专利名称：复方胃痛胶囊的质量检测方法复方胃痛胶囊是由五香血藤123. 2g、大果木姜子20g、徐长卿21g、吴茱萸21g、金果榄16. Sg、拳参14g制成胶囊1000粒。制法以上六味，粉碎成细粉，过筛，混勻，加适量辅料制成颗粒，装入胶囊，即得。功能主治苗医旭嘎怡沓痂，替笨挡象江苟给赖拿，精嘎瑶粘拿，江给苟，扎嘎， 蒙杠抡，布兜江苟及，江苟给考巧。中医行气活血，散寒止痛。用于寒凝气滞血瘀所致的胃脘刺痛，嗳气吞酸，食欲不振；浅表性胃炎以及胃、十二指肠溃疡。用法用量饭后服用，一次2 3粒，一日2次；或遵医嘱。规格每粒装0.28g贮藏密封。有效期3年。为了确保复方胃痛胶囊的质量稳定性和疗效，申请人对其质量检测方法进行了研
本发明所要解决的技术问题是提供复方胃痛胶囊的质量控制方法，包括鉴别和含量测定，所制定的质量控制方法能全面有效地控制胶囊制剂的质量，从而确保了胶囊制剂的临床疗效。为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案本发明复方胃痛胶囊的质量检测方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，其中，鉴别包括显微观察，以五香血藤为对照药材、羧甲基纤维素钠为黏合剂、60 90°C石油醚一醋酸乙酯一甲酸的上层溶液为展开剂照薄层色谱法鉴别五香血藤，以大果木姜子为对照药材、环己烷一醋酸乙酯溶液为展开剂照薄层色谱法鉴别大果木姜子，以吴茱萸为对照药材、 环己烷一醋酸乙酯一甲醇溶液为展开剂照薄层色谱法鉴别吴茱萸；含量测定包括以丹皮酚为对照、十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、甲醇一水为流动相、照高效液相色谱法对胶囊中丹皮酚的含量进行测定，以桉油精为对照品、甲基硅橡胶为固定相、照气相色谱法对胶囊中桉油精的含量进行测定。上述鉴别包括如下各项(1)显微观察取本品内容物，置显微镜下观察嵌晶纤维多单个散在，无色，直径25 42 μ m ；(2)五香血藤的薄层色谱鉴别取内容物2 4g，加乙醇溶液浸渍1 3小时后超声处理，滤过，滤液蒸至无醇味，加醋酸乙酯振摇提取后浓缩，作为供试品溶液；另取五香血藤对照药材0. 5 1. 5g，加乙醇溶液超声处理，滤过，滤液同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的高效硅胶GF254薄层板上，以60 90°C石油醚醋酸乙酯甲酸的体积比为 1551的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)大果木姜子的薄层色谱鉴别取内容物2 4g，加乙醇溶液浸渍1 3小时后超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取大果木姜子对照药材 0. 4 0. 6g，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取供试品溶液和对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷醋酸乙酯的体积比为8 2 的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)吴茱萸的薄层色谱鉴别取吴茱萸对照药材0.4 0. 6g，加乙醇溶液浸渍1 3小时后超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇溶液使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取大果木姜子薄层色谱鉴别项下的供试品溶液和吴茱萸对照药材溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷醋酸乙酯甲醇的体积比为19 5 1的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105°C烘至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 具体的，前述鉴别为
(1)显微观察取本品内容物，置显微镜下观察嵌晶纤维多单个散在，无色，直径25 42 μ m ；
(2)五香血藤的薄层色谱鉴别取内容物3g，加80%乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30 分钟，滤过，滤液蒸至无醇味，加醋酸乙酯振摇提取2次，每次IOml，合并醋酸乙酯液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取五香血藤对照药材lg，加80%乙醇溶液IOml超声处理30min， 滤过，滤液同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取供试品溶液和对照药材溶液各10μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的高效硅胶GF254薄层板上，以60 90°C石油醚醋酸乙酯甲酸的体积比为15 5 1的上层溶液为展开剂， 展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)大果木姜子的薄层色谱鉴别取内容物3g，加95%乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加95%乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取大果木姜子对照药材0. 5g，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取供试品溶液和对照药材溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷醋酸乙酯的体积比为8 :2的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)吴茱萸的薄层色谱鉴别取吴茱萸对照药材0.5g，加95%乙醇30ml，浸渍2小时， 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加95%乙醇2ml使溶解，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验吸取大果木姜子薄层色谱鉴别项下的供试品溶液和吴茱萸对照药材溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷醋酸乙酯甲醇的体积比为19 :5 :1的溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105°C烘至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。前述质量检测方法中的含量测定包括如下各项
(1)丹皮酚含量测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(60:40)为流动相；检测波长为274nm，理论板数按丹皮酚峰计算应不低于5000 ；
对照品溶液的制备精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每Iml含0. 02mg的溶液， 即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，取0. 3g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入甲醇IOml，称定重量，超声处理20分钟，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻， 滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即
