或其组合。[0008]在一项实施方案中，乳清蛋白胶束是至少一种支链氨基酸的来源，所述氨基酸选自亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸或其组合。
[0009]在一项实施方案中，营养组合物还包含益生菌(probiotic),所述益生菌选自乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)CNCM 1-3446(保藏单位:CNCM,保藏日:2005年6月7日)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)GGATCC53103、鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724、以 ATCC BAA-999 保藏的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)BB536、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus Reuteri) ATCC55730、罗伊氏乳杆菌DSM-17938、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei) CNCM 1-2116 (保藏单位:CNCM,保藏日:1999 年 I 月 12 日)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii) CNCM 1-1225 (保藏单位:CNCM，保藏日:1992 年 6 月30 日)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus) CNCM 1-4095 (保藏单位:CNCM,保藏日:2008 年 12 月 2 H )、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve) CNCM 1-3865(保藏单位:CNCM,保藏日:2007年11月15日)、长双歧杆菌CNCM 1-2618(保藏单位:CNCM，保藏日:2001年I月29日)或其组合。MFGM可以包含能够与益生菌结合或与益生菌在生物学上相互作用的生物活性蛋白质或蛋白质。
[0010]在一项实施方案中，MFGM包含能够与益生菌结合或与益生菌在生物学上相互作用的神经节苷脂或磷脂，所述神经节苷脂或磷脂以蛋白质总重量的0.03%至5%的量存在。
[0011]在一项实施方案中，MFGM以蛋白质总重量的0.1%至15%的量存在。MFGM还可以以0.0lg至15g MFGM/100g营养组合物的量存在。
[0012]在一项实施方案中，营养组合物还包含益生元(prebiotic),所述益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides)、牛奶低聚糖(cow milkoligosaccharides；或具组合。
[0013]在一项实施方案中，MFGM来源于选自如下的来源:酪乳、酪乳级分、脱脂酪乳、脱乳糖酰基化酪乳(delactosylated buttermilk)、通过微滤或超滤获得的酪乳级分、由乳清蛋白浓缩物回收的级分、甜乳清、酸乳清、乳清稀奶油(whey cream)或来自含磷脂乳清的脂肪相关级分(fat associated fraction)或其组合。
[0014]在一项实施方案中，MFGM包括选自如下的组分:鞘膦脂、磷脂酰こ醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、神经节苷脂、黏蛋白1、黄嘌呤(xantine)-氧化酶/脱氢酶、高碘酸希夫(periodicacid schiff)、0)36、嗜乳脂蛋白、adipophilin、PAS6/7、脂肪酸结合蛋白、乳铁蛋白、IactaldherinJt ETTVFENLPEKJt SFQLFGSPPGQRJtGSNFQLDQLQGR、肽 FQFIQVAGR597、肽 IFIGNVNNSGLK、肽 INLFDTPLETQYVR、肽 TPLPLAGPPRJtEGQEQEGEEMAEYRJt SELLVDQYLPLTK 或其组合。
[0015]在一项实施方案中，营养物是a -HICA, a -HICA以约125mg至约625mg/100g营养
组合物的量提供。
[0016]在一项实施方案中，营养物是瓜氨酸,瓜氨酸以约62mg至约315mg/100g营养组合物的量提供。
[0017]在一项实施方案中，营养物是支链脂肪酸，支链脂肪酸以约6.25mg至约
12.5mg/100g营养组合物的量提供。
[0018]在另ー项实施方案中，提供了用于治疗罹患或处于罹患医学病症的风险中的个体的方法。该方法包括提供包含乳脂肪球膜(“MFGM”)的营养组合物和将所述营养组合物施用于个体，其中所述医学病症选自低度炎症、瘦体重损失、骨骼肌细胞膜不稳定、关节炎症或其组合。
[0019]在一项实施方案中，个体是老年个体。
[0020]在一项实施方案中，MFGM来源于选自牛类动物(bovine)、水牛(buffalo)、马、山羊、人或其组合的乳来源。
[0021]在一项实施方案中，组合物还包含选自如下的至少ー种营养物:乳清蛋白胶束、a-羟基异己酸(“a-HICA”)、瓜氨酸、支链脂肪酸或其组合。
[0022]在一项实施方案中，营养组合物还包含a -HICA，营养组合物以足以提供约2g至约IOg a-HICA/天的量施用。
[0023]在一项实施方案中，营养组合物还包含瓜氨酸，营养组合物以足以提供约Ig至约5g瓜氨酸/天的量施用。
[0024]在一项实施方案中，营养组合物还包含支链脂肪酸，营养组合物以足以提供约IOOmg至约1，500mg支链脂肪酸/天的量施用。
[0025]本公开内容的优点是提供了改善的营养组合物。
[0026]本公开内容的另ー个优点是提供了具有有利的合成代谢营养物的营养组合物。
[0027]本公开内容的另ー个优点是提供了刺激人蛋白质合成的营养组合物。
[0028]本公开内容的另ー个优点是提供了促进肌肉生长的营养组合物。
[0029]本公开内容的另ー个优点是提供了保持瘦体重的营养组合物。
[0030]本公开内容的另ー个优点是提供了掩蔽营养组合物中的营养物的异味的营养组合物。
[0031]本公开内容的另ー个优点是提供了具有可接受的感官性质的营养组合物。
[0032]本公开内容的另ー个优点是提供了施用营养组合物的方法。
[0033]本文描述了另外的特征和优点，它们由以下的详述和图将是清楚的。
[0034]附图简述
[0035]图1显示了本公开内容的实施方案的乳清蛋白胶束的高度简略图。
[0036]图2显示了一位母亲产后7天的人乳的温度梯度凝胶电泳。细菌DNA(带I和2)特别在样品5和6 (含MFGM的奶油级分)中出现。
[0037]图3显示了两位母亲的人乳的温度梯度凝胶电泳。细菌DNA(中间两个箭头指示的带)特别在样品2和3 (含MFGM的奶油级分)中出现。
[0038]图4显示了显示出単独或在链中的细菌结构(标有箭头)的MFGM电子显微照片，伴有MFGM。
[0039]图5显示了粘膜细胞相互作用的模型。
[0040]图6显示了 LPS的上皮细胞应答。益生菌和MFGM降低上皮细胞对内毒素攻击(LPS)的应答和相关的炎性反应。采用益生菌和MFGM的组合可以观察到累积效应，表明这两种成分之间存在协同作用。
[0041]图7显示了 T-细胞激活。MFGM和益生菌促进T淋巴细胞激活。在MFGi^PB.1actis之间可以观察到协同作用。
