一种用于抑制大菱鲆迟缓爱德华氏菌病的中药组合物的制作方法【技术领域】。[0002]迟缓爱德华氏菌病是危害最大的细菌性鱼病之一，其病原迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是一种革兰氏阴性肠道病原菌，感染宿主范围广，在水产养殖生物中，该菌是鱼类(鳗、鲇、鲆等)、两栖类(蛙)、爬行类(鳖、鳄鱼)的重要致病菌，是水产养殖中最常见的传染病之一，影响了养殖生物的健康并对水产养殖业危害巨大。大菱鲆是当今世界水产养殖行业的主要品种，产生了巨大的经济和社会效益，近年来，因迟缓爱德华氏菌病流行给大菱鲆养殖业造成了巨大的经济损失。[0003]国内对迟缓爱德华氏菌病的治疗主要是依靠抗生素，如磺胺类药物和四环素等。随着抗生素的大量使用，现在面临的问题是抗药性的菌株越来越多，而且还带来了宿主对于药物的副作用以及引起的环境污染的问题，因此抗生素的作用也越来越受到限制。由于迟缓爱德华氏菌具有较多的血清型，LPS的抗原结构复杂，目前还没有一种能够针对所有不同的血清型的、经济适用的迟缓爱德华氏菌的LPS疫苗。中草药具有价廉、低毒、副作用小、不易产生抗药性等特点，药中某些成分不仅具有抗菌作用，而且还有免疫作用，能改善机体的免疫状态，提 高自身抗病能力。
[0004]本发明的目的是提供一种用于抑制大菱鲆迟缓爱德华氏菌病的中药组合物，从而弥补现有技术的不足。[0005]本发明首先提供一种中药组合物，该药物的原料药由五倍子、石榴皮、大青叶、地锦草、黄芩、艾叶和蒲公英组成，其用量在下述范围都有较好的疗效:五倍子100~300重量份、黄岑50~150重量份、大青叶100~300重量份、蒲公英100~300重量份、石槽皮50~150重量份、地锦草100~300重量份。[0006]优选的原料药重量配比为:五倍子200重量份、黄岑100重量份、大青叶200重量份、蒲公英200重量份、石槽皮100重量份、地锦草200重量份。
[0007]本发明的中药组合物制备成制剂，制备方法如下:
[0008]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加8~12倍量水煎煮2~4次，每次加煎煮0.5~1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至料液比为1:1~2的浓缩液，即得。
[0009]进一步优选的制备工艺为:
[0010]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加10倍量水煎煮3次，每次加煎煮1.0小时，滤过，合并滤液，浓缩至料液比为1:1的浓缩液，即得。
[0011]以上组成是按照重量份作为配比的，在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或减少,但各组成之间的生药材重量配比比例不变。
[0012]本发明中药组合物可以在抑制大菱鲆迟缓爱德华氏菌病的药物中应用。
[0013]本发明为纯中药制剂，是对大菱鲆的迟缓爱德华氏菌病具有较好的抑制效果，且无毒、无污染，不产生耐药性，价格低廉，值得开发利用。

[0014]本发明所使用的五倍子功能敛肺降火、涩肠止泻、收敛止血、收湿敛疮，主治鱼烂腮、白皮、赤皮、疖疮等。黄芩功能清热燥湿、泻火解毒、止血，主治鱼烂鳃、赤皮、肠炎、出血等。大青叶功能清热解毒、凉血消斑，主治热病发斑、痈肿、丹毒等。蒲公英功能清热解毒、消肿散结、利尿通淋，主治疮毒、目赤等。石榴皮功能涩肠止泻、止血、杀虫，主治泻痢、便血、脱肛、虫积等。地锦草功能清热解毒、凉血止血，主治鱼肠炎、烂鳃、痈肿恶疮等。而且，其用量如下:五倍子100~300重量份、黄岑50~150重量份、大青叶100~300重量份、蒲公英100~300重量份、石榴皮50~150重量份、地锦草100~300重量份。上述的组分即配比，一方面保证能够对大 菱鲆迟缓爱德华氏菌病具有预防、治疗效果；而另一方面还可以保证在使用期间不会影响大菱鲆对饵料的摄取，不会降低生长速率。
[0015]下面列举实施例，进一步说明本发明，各实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明:
[0016]实施例1
[0017]五倍子200g黄岑100g大青叶200g蒲公英200g石槽皮100g地锦草200g
[0018]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加10倍量水煎煮3次，每次加煎煮1.0小时，滤过，合并滤液，浓缩至1000ml，即得。
[0019]实施例2
[0020]五倍子300g黄岑150g大青叶200g蒲公英150g石槽皮100g地锦草100g
[0021]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加12倍量水煎煮2次，每次加煎煮1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至2000ml，即得。
[0022]实施例3
[0023]五倍子100g黄岑50g大青叶300g蒲公英100g石槽皮150g地锦草300g
[0024]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加8倍量水煎煮4次，每次加煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至1000ml，即得。
[0025]实施例4
[0026]五倍子200g黄岑150g大青叶100g蒲公英300g石槽皮50g地锦草200g
[0027]取五倍子、黄芩、大青叶、蒲公英、石榴皮、地锦草，加10倍量水煎煮3次，每次加煎煮1.0小时，滤过，合并滤液，浓缩至1000ml，即得。为进一步验证本发明中药组合物的治疗作用，对迟缓爱德华氏菌病的抑制试验考察:
[0028]1.对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验
[0029](I)细菌培养迟缓爱德华氏菌菌株接种于营养肉汤液体培养基中，置37°C培养24h后，用平板计数法确定菌液浓度，用无菌生理盐水稀释，获得终浓度为6.0X 107cfu/mL的菌液。
[0030](2)抑菌圈测定营养琼脂培养基平板直径约12.0Ocm,培养基厚度约7.0Omm,每个平板上加200 μ L菌液，涂抹均匀，然后用无菌打孔器(直径为6.0Omm)在每个平板上打孔，做好药物标记，最后将100 μ L供试药液加入孔中。35°C培养24小时，测量抑菌圈直径。
[0031](3)试验结果试验结果见表1。
[0032]表1:本发明对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验结果表(η = 8)
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