[0042]图8显示了 B-细胞激活。MFGM促进B淋巴细胞激活。单独的益生菌的效应较低。在MFGM和益生菌之间可以观察到协同作用。
[0043]详述
[0044]在本说明书中，以下术语具有下文归属给它们的含义:
[0045]本申请中所含的所有剂量范围意欲包括该范围内所含的所有数值(整数或分数)。
[0046]如本公开内容和所附权利要求书中所用的単数形式包括复数称谓，上下文另有清楚的指示除外。因此，例如，“多肽”的称谓包括两种或更多种多肽的混合物，以此类推。
[0047]如本文所用的“约”理解为表示数字范围内的数字。而且，本文中的所有数字范围应当理解为包括该范围内的所有整体(全体或部分)。
[0048]如本文所用的术语“氨基酸”理解为包括一种或多种氨基酸。氨基酸可以是例如丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、瓜氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、羟丝氨酸、羟酪氨酸、羟赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、牛磺酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸或其组合。[0049]如本文所用的“动物”包括但不限于哺乳动物，其包括但不限于啮齿动物、水生哺乳动物、家养动物如狗和猫、农场动物如羊、猪、牛和马以及人。当使用术语“动物”或“哺乳动物”或其复数形式时，可以理解，其还应用于能够具有该段落的上下文所呈现的或意欲呈现的作用的任意动物。
[0050]如本文所用的术语“抗氧化剂”理解为包括任意一种或多种诸如以下的各种物质:β-胡萝卜素(维生素A前体)、维生素C、维生素E和硒)，其抑制氧化反应或者由活性氧类别(“R0S”)和其它基团或非基团类别促进的反应。另外，抗氧化剂是能够延缓或阻止其它分子氧化的分子。抗氧化剂的非限制性实例包括虾青素、类胡萝卜素、辅酶Q10(“CoQ10”)、类黄酮、谷胱甘肽、Goji (枸杞属)、橙皮苷、乳枸杞(Iactowolfberry)、木酹素、叶黄素、番茄红素、多酚、硒、维生素A、维生素C、维生素E、玉米黄质或其组合。
[0051]如本文所用的“完全营养物”包括这样的营养产品和组合物:其含有对正在使用其的动物而言足以作为唯一营养源的足够类型和水平的常量营养素(蛋白质、脂肪和碳水化合物)和微量营养素。患者可以从这类完全营养组合物接受他们的营养需求的100%。
[0052]如本文所用的“有效量”是这样的量:其在个体中防止缺乏、治疗疾病或医学病症，或者更概括而言，其减轻症状、控制疾病进程或给个体提供营养的、生理学的或医学的益处。治疗可以是与患者或与医师有关的。
[0053]如本文所用的“年老”或“老年”个体包括年龄为65岁或更老的个体。
[0054]如本文所用的“食品级微生物”指用于食物并且通常对于用于食物而言被视为安全的微生物。
[0055]如本文所用的“不完全营养物”包括这样的营养产品或组合物:其不含有对正在使用其的动物而言足以作为唯一营养源的足够水平的常量营养素(蛋白质、脂肪和碳水化合物)或微量营养素。部分或不完全营养组合物可以用作营养补充剂。
[0056]虽然术语“个体”和“患者”在本文中通常用于指人，但是本公开内容不受该限制。因此，术语“个体”和“患者”指罹患可受益于所述治疗的医学病症或处于罹患可受益于所述治疗的医学病症的危险中的任意动物、哺乳动物或人。
[0057]如本文所用的“需要其的个体”指具有特定生理学需要的任意婴儿、婴孩、儿童、青少年或成人，所述生理学需要是有关所考虑的病理生理学状况的，并且本公开内容为其提供了改善的或供选的解决方案。这包括受累于该病理生理学状况的所有年龄的患者。
[0058]如本文所用的“长期施用”优选是连续施用6周以上。或者，如本文所用的“短期施用”是连续施用6周以下。
[0059]如本文所用的“哺乳动物”包括但不限于啮齿动物、水生哺乳动物、家养动物如狗和猫、农场动物如羊、猪、牛和马以及人。当使用术语“哺乳动物”时，可以理解，其还应用于能够具有该哺乳动物所呈现的或意欲呈现的作用的其它动物。
[0060]术语“微生物”意欲包括细菌、酵母和/或真菌、含微生物的细胞生长培养基或者其中培养有微生物的细胞生长培养基。
[0061]如本文所用的“乳脂肪球膜”(“MFGM”)指如K.Dewettinck等人，“Nutritionaland technological aspects of milk fat globule membrane material,，’InternationalDairy Journal,第18卷，第436-457页(2008)中所描述和定义的乳(特别是牛乳或人乳)的脂肪级分。简言之，该术语囊括在哺乳动物乳中包围脂肪球的膜或膜相关物质，所有这些并且连同MFGM的其它组分一起称为“MFGM组分”。为了本文件中的语言简洁，术语“MFGM”和“MFGM组分”互换使用。
[0062]如本文所用的术语“矿物质”理解为包括硼、钙、铬、铜、碘、铁、镁、锰、钥、镍、磷、
钾、硒、娃、锡、f凡、锌或其组合。
[0063]如本文所用的“非复制”微生物指通过经典的平板培养法不能检测到活的细胞和/或集落生成単元。这类经典的平板培养法在微生物学书籍中有概括James Monroe Jay等人，“Modern food microbiology,，，第 7 版，Springer Science,纽约，N.Y.第 790 页(2005)。通常，可以如下证明不存在活细胞:在接种不同浓度的细菌制备物(‘非复制’样品)和在适当条件下培养(需氧和/或厌氧气氛，至少24小时)后，在琼脂板上没有看得见的集落或液体生长培养基的浊度没有増加。例如，双歧杆菌属如长双歧杆菌、乳双歧杆菌和短双歧杆菌或者乳杆菌属如副干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌可以通过热处理、特别是低温/长时间热处理而成为非复制的。
[0064]如本文所用的“核苷酸”理解为是脱氧核糖核酸(“DNA”)、核糖核酸(“RNA”)、多聚RNA、多聚DNA或其组合的亚单位。它是由含氮碱基、磷酸分子和糖分子(在DNA中为脱氧核糖，在RNA中为核糖)组成的有机化合物。单个核苷酸单体(单个单位)连接在一起形成聚合体或长链。外源性核苷酸特别地由饮食供给提供。外源性核苷酸可以是单体形式，例如5’ -单磷酸腺苷(“5’ -AMP”)、5’ -单磷酸鸟苷(“5’ -GMP”)、5’ -单磷酸胞嘧啶(“5’ -CMP”)、5’ -单磷酸尿嘧啶(“5’ -UMP”)、5’ -单磷酸肌苷(“5’ -1MP”)、5’ -单磷酸胸腺嘧啶(“5’-TMP”)或其组合。外源性核苷酸还可以是聚合形式，例如完整的RNA。可以有多种来源的聚合形式，例如酵母RNA。
[0065]如本文所用的“营养产品”或“营养组合物”理解为包含任意数目的任选的额外成分、包括常规食品添加剂(合成或天然的)，例如ー种或多种酸化剂、额外的增稠剂、缓冲剂或pH调节物质、螯合剂、着色剂、乳化剤、赋形剂、香味剂、矿物质、渗透剂、可药用载体、防腐剂、稳定剂、糖、甜味剂、组织形成剂和/或维生素。任选的成分可以以任意适宜的量加入。营养产品或组合物可以是完全营养物的来源，或者可以是不完全营养物的来源。
[0066]如本文所用的Co _3脂肪酸的来源包括例如鱼油、磷虾、w-3的植物来源、亚麻子、核桃和海藻。《_3脂肪酸的实例包括例如a-亚麻酸(“ALA”)、二十ニ碳六烯酸(“DHA”)、二十碳五烯酸(“EPA”)或其组合。
[0067]如本文所用的“植物化学物”或“植物营养素”是在许多食物中发现的无营养化合物。植物化学物是具有超过基本营养的健康益处的功能食品，它们是来自植物来源的促进健康的化合物，可以是天然的或纯化的。“植物化学物”和“植物营养素”指给使用者带来ー种或多种健康益处的由植物产生的任意化学物质。植物化学物和植物营养素的非限制性实例包括以下那些:
[0068]i)酚类化合物，包括单酚(例如芹菜脑、鼠尾草酚、香芹酚、莳萝油脑(dillapiole)、rosemarinol);类黄酮(多元酹)，包括黄酮醇(例如槲皮素、姜酹(fingerol)、山柰酚、杨梅黄酮、芦丁、异鼠李亭)、黄烷酮(例如橙皮苷、柚苷配基、水飞蓟宾、圣草酚)、黄酮(例如芹菜素、柑橘黄酮、四羟黄酮)、黄烷-3-醇(例如儿茶素、(+)-儿茶素、(+)_掊儿茶素、(-)_表儿茶素、(-)_表掊儿茶素、(-)_表掊儿茶素掊酸酯(EGCG)、(-)_表儿茶素3-掊酸酯、茶黄素、茶黄素-3-掊酸酯、茶黄素_3’ -掊酸酯、茶黄素-3，3’ -二掊酸酯、茶红素(thearubigins))、花色素苷(f Iavonals)和花色素(例如花葵素、芍药素、矢车菊色素、翠雀色素、锦葵色素、矮牵牛素)、异黄酮(植物雌激素)(例如黄豆苷元(芒柄花黄素)、染料木黄酮(生原禅宁A)、黄豆黄素)、二氢黄酮醇、查耳酮、配糖(=Coumestans)(植物雌激素)和考迈斯托醇；酚酸(例如鞣花酸、掊酸、鞣酸、香兰素、姜黄素)；羟基肉桂酸(例如咖啡酸、绿原酸、肉桂酸、阿魏酸、香豆素)；木酚素(植物雌激素)、水飞蓟素、secoisolariciresinol、松脂酹和落叶松树脂醇)；酪醇酯(例如酪醇、羟基酪醇、oleocanthal、齐墩果苷);stilbenoids (例如白藜芦醇、蝶苗(pterostilbene)、四轻反式苗(piceatannol)) ^Ppunicalagins ；
[0069]ii)萜类(类异戊二烯)，包括类胡萝卜素(类四萜)、包括胡萝卜素(例如α-胡萝卜素、胡萝卜素、Y-胡萝卜素、S-胡萝卜素、番茄红素、链孢红素、六氢番茄红素、八氢番茄红素)和黄叶素(例如斑蝥黄、隐黄质、玉米黄质、虾青素、叶黄素、玉红黄质)；一帖类(例如苧烯、紫苏子醇)；皂草苷；脂质，包括:植物留醇(例如菜油留醇、β_谷甾醇、Y-谷留醇、豆留醇)、生育酚(维生素Ε)以及ω-3、6和9脂肪酸(例如Y-亚麻酸)；三職系化合物(例如齐墩果酸、熊果酸、桦木酸、moronic acid)；
[0070]iii)甜菜红，包括β -花青素(例如甜菜苷、异甜菜苷、probetanin,新甜菜苷(neobetanin));和甜菜黄素(非糖苷型)(例如梨果仙人掌黄素和仙人掌黄素(vulgaxanthin))；
[0071]iv)有机硫化物,包括dithiolthiones (异硫氰酸盐)(例如sulphoraphane);和thiosulphonates (葱属化合物)(例如烯丙基甲基三硫和二烯丙基硫醚)、吲哚化合物、硫代葡萄糖酸盐(glucosinolates)、包括吲哚_3_甲醇；萝卜硫烷；3，3’ - 二吲哚基甲烷；黑芥子苷；蒜素；蒜氨酸；异硫氰酸丙烯酯；胡椒碱；顺式-丙硫醛-S-氧化物；
[0072]V)蛋白质抑制剂，包括蛋白酶抑制剂；
[0073]vi)其它有机酸，包括草酸、植酸(六磷酸肌醇)；酒石酸；和漆树酸；或
[0074]vii)它们的组合。
[0075]如本文所用的“益生元”是在肠中选择性地促进有益细菌生长或抑制致病菌生长或粘膜附着的食物物质。它们在摄入其的人的胃和/或上肠道内不被灭活或者在胃肠道内不被吸收，但是它们被胃肠道微生物区系和/或益生菌发酵。益生元例如在如下文献中进行了定义:Glenn R.Gibson 等人，“Dietary Modulation of the Human ColonicMicrobiota:1ntroducing the Concept of Prebiotics，，，J.Nutr.125:1401-1412(1995)。益生元的非限制性实例包括阿拉伯胶、α葡聚糖、阿拉伯半乳聚糖、β葡聚糖、右旋糖酐、低聚果糖、岩藻糖乳糖、低聚半聚糖(galactooligosaccharides)、半乳甘露聚糖、低聚龙胆糖、低聚葡萄糖(glucooligosaccharides)、瓜尔胶、菊粉、低聚异麦芽糖(isomaltooligosaccharide)、Iactoneotetraose> 低聚乳果糖(Iactosucrose)、乳果糖、果聚糖、麦芽糖糊精、乳寡糖(milk oligosaccharides)、部分水解的瓜尔胶、果胶低聚糖(pectiColigosaccharides)、抗性淀粉、回生淀粉(retrograded starch)、唾液酸低聚糖(sialooligosaccharides)、唾液酰乳糖、大豆低聚糖(soyoligosaccharides)、糖醇、低聚木糖或它们的水解物或其组合。
[0076]如本文所用的益生微生物(下文称为“益生菌”)是这样的食品级微生物(活的，包括半活的或弱化的和/或非复制的)、代谢物、微生物细胞制备物或微生物细胞组分:当以足够的量施用时可以给宿主带来健康益处，更具体而言，可以通过改善其肠道微生物平衡而有益地影响宿主，从而对宿主的健康或安康产生作用。參见Salminen S.等人，“Probiotics:how should they be defined?,，，Trends Food Sc1.Technol.，10，107-10(1999)。通常，人们认为这些微生物可抑制或影响肠道中致病菌的生长和/或代谢。益生菌还可以激活宿主的免疫功能。因为这个原因，已经有许多不同的方法将益生菌包含到食物产品中。益生菌的非限制性实例包括气球菌属(Aerococcus)、曲霉属(Aspergillus)、拟杆菌属(Bacteroides)、双岐杆菌属(Bifidobacterium)、念珠菌属(Candida)、梭菌属(Clostridium)、德巴利酵母属(Debaromyces)、肠球菌属(Enterococcus)、梭杆菌属(Fusobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、蜜蜂球菌属(Melissococcus)、微球菌属(Micrococcus)、毛霉属(Mucor)、酒球菌属(Oenococcus)、片球菌属(Pediococcus)、青霉属(Penicillium)、消化链球菌属(Peptostrepococcus)、毕赤酵母属(Pichia)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、Pseudocatenulatum、根霉属(Rhizopus)、酵母属(Saccharomyces)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、球拟酵母属(Torulopsis)、魏斯氏菌属(Weissella)或其组合。
[0077]如本文所用的术语“蛋白质”、“肽”、“寡肽”或“多肽”理解为指包括单ー氨基酸(単体)、通过肽键连接在一起的两个或多个氨基酸(二肽、三肽或多肽)、胶原蛋白、前体、同系物、类似物、模拟物、盐、前药、代谢物或其片段或者它们的组合的任意组合物。为了清楚目的，任意以上术语可以互换使用，另有说明除外。应当理解:多肽(或肽或蛋白质或寡肽)通常含有除常称为20种天然存在的氨基酸的20种氨基酸以外的氨基酸，并且很多氨基酸、包括末端氨基酸可以在给定的多肽中通过自然过程如糖基化和其它翻译后修饰或者通过本领域熟知的化学修饰技术进行修饰。可以在本公开内容的多肽中存在的已知修饰包括但不限于こ酰化、酰化、ADP-核糖基化、酰胺化、黄烷类或血红素部分的共价连接、多核苷酸或多核苷酸衍生物的 共价连接、脂质或脂质衍生物的共价连接、磷脂酰肌醇的共价连接、交联、环化、二硫键形成、脱甲基、共价交联的形成、胱氨酸的形成、焦谷氨酸的形成、甲酰化、Y-羧基化、糖化、糖基化、糖基磷脂酰肌醇(GPI)膜锚着点形成、羟化、碘化、甲基化、肉豆蘧酰化、氧化、蛋白酶解加エ、磷酸化、异戍烯化、外消旋化、硒酰化(seIenoylation)、硫酸化、转移-RNA介导的氨基酸与多肽的加成如精氨酰化以及遍在蛋白化。术语“蛋白质”还包括“人工蛋白质”，后者指由交替重复的肽组成的直链或非直链多肽。
[0078]蛋白质的非限制性实例包括基于乳的蛋白质、基于植物的蛋白质、基于动物的蛋白质和人工蛋白质。基于乳的蛋白质可以选自酿蛋白、酿蛋白酸盐、酿蛋白水解物、乳清、乳清水解物、乳清浓缩物、乳清分离物、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物或其组合。基于植物的蛋白质包括例如大豆蛋白(例如所有形式，包括浓缩物和分离物)、豌豆蛋白(例如所有形式，包括浓缩物和分离物)、卡诺拉蛋白(canola protein)(例如所有形式,包括浓缩物和分离物)，其它可购买的植物蛋白有小麦蛋白和分级的小麦蛋白、玉米及其级分、包括玉米醇蛋白、稻、燕麦、马铃薯、花生以及来自豆、荞麦、滨豆、pulses的任意蛋白质、单细胞蛋白或其组合。基于动物的蛋白质可以选自牛肉、禽、鱼、羔羊、海产品或其组合。
[0079]如本文所用的“合生元”(symbiotic)是含有一起工作以改善肠道微生物区系的益生元和益生菌的补充剂。[0080]如本文所用的术语“治疗”和“减轻”包括预防性或防止性治疗(阻止和/或减缓目标病理学病症或紊乱的发展)以及治愈性、治疗性或疾病调整性治疗，包括治愈、减缓、减轻所诊断病理学病症或紊乱的症状和/或使其发展停止的治疗性措施；以及治疗处于患病风险或被怀疑已经患病的患者以及患病或已经被诊断为患有疾病或医学病症的患者。该术语不是一定指对象进行治疗直至完全恢复。术语“治疗”还指在未患疾病、但是易发生不健康状态如氮失衡或肌肉损失的个体中维持和/或促进健康。术语“治疗”和“减轻”还意欲包括增强或另外地增进一种或多种原来的预防性或治疗性措施。术语“治疗”和“减轻”还意欲包括疾病或病症的膳食管理或者用于预防或阻止疾病或病症的膳食管理。
[0081]如本文所用的“管饲”是施用于动物胃肠道系统的完全或不完全营养产品或组合物，除通过口服施用外，包括但不限于鼻胃管、口胃管、胃管、空肠造口术置管(“J-管”)、经皮内镜胃造口术(PEG)、孔、例如提供到达胃、空肠的通路的胸壁孔和其它适宜的孔。
[0082]如本文所用的术语“维生素”理解为包括在少量时对于身体的正常生长和活动而言是必需的并且由植物和动物食物天然获得或者通过合成制得的各种脂溶性或水溶性有机物质中的任一种(非限制性的实例包括维生素A、维生素BI (硫胺)、维生素B2 (核黄素)、维生素B3 (尼克酸或烟酰胺)、维生素B5 (泛酸)、维生素B6 (吡哆醇、吡哆醛或吡多胺或吡哆醇盐酸盐)、维生素B7 (生物素)、维生素B9 (叶酸)和维生素B12 (各种钴胺素；通常在维生素补充剂中的氰钴胺)、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、Kl和K2(即ΜΚ-4、ΜΚ-7)、叶酸和生物素)，包括它们的维生素原、衍生物和类似物。
[0083]本公开内容涉及具有来自乳的生物活性脂质和合成代谢营养物的组合的营养组合物以调控患者、包括例如年老者的低度炎症、瘦体重损失、骨骼肌细胞膜不稳定、关节炎症和关节健康不佳。本公开内容还涉及治疗需要其的个体的医学病症的方法。所述医学病症可以例如是低度炎症、瘦体重损失、骨骼肌细胞膜不稳定、关节炎症、关节健康不佳或其组合或相关的病症。所述病症可以部分归因于个体的衰老。但是，本领域技术人员将理解，本发明的营养组合物和方法不需要施用于老年个体，而是可以施用于需要其的任意个体。
[0084]对于年老者和患有类似于上文提到那些的医学病症的患者而言，现有的营养支持方案缺少有效性和/或确保食用者顺应性的吸引人的感官性质。其结果是，老年个体可能未接受到恰当的营养物来对抗通常与衰老过程相关的医学病症，并且可能经历例如显著的瘦体重损失，导致生活独立性、生活功能性和生活质量的损失。老年个体还可能出现认知能力下降，与这些发病相关的医疗成本是高的。
[0085]可用于对抗通常与衰老相关的医学病症的一种已知的营养物包括一些脂质生物活性物，例如ω-3脂肪酸。ω-3脂肪酸的实例包括二十二碳六烯酸(“DHA”)、二十碳五烯酸(“ΕΡΑ”)和α -亚麻酸(“ALA”)。已经证明EPA(—种ω-3多不饱和脂肪酸)减弱癌症恶病质和脓毒症中的骨骼肌萎缩以及通过使核因子-K β ("NF-K β”)的激活最小化来降低经由通常的细胞信号转导途径的卸载诱导的骨丢失。EPA可通过瘦体重损失减轻和经由NF-κ β的靶向抑制的骨矿物质密度来影响肌骨骼健康。而且，在分解代谢、失用或衰老状况中，EPA分别可增加骨骼肌蛋白质合成(如通过mTOR途径所介导)和减少内源性肌肉蛋白酶解(如通过遍在蛋白质-蛋白酶体途径所介导)。含有类似的ω-3脂肪酸的营养组合物可导致瘦体重被保留，这可以给潜在的骨提供增强装载(tonic loading)和作为骨转换的成骨刺激物起作用以使得骨折风险最小。[0086]但是，通常的《_3脂肪酸由于感官性质不佳其使用是有限的。在这种方式中，?_3脂肪酸不具有称心的味道或气味，对食用者的吸引カ较低。如果食用者不喜欢包含?-3脂肪酸的组合物的味道或气味，那么对于食用者保持对包含其的饮食的顺应性将是更困难的。[0087] 申请人:已经出人意料地发现:乳脂肪球膜组分(“MFGM”)可以给老年个体或其它受累于病症或处于病症危险中的个体提供多种健康益处，所述病症包括例如低度炎症、固定/失能、瘦体重损失、骨骼肌细胞膜不稳定、认知減退、关节炎症和关节健康不佳。本领域技术人员将理解:虽然这些病症通常与年老者相关，但是任何年龄的个体可以存在类似的病症。
[0088]更具体而言， 申请人:已经发现:MFGM可调控通常与衰老相关的低度炎症。低度炎症对于年老个体可以尤其是成问题的，因为炎症可増加骨骼肌蛋白质合成的合成代谢阈，因此增加瘦体重产生所需的剂量。低度炎症减轻还可以使得内源性骨骼肌蛋白酶解最小化和通过经由合成代谢营养物降低允许骨骼肌蛋白质合成刺激所需的阈而与合成代谢营养物产生协同作用。用MFGM减轻炎症还可以有助于减轻如与衰老、类风湿性关节炎等相关的关节疼痛。
[0089]施用MFGM也是有利的，因为MFGM可以被选择性地并入骨骼肌中，提供增加的骨骼肌细胞膜稳定性。MFGM所提供的増加的骨骼肌细胞膜稳定性允许整联蛋白介导的信号转导适当地发挥功能。整联蛋白是连接胞外膜和细胞骨架的跨膜蛋白质，因此介导机械力(即抗阻训练)向化学信号的转导。整联蛋白介导的信号转导的损失可导致肌肉功能由于不能维持正常的肌节细胞结构(即肌肉收缩)而进行性损失。參见DevelopmentalBiology338(l):第15-27页(2010)。确实，在老年群体中，营养加锻炼的组合是增加骨骼肌蛋白质合成、增加瘦体重和增强功能运动性的关键刺激物。
[0090]当MFGM与其它功能性合成代谢营养物组合施用时，给个体施用MFGM的益处还可以增加。例如，支链氨基酸如亮氨酸可作为信号转导分子起作用以刺激肌肉蛋白质合成。而且，氨基酸精氨酸在体内提供了多种有益的作用，包括例如调节免疫功能、创伤愈合、激素分泌、血管紧张性、胰岛素敏感性和内皮功能。本领域技术人员将理解:本发明的营养组合物不限于使用亮氨酸和精氨酸，其它功能性营养物也可用干与MFGM组合。
[0091]但是，如上文简单提到的那样，可用于营养组合物以给食用者提供特定营养益处的很多营养物使组合物具有不被希望的味道或气味，使得组合物对食用而言是不吸引人的。其结果是，当食用者由于组合物的感官性质不佳而拒绝摄入组合物时，未达到预期的生物学结果。因此，可以与本公开内容的MFGM —起施用的合成代谢营养物应当以适ロ的方式递送以提供可耐受的物理和感官性质以及増加患者的顺应性。
[0092]亮氨酸是ー种在体内提供有益作用的支链氨基酸。支链氨基酸(“BCAA”)是必不可少的或者是必需的氨基酸，这意味着必须外源性提供BCAA以允许肌肉蛋白质合成。一旦被食用，BCAA、尤其是亮氨酸可作为信号转导分子起作用以刺激肌肉蛋白质合成。可以经由两种机制采用这种信号转导。第一种机制是刺激胰岛素释放，因为亮氨酸是强的促分泌素。第二种机制是更直接的，因为亮氨酸可刺激启动肌肉蛋白质合成的真核诱导因子。作为食品补充剂，还已经发现亮氨酸在老年大鼠中可通过增加肌肉蛋白质合成来减缓肌肉组织的分解。[0093]但是，在营养组合物中提供所有三种BCAA (即亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)是可能的和期望的，因为一种BCAA的大量增加可导致其它两种BCAA的相对缺乏。由于已知BCAA具有不受欢迎的感觉性质，添加类似物如a-HICA以及设计物(designer)或高质量蛋白质如乳清蛋白胶束是一种递送益处、同时改善患者顺应性以及因此提供导致较好生活质量的临床结果以及健康经济优势的有效方法。而且，与免疫调节剂如乳枸杞组合可给具有低度炎症、合成代谢受抑制和免疫衰老的患者(例如年老者或患病或处于疾病风险中的那些)带来协同的益处。
[0094]乳清蛋白是支链氨基酸(例如亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)的最丰富的天然来源之一。因为乳清蛋白的营养性质在这类氨基酸的来源中是最佳的，所以非常期望用于营养组合物。确实，这三种必需氨基酸的组合构成了人体骨骼肌的近1/3，并且在蛋白质合成中发挥重要作用。支链氨基酸还可用于帮助灼伤受害者恢复以及用于力量型运动员的补充。
[0095]更具体而言，乳清蛋白是亮氨酸的最丰富的天然来源(总氨基酸的12-15%重量)，在乳清蛋白中包括约Ig亮氨酸/IOg乳清蛋白胶束。但是，显著改善人蛋白质合成所必需的亮氨酸的量被报道为一次分量(bolus serving)中递送约3g或更多。结果，有必要提供30g以上的乳清蛋白以达到3g亮氨酸。但是，当包括在有效刺激人蛋白质合成的剂量中时，亮氨酸的味道通常是令人不愉快的。确实，亮氨酸的感觉性质包括对食用者而言不受欢迎的苦涩口味。
[0096]照此，由于味道性质，口服营养产品已经受限于它们递送有效量支链氨基酸的能力。例如，现有技术的饮料由于包含乳清蛋白(其提供了不可接受的粘性)或亮氨酸(其提供了不可接受的感官性质)而受到限制。另外，当在中性PH条件下加热时，乳清蛋白倾向于凝胶化。因此，支链氨基酸的饮料应用是非常有限的。而且，由于所要施用的剂量(一次3g或更多)，支链氨基酸的片剂和丸剂递送也是不方便的。
[0097] 申请人:已经出人意料地发现:能够将乳清蛋白胶束与游离氨基酸亮氨酸或其它支链氨基酸组合以产生组合物(例如饮料)用于支持肌肉生长的目的。具体而言，本公开内容的营养组合物可以包含乳清蛋白胶束和显著量的亮氨酸，但是不具有通常与有效刺激人蛋白质合成的亮氨酸剂量相关的苦涩味或异味。因此， 申请人:已经出人意料地发现:在饮料和其它口服营养产品中，乳清蛋白胶束可用作掩蔽物以抵消有异味的氨基酸的苦涩味。虽然本公开内容提及乳清蛋白胶束和亮氨酸的使用，但是本领域技术人员将立即理解，其它支链氨基酸或氨基酸也可用于类似的用途。
[0098]不希望受限于任何理论，据信蛋白质胶束的结构和它们与亮氨酸(或其它有异味的营养物)的相互作用阻止了食用者感受到不受欢迎的苦涩味。照此，通过掩蔽舌头表面上存在的苦味觉受体，乳清蛋白胶束可作为用于阻止特定营养物的不受欢迎的苦涩感受的掩蔽物质起作用。如Noriao Ishibashi模型所示,苦潘味是一种经常引起食物排斥的不受欢迎的味觉感官知觉。对苦涩味的敏感性根据每个特定的人为I至500不等。参见Ishibashi, N.等人，“A Mechanism for Bitter Taste Sensibility in Peptides, ”Agr.Biol.Chem..52，819-827(1988)。
[0099]乳清蛋白胶束是在于非常特定的pH下进行热处理期间通过天然乳清蛋白的自组装而获得的球形(接近天然酪蛋白胶束的规矩形状)单分散微凝胶。乳清蛋白胶束具有独特的特征和性质，包括例如窄的粒度分布且直径为100至900nm和多分散性指数低于0.2，于500nm处测定的稳定10分钟的浊度值(对于4%蛋白质溶液为20至50个吸光度単位)和通过TEM显微镜检查法成像的球形。
[0100]图1说明了可用于本公开内容的胶束的图示，其中乳清蛋白以这样ー种方式进行排列:蛋白质的亲水部分朝向团聚物的外部，蛋白质的疏水部分朝向胶束的内“核”。名称“乳清蛋白胶束”指示基于以下标准与酪蛋白胶束同源:形状、尺寸和变白性质，但是还有乳清蛋白胶束是变性乳清蛋白的球形乳清蛋白微凝胶。在乳清蛋白微凝胶或乳清蛋白胶束中涉及物理和化学相互作用。在图1中，S*表示来自半胱氨酸的可接近的硫羟/活性硫羟形式，S-S表示稳定乳清蛋白胶束的二硫桥。这种能量上有益的构型使得这些结构在亲水环境中具有良好的稳定性。照此，胶束基本上由变性乳清蛋白的球形团聚物组成。胶束的特征特别地是它们的规则球形。
[0101]由于它们的双重性质(亲水性和疏水性)，蛋白质的这种变性状态显示允许与疏水相如脂肪滴或空气和亲水性相相互作用。因此，乳清蛋白胶束具有完美的乳化和发泡性质。
[0102]胶束可以具有极尖的粒度分布，以便所产生的胶束有80%以上将具有小于I微米、优选IOOnm至900nm、更优选100-770nm、最优选200-400nm的尺寸。不希望受限于理论，据认为:在胶束形成期间，胶束达到“最大”尺寸，这是因为胶束的总静电荷排斥任何另外的蛋白质分子，以至于胶束的尺寸不能再生长。这导致了窄的粒度分布。
[0103]本公开内容的乳清蛋白胶束可以通过以下文献中描述的方法来产生:国际申请PCT/EP2007/052877,于 2007 年 3 月 26 日提交；国际申请 PCT/EP2007/052900，于 2007 年3月27日提交；和美国序列号12/280,244，于2008年8月21日提交，这些文献各自的整体内容引入本文作为參考。采用这些申请中描述的方法的优点是:由此制备的乳清蛋白胶束在形成期间没有进行任何导致粒度下降的机械应力，这与本领域已知的常规方法是相反的。作为代替，所述方法引起乳清蛋白在热处理期间在没有剪切的情况下自发胶束化。但是，本领域技术人员将理解，胶束可以通过除上文提及的申请中描述的方法以外的方法进行制备。
[0104]任何可购买获得的乳清蛋白分离物或浓缩物都可用于获得乳清蛋白胶束。例如，通过本领域已知的任何用于制备乳清蛋白的方法获得的乳清蛋白以及由此制备的乳清蛋白级分或蛋白质如(6-乳球蛋白、a-乳白蛋白和血清白蛋白。特别地，作为干酪生产的副产物获得的甜乳清、作为酸性酪蛋白生产的副产物获得的酸乳清、通过乳的微滤获得的天然乳清或作为凝乳酶酪蛋白(rennet casein)生产的副产物获得的凝乳酶乳清(rennetwhey)都可以用作乳清蛋白。乳清蛋白可以来自单ー来源或来自任意来源的混合物。但是，本领域技术人员将理解，本公开内容不限于来自牛类动物来源的乳清分离物，而是涉及来自所有哺乳动物种属如绵羊、山羊、马和骆驼的乳清分离物。
[0105]乳清蛋白提供的其它健康益处包括在儿童、成人或老年人中增强肌肉发育和构建以及肌肉維持、增强免疫功能、改善认知功能、控制血糖以便它们适于糖尿病、体重管理和饱腹感、抗炎作用、创伤愈合和皮肤修复、降低血压等。
[0106]因此， 申请人:已经发现:乳清蛋白胶束可用于掩蔽支链氨基酸如亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸的不佳味道性质。在这种方式中，本公开内容的营养组合物可以给个体提供功能性营养物，同时对于个体的食用而言是所期望的。[0107]在另一项实施方案中，α-羟基己酸(“HICA”)可用作亮氨酸的适口的替代物。a-HICA(还已知为leucic acid)是亮氨酸代谢的产物，天然发生在多种发酵蛋白质产物(例如干酪、酒、大豆酱油等)中。a-HICA对于个体可以是有利的，因为它可有助于使肌肉组织的合成代谢最大化和使肌肉组织的分解代谢最小化。
[0108]特别地， 申请人:已经发现:由于味道性质以及互补的代谢益处，α -HICA可递送较优的益处。例如，a-HICA是具有直接与蛋白质合成相关的合成代谢益处的亮氨酸代谢物。因为a-HICA是亮氨酸代谢物，它将提供多种与上文记载的有关亮氨酸的益处相同的益处。但是，与亮氨酸不同，a-HICA没有食用者所感知到的相同的令人不愉快的苦涩味，因此用作亮氨酸的适口的替代物。
[0109]在一项实施方案中，α-HICA可以以约125mg至约625mg/100g营养组合物的量提供，假定这样的实施方案:其中营养组合物包括1，600克并且是成人的完全日饮食。a -HICA还可以以约200mg至约500mg/100g营养组合物或约300mg/100g营养组合物的量提供。在另一项实施方案中，营养组合物可以包含足以提供约2g至约IOga-HICA/天或约4g至约8g或约6g的量的a -HICA。
[0110]与BCAA相似，其它氨基酸也可以提供代谢益处。例如，精氨酸是被分类为半必需或条件必需氨基酸的一种α-氨基酸，这取决于个体的发育阶段和健康状态。精氨酸在体内具有多种作用，其中包括调节免疫功能、创伤愈合、激素分泌、血管紧张性、胰岛素敏感性和内皮功能。照此，精氨酸可用作用于年老者或需要这类益处的个体的营养组合物中的功能性合成代谢营养物。
[0111]精氨酸经由一氧化氮合酶(“N0S”)被代谢为瓜氨酸和一氧化氮(“NO”)。但是，个体所食用的精氨酸中仅有一部分保持可用于代谢为NO。所摄入的精氨酸有多至60%在进入循环(在循环中，任何剩余的精氨酸可以被代谢为瓜氨酸和NO)之前在肝脏中被精氨酸酶代谢。因此，要求摄入大量富含精氨酸的食品补充剂以给需要其的个体提供有效量的精氨酸。这限制了精氨酸用于营养组合物的有用性。另外，与亮氨酸类似，精氨酸多少有些无吸引力的感官性质。
[0112]精氨酸的另一个供选来源是来自氨基酸瓜氨酸的内源性产生精氨酸。该途径贡献了总体精氨酸产生的约20%。瓜氨酸是L-精氨酸的前体，在肠中产生。正如精氨酸转化为瓜氨酸和NO那样，L-瓜氨酸在线粒体中经由脲循环的一部分转化为精氨酸。循环L-瓜氨酸的大部分在肾脏中转化，肾脏由具有高代谢活性的组织组成。照此，血流中循环的L-瓜氨酸首先转化为精氨酸，然后在细胞中转化为瓜氨酸和NO。而且，瓜氨酸进入循环而不被肝脏代谢，在肾脏中几乎完全被转化为精氨酸。因此，需要较少量的瓜氨酸来给身体体内提供有效量的精氨酸。而且，瓜氨酸或瓜氨酸前体的摄入因此能够提供多种与摄入精氨酸相同的益处，包括例如调节免疫功能、创伤愈合、激素分泌、血管紧张性、胰岛素敏感性和内皮功能，但是采用较少的量。
[0113]显著地，L-瓜氨酸向精氨酸的转化连续发生，只要L-瓜氨酸在血流中循环。其结果是，循环L-瓜氨酸使得随时间推移能够维持升高浓度的精氨酸。因此，施用L-瓜氨酸可用作精氨酸的替代物以克服精氨酸的缺陷，包括例如不佳的感官性质。
[0114]而且，巨噬细胞可以直接将瓜氨酸转化为精氨酸并保持巨噬细胞杀死侵入细胞的能力。确实，据认为:通过巨噬细胞将瓜氨酸转化为精氨酸使一氧化氮产生被延长。这转而可降低个体中的炎症水平以及感染对合成代谢的不利作用。减轻炎症的ー个益处是增加胰岛素敏感性，后者导致合成代谢增加。
[0115]Guadagni和Biolo指出:在患有炎症的个体(例如年老者或患病个体)中可能部分地需要另外的蛋白质以维持精氨酸和谷氨酰胺的水平。參见Guadagni和Biolo, “Effects of inflammation and/or inactivity on the need 1r dietaryprotein, ”Curr.0pin.Clin.Nutr.Metab.Care, 12 (6):617-22 (2009 年 11 月)。瓜氨酸可用于维持精氨酸水平。另外，它可有助于维持谷氨酰胺水平，因为来自外源性提供的瓜氨酸的反馈信号将减少小肠中谷氨酰胺向瓜氨酸的转化。这将降低对肌肉分解代谢以提供用于身体功能的精氨酸和谷氨酰胺的需要。
[0116]进ー步可能的是，瓜氨酸可改善进行有限量锻炼和/或物理治疗的年老者的瘦体重維持。已经证明瓜氨酸在营养不良的老年动物中具有合成代谢作用。老年群体中的合成代谢信号通常是向下调节的。添加瓜氨酸将很大地增强该信号。这种从体育活动恢复的改善将允许加速地从归因于衰老的无活动恢复。而且，改善的瘦体重保护将有助于维持代谢内稳态和功能性流动性，骨量密度的保护可降低骨折的风险，因而导致改善生活质量和节约健康护理成本。基于物理治疗期数目減少和返回至完全独立生活和返回工作更快，还可以实现护理成本的降低。
[0117]照此， 申请人:已经发现:可以在营养组合物中提供瓜氨酸以提供有利的体内作用以及与精氨酸相比改善的感官性质。在一项实施方案中，瓜氨酸可以以约62mg至约315mg/100g营养组合物的量提供，假定这样的实施方案:其中营养组合物包括1，600克并且是成人的完全日饮食。瓜氨酸还可以以约IOOmg至约200mg/100g营养组合物或约250mg/100g营养组合物的量提供。在另ー项实施方案中，营养组合物可以包括足以提供约
0.5g至约IOg瓜氨酸/天或约Ig至约5g或约3g的量的瓜氨酸。
[0118]因此，本权利要求的营养组合物可以包含单独或与提供另外体内功能性作用的合成代谢营养物组合的MFGM。这些成分组合可以提供上文所述的益处以及通过直接(例如MFGM、支链脂肪酸)或间接(例如瘦体重和随后强度的増加可増加可动性，因而导致増加骨矿物质密度、认知健康、功能和生活质量等)作用于骨骼肌细胞膜而提供骨和关节健康益处。
[0119]本公开内容可以提供包含约0.0lg至约20g/100g营养组合物的量的MFGM的营养组合物。在一项实施方案中，营养组合物包含约Ig至约15g/100g营养组合物或约5g至约10g/100g营养组合物。在另ー项实施方案中，营养组合物包含基于营养组合物的总蛋白质重量计约0.1%至约20%的量的MFGM。在一项实施方案中，营养组合物包含基于营养组合物的总蛋白质重量计约1.0%至约15%或者基于营养组合物的总蛋白质重量计约5%至约10%的量的MFGM。
[0120]本发明的营养组合物的MFGM可以来源于选自如下的来源:酪乳、酪乳级分、脱脂酪乳、脱乳糖酰基化酪乳、通过微滤或超滤获得的酪乳级分、由乳清蛋白浓缩物回收的级分、甜乳清、酸乳清、乳清稀奶油(wheycream)或来自含磷脂乳清的脂肪相关级分。在ー项实施方案中，MFGM来源于选自牛类动物、水牛、马、山羊、人乳或其组合的乳来源。
[0121]人乳脂肪球膜蛋白质组成仍然是大量未知的，虽然它占总乳蛋白含量的2-4%。零 JAL btephama Quaranta %:入,uHuman proteome enhancement: High-recoverymethod and improved two dimensional map of colostral fat globule membraneproteins, Electrophoresis, 22,第1810-1818页(2001)。本公开内容包括占组合物总蛋白质的0.1%至20%的量的人MFGM。
[0122]在哺乳动物乳中，脂肪相通常为约40g/L，主要由甘油三酯(总脂肪的96%)、甘油二脂(总脂肪的2%)和复合脂质(总脂肪的1%)组成。乳腺细胞(ma_ary alveolar cell)的光面内质网中合成的甘油三酯合并成大液滴，后者进入细胞的顶端质膜。然后，脂质小滴推向乳腺上皮细胞的膜并在其中进行性地变为被包封的。这些膜(当它们被细胞泌出时在乳脂质周围萌出)命名为乳脂肪球膜。乳脂肪球膜含有特定的糖蛋白如乳铁蛋白、黏蛋白、乳粘素和黄嘌呤氧化酶以及复合极性脂质如甘油磷脂和鞘脂。这些组分中的多种在人乳中存在的浓度比在牛乳中高得多。
[0123]MFGM还可以包括选自如下的组分:鞘膦脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、神经节苷脂、黏蛋白1、黄嘌呤-氧化酶/脱氢酶、高碘酸希夫、CD36、嗜乳脂蛋白、adipophilin、PAS6/7、脂肪酸结合蛋白、乳铁蛋白、lactaldherin、肽ETTVFENLPEK、肽 SFQLFGSPPGQR、肽 GSNFQLDQLQGR、肽 FQFIQVAGR597、肽 IFIGNVNNSGLK、肽INLFDTPLETQYVRJji TPLPLAGPPR、肽 EGQEQEGEEMAEYR、肽 SELLVDQYLPLTK 或其组合。
[0124]富含MFGM的各种成分是可购买获得的。MFGM可存在于奶油(cream)、酪乳和全脂乳中。对于产品开发应用，酪乳级分是最经常使用的来源，这是因为它具有相对高浓度的MFGM组分。可购买获得的酪乳产品的实例包括来自Land O’ Lakes, Inc.丽的酪乳(产品编号26048)、来自Fonterra Cooperative Group(奥克兰，新西兰)的酪乳蛋白质浓缩物级分；衍生自来自Fonterra Cooperative Group Ltd.(奥克兰，新西兰)的MFGM 的富含憐脂的级分；来自 Biillinger Butterei (Bill I ingen,比利时)、Foster FarmsDairy (Modesto, California)> Dairy America Inc.(Fresno, California)> Dairy Farmersof America (Kansas City, MO)、First Milk Ingredients Limited, Paisley, UK 和 LabanUp products of Gulf&SafaDairies, United Arab Emirates 的酪乳。
[0125]但是，富含MFGM的乳清蛋白级分也是可购买获得的。其实例包括LACPRODAN? MFGM-10,它是 Arla Food Ingredients amba(丹麦)生产的富含MFGM的乳清蛋白级分。该材料的其它实例可以包括来自Ingredia Lacto prosperiteAG (Ingredia SA, Arras France)和来自任意供应商的 Promilk602E (含 MFGM)(至少 1.5%的MFGM组分以能够调节MFGM相对于总蛋白质的量)。
[0126]根据营养组合物中的乳清蛋白/酪蛋白比例(50/50、70/30)，基于酪蛋白或基于乳的MFGM的一个来源如酪乳或Promilk602E可以以该比例与乳清蛋白混合。而且，MFGM可包含蛋白质、神经节苷脂、磷脂或其组合。
[0127]在一项实施方案中，本公开内容的营养组合物包含至少一种益生菌。益生菌与宿主的第一种相互作用在肠粘膜的水平上发生。已经广泛地证明益生菌保护宿主对抗感染和潜在地改善特定疾病结果。益生菌菌株选择的关键标准包括它们粘附于肠粘膜的能力。这显示是阻断病原体进入和调节保护性免疫功能的必要条件。
[0128]在检查牛乳脂肪球膜与肠上皮细胞(IEC)相互作用的体外研究中， 申请人:破裂了MFGM。虽然在完整膜的级分中没有直接检测到细菌，但是通过超声使膜破裂导致了 IEC培养物的污染。细菌显示来自于MFGM，而不是来自于IEC培养物。对此的证据是，牛MFGM的电子显微照片揭示链中存在细菌球菌(参见图4)。不希望受限于理论， 申请人:相信，通过与细菌和/或其组分结合或将其包封在内，乳脂肪球膜可帮助将微生物组分转运通过胃肠系统，确保它们递送至未断奶新生儿的粘膜组织的适当位置并且与乳脂肪球膜中的其它因子一起调节免疫过程。
[0129]假定MFGM与益生菌的联合导致采用单独的益生菌或MFGM所观察到的有益作用增强(协同)。在机械学上，可以例如假定，MFGM是食用者的显著的脂质来源，并且某些细菌可以增加脂质吸收中涉及的分子的表达。跟随而来的是，通过给营养组合物补充益生菌和MFGM应当能够在本发明的营养组合物的食用者中产生类似的有益作用。益生菌可以在添加至组合物之前与MFGM预混合或者两种配制物(益生菌、MFGM)可以单独地加入本公开内容的营养组合物中。
[0130]益生菌可以以等同于IO3至1012cfu/g干组合物的量存在于营养组合物中。细菌可以使用活的、灭活的或死的或甚至可以作为片段如DNA或细胞壁物质存在。换言之，配制物所含的细菌的量以等同的细菌菌落形成单位表达，不管它们全部或部分是活的、灭活的、死的或片段的。优选地，益生菌以等同于IO7至1012cfu/g干组合物的量存在.[0131]益生菌细菌菌株可以是具有已经确立的益生菌特征的任意乳酸菌或双歧杆菌属(Bifidobacteria)。本公开内容的益生菌可以是已经或能够来自于所分泌的乳、优选人乳或者已经或能够在其中找到、提取出或分离的任意益生菌细菌或益生菌微生物。适宜的益生菌乳酸细菌包括鼠李糖乳杆菌ATCC53103(可特别从Valio Oy of Finland以商标LGG获得)、鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724、罗伊氏乳杆菌ATCC55730和罗伊氏乳杆菌DSM17938 (可从Biogaia获得)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum) VR1003和副干酪乳杆菌CNCM1-2116、约氏乳杆菌CNCM 1-1225、瑞士乳杆菌CNCM 1-4095、短双歧杆菌CNCM 1-3865、长双歧杆菌 CNCM 1-2618。
[0132]适宜的益生菌双歧杆菌属菌株包括长双歧杆菌ATCC BAA-999 (日本MorinagaMilk Industry C0.Ltd.以商标BB536出售)、Danisco以商标Bb_03出售的短双歧杆菌菌株、Morinaga以商标M-16V出售的短双歧杆菌菌株和Institut Rosell (Lallemand)以商标R0070出售的短双歧杆菌菌株。特别优选的双歧杆菌菌株是乳双歧杆菌CNCM 1-3446，其可以从丹麦的Christian Hansen Company以商标Bb12获得。可以使用适宜益生菌乳酸细菌与双歧杆菌的混合物。
[0133]本公开内容的MFGM和益生菌可以在生物学水平下一起作用。具体而言，MFGM可增强或促进益生菌的生物学作用。在一项实施方案中，MFGM使得益生菌具有其在没有MFGM存在时将不具有的生物学作用。在一项实施方案中，MFGM和益生菌可具有协同作用，所述协同作用在于益生菌的有利的生物学作用将被增加。这类生物学作用可以包括对免疫系统和/或肠成熟的作用、抗炎作用的促进和/或炎症的减轻。
[0134]在一项实施方案中，本公开内容的营养组合物包含能够与益生菌表面结合的蛋白质。照此，本公开内容的营养组合物可以含有对于婴幼儿而言不多于3.7或2.0g/100kcal或者1.8至2.0g/100kcal或者对于成人而言至多10g/100kcal的量的蛋白质源。在一项实施方案中，营养组合物被配制用于成人，其包含约2至8g/100kcal或约4至6g/100kcal或约5g/100kcal的量的蛋白质源。本公开内容的组合物中的蛋白质(例如来自乳清、酪蛋白或其组合)的来源和类型(即不源于MFGM的蛋白质含量)不被认为对于本公开内容而言是关键的，条件是满足必需氨基酸含量的最低要求和条件是确保令人满意的生长。但是，在一项实施方案中，优选的是，多于50%或多于60%重量的蛋白质源是乳清(因此确保最佳的平衡氨基酸分)。因此，可以使用基于乳清、酪蛋白或其组合的蛋白质源以及基于大豆的蛋白质源。就乳清蛋白而言，蛋白质源可以基于酸乳清、甜乳清或其组合，其可以包括预期比例的a-乳白蛋白和乳球蛋白。
[0135]在一项实施方案中，蛋白质源基于改性甜乳清。甜乳清干酪制备中容易获得的副产物，其经常用于制备基于牛乳的婴幼儿配方产品。但是，甜乳清包含不合需要地富含苏氨酸且色氨酸含量贫瘠的组分，其称为酪蛋白-糖-巨肽(caseino-glyco_macropeptide，“CGMP”)。从甜乳清中除去CGMP得到苏氨酸含量接近于人乳的苏氨酸含量的蛋白质。然后，这种改性的甜乳清可以用在其自身中含量低的那些氨基酸(主要是组氨酸和色氨酸)进行补充。从甜乳清中除去CGMP的方法在EP880902中有记载。采用改性的甜乳清作为蛋白质源中的主要蛋白质使得所有必需氨基酸以1.8-2.0g/100kcal的蛋白质含量被提供。已经在动物和人研究中证明这类蛋白质源具有与具有高得多的蛋白质含量/IOOkcal的标准的采用乳清的蛋白质源相当的蛋白质效率比、氮消化率、生物学价值和净蛋白质利用率以及导致令人满意的生长，尽管它们的蛋白质含量降低。如果使用改性甜乳清作为蛋白质源，则优选用其量为0.1至1.5%重量的蛋白质源的游离组氨酸进行补充。
[0136]蛋白质可以是完整的、水解的或其组合。可能期望供应部分水解的蛋白质(水解度为2%至20%)，例如对于据信处于出现牛乳过敏的危险的个体而言。如果需要水解蛋白质，则水解方法可以酌情按照本领域已知的那样进行。
[0137]例如，乳清蛋白水解物可以通过一步或两步步骤使乳清级分进行酶促水解来制备。就广泛水解的蛋白质而言，可以使用Alcalase2.4L (EC940459)、然后使用Neutrase0.5L(可获自Novo Nordisk Ferment AG)、然后使用胰酶制剂于55°C使乳清蛋白进行三重水解。或者，对于水解较少的蛋白质，可以如EP322589中所述使用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰酶制剂或其组合使乳清进行两阶段水解。如果用作原料的乳清级分基本上不含乳糖，则发现蛋白质在水解过程中遭受少得多的赖氨酸阻断。这使得赖氨酸阻断的程度能够从以总赖氨酸重量计约15%减少至以赖氨酸重量计少于约10% ;例如以赖氨酸重量计约7%，这极大地提高了蛋白质源的营养价值。在本公开内容的一项实施方案中，MFGM配制物进行相同的蛋白水解处理。
[0138]本公开内容的营养组合物可以含有碳水化合物源。可以使用在营养组合物中常规发现的任何碳水化合物源，例如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉及其混合物，虽然优选的碳水化合物源是乳糖。在一项实施方案中，碳水化合物源贡献营养组合物总能量的35%至60%。
[0139]除了来自MFGM组分的脂质外，本公开内容的营养组合物还可以含有脂质源。脂质源可以是适用于营养组合物的任何脂质或脂肪。脂肪源包括但不限于高油酸向日葵油和高油酸红花油。也可以加入必需脂肪酸亚油酸和a-亚麻酸，同样可加入少量的包含大量预制的花生四烯酸和二十ニ碳六烯酸的油，诸如鱼油或微生物油。总体而言，脂肪含量优选是贡献营养组合物总能量的约10%至约10%的量。
[0140]在一项实施方案中，营养组合物还包含《_3脂肪酸源。《_3脂肪酸源可以选自鱼油、磷虾、含有《_3脂肪酸的植物来源、亚麻子、核桃、海藻或其组合。《_3脂肪酸可以选自a-亚麻酸(“ALA”)、二十ニ碳六烯酸(“DHA”)、二十碳五烯酸(“EPA”)或其组合。[0141]在一项实施方案中，营养组合物还包含至少一种核苷酸，所述核苷酸选自脱氧核糖核酸(“DNA”)亚单位、核糖核酸(“RNA”)亚单位、DNA和RNA的多聚形式、酵母RNA或其组合。在一项实施方案中，至少一种核苷酸是外源性核苷酸。
[0142]在一项实施方案中，营养组合物还包含植物营养素，所述植物营养素选自黄烷类物质、有关酹化合物(allied phenolic compounds)、多酹化合物、職类化合物、生物碱、含硫化合物或其组合。植物营养素可以选自类胡萝卜素、植物留醇、槲皮素、姜黄素、柠檬苦素或其组合。
[0143]在一项实施方案中，营养组合物还包含蛋白质源，如上文所讨论那样。蛋白质源可以选自基于饮食的蛋白质、基于植物的蛋白质、基于动物的蛋白质、人工蛋白质或其组合。基于饮食的蛋白质可以是酪蛋白、酪蛋白酸盐、酪蛋白水解物、乳清、乳清水解物、乳清浓缩物、乳清分离物、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物或其组合。基于植物的蛋白质可以是大豆蛋白质、豌豆蛋白质、卡诺拉蛋白、小麦蛋白和分级的小麦蛋白、玉米蛋白质、玉米醇蛋白、稻蛋白质、燕麦蛋白质、马铃薯蛋白质、花生蛋白质、青豆粉、绿豆粉(green bean powder)、螺旋藻、衍生自蔬菜、豆、荞麦、滨豆、pulses的蛋白质、单细胞蛋白质或其组合。在一项实施方案中，蛋白质源贡献营养组合物总能量的15%至35%。
[0144]在一项实施方案中，营养组合物还包含益生菌，如上文所讨论的那样。所述益生菌选自气球菌属、曲霉属、拟杆菌属、双岐杆菌属、念珠菌属、念珠菌属、德巴利酵母属、肠球菌属、梭杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、明串珠菌属、蜜蜂球菌属、微球菌属、毛霉属、酒球菌属、片球菌属、青霉属、消化链球菌属、毕赤酵母属、丙酸杆菌属、Pseudocatenulatum、根霉属、酵母属、葡萄球菌属、链球菌属、球拟酵母属、魏斯氏菌属、非复制微生物或其组合。
[0145]在一项实施方案中，营养组合物还包含氨基酸，所述氨基酸选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、羟脯氨酸、羟丝氨酸、羟酪氨酸、羟赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、牛磺酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸或其组合。
[0146]在一项实施方案中，营养组合物还包含抗氧化剂，所述抗氧化剂选自虾青素、类胡萝卜素、辅酶QlO ( “CoQIO” )、类黄酮、谷胱甘肽、Goji (枸杞属)、橙皮苷、乳枸杞、木酚素、叶黄素、番茄红素、多酚、硒、维生素A、维生素C、维生素E、玉米黄质或其组合。
[0147]在一项实施方案中，营养组合物还包含维生素，所述维生素选自维生素A、维生素BI (硫胺)、维生素B2 (核黄素)、维生素B3 (尼克酸或烟酰胺)、维生素B5 (泛酸)、维生素B6 (吡哆醇、吡哆醛或吡多胺或吡哆醇盐酸盐)、维生素B7 (生物素)、维生素B9 (叶酸)和