得；
(2)桉油精含量测定
色谱条件与系统适用性试验以甲基硅橡胶为固定相；涂布浓度为5% ；柱温为80°C，理论板数按桉油精峰计算应不低于1000，桉油精与杂质峰的分离度应符合规定。对照品溶液的制备精密称取桉油精对照品适量，加醋酸乙酯制成每Iml含O.aiig 的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，取2g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入醋酸乙酯10ml，称定重量，超声处理60分钟，再称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入气相色谱仪，测定，即得。由前述含量测定方法测定的每粒胶囊含徐长卿以丹皮酚(C9HltlO3)计，不得少于 0. Hmg ；每粒胶囊含大果木姜子以桉油精(CltlH18O)计，不得少于0. 20mg。为了得到上述技术方案，申请人进行了大量的实验研究 实验一鉴别方法的研究
在试行标准的鉴别中，吴茱萸的薄层色谱鉴别斑点分离不好，故对吴茱萸的薄层色谱鉴别进行研究。另外，原试行标准中金果榄的薄层色谱鉴别斑点分离不好，而研究后发现干扰仍无法消除，薄层鉴别效果不佳，故取消此项鉴别，增加君药五香血藤的薄层色谱鉴另O。同时增加大果木姜子的薄层鉴别。具体研究如下
(1)五香血藤的薄层鉴别取本品内容物及缺五香血藤阴性对照品各3g， 加80%乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸至无醇味，加醋酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并醋酸乙酯液，浓缩至1ml，作为供试品溶液、阴性对照品溶液。另取五香血藤对照药材lg，加80%乙醇溶液IOml超声处理30min， 滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录 VI B)试验，吸取上述三种溶液各10μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的高效硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60 90°C)—醋酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开齐U，展开，取出，晾干，置紫外光灯(2Mnm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照品溶液无干扰。
(2)大果木姜子的薄层鉴别取本品内容物3g，加乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取缺大果木姜子阴性对照品3g，另取大果木姜子对照药材0. 5g，同法制成阴性对照品及对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》一部附录VI B )试验，吸取上述三种溶液各10 μ L，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液， 105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照品溶液无干扰。(3)吴茱萸的薄层鉴别取吴茱萸对照药材0. 5g、缺吴茱萸阴性对照品3g，同鉴另IJ(2)项下的供试品溶液制备方法(加80%乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸至无醇味，加醋酸乙酯振摇提取2次，每次IOml，合并醋酸乙酯液，浓缩至Iml，作为供试品溶液)，制成对照药材溶液及缺吴茱萸阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典 2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液、阴性对照品溶液及鉴别(3)项下的供试品溶液(取胶囊内容物3g，加乙醇30ml，浸渍2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液)各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一醋酸乙酯一甲醇(19:5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液， 在105°C烘至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照品溶液无干扰。实验二含量测定的研究
(1)徐长卿中有效成分丹皮酚的含量测定
照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定，结果如下 1、仪器与试药 HP-1100型HPLC仪(包括二元泵，在线脱气机，二极管阵列检测器、柱温箱、自动进样器、化学工作站等)；丹皮酚对照品(供含量测定用)购于中国药品生物制品检定所，批号为0708-9704，使用前置五氧化二磷干燥器中干燥至恒重；试剂甲醇，色谱纯；水超纯水；其余试剂均为分析纯。2、色谱条件色谱柱Dikma HPLC Column Diamonsi 1 (钻石)C18(250 X 4. 6mm 10 μ 1)(迪马公司)；流动相甲醇一水(60 40)；检测波长274nm ；柱温室温；流速 1. Oml/min ；理论塔板数N按丹皮酚峰计算应不低于5000。在选定的色谱条件下，丹皮酚色谱峰与样品中相邻色谱峰完全分离，分离度大于 1.5，理论塔板数N为5000以上，拖尾因子T在0.95 1.05之间，而阴性无干扰。因此未对丹皮酚含量测定方法学进行考察，仍采用原试行标准。(2)大果木姜子中有效成分桉油精的含量测定
大果木姜子中有效成分桉油的含量测定。参照《国家中成药标准汇编》(中成药地方标准上升国家标准部分内科脾胃分册)第422页“心胃止痛胶囊”含量测定项资料进行试验。1、仪器与试剂岛津GC-14C气相色谱仪，CBM-102色谱工作站。桉油精对照品(供含量测定用)购于中国药品生物制品检定所，醋酸乙酯为分析纯。2、对照品溶液的制备
精密称取桉油精对照品17. 42mg，置IOml容量瓶中，加醋酸乙酯溶解，并稀释至刻度，摇勻，即得桉油精对照品储备液(每Iml中含桉油精1. 74aiig)。再吸取Iml定容至IOml即得。(每Iml中含桉油精0. 1742mg)
3、供试品溶液的制备参照《国家中成药标准汇编》(中成药地方标准上升国家标准部分内科脾胃分册)第422页“心胃止痛胶囊”含量测定项资料进行试验。取装量差异项下的内容物2g，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入醋酸乙酯10ml，称定重量，超声处理 60分钟，再称定重量，用醋酸乙酯补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液，即得。


本发明公开了一种复方胃痛胶囊的质量检测方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定，鉴别包括显微观察，以五香血藤为对照药材的薄层色谱鉴别，以大果木姜子为对照药材的薄层色谱鉴别，以吴茱萸为对照药材的薄层色谱鉴别；含量测定包括以丹皮酚为对照、十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、甲醇－水为流动相、照高效液相色谱法对胶囊中丹皮酚的含量进行测定，以桉油精为对照品、甲基硅橡胶为固定相、照气相色谱法对胶囊中桉油精的含量进行测定，本发明提供了一种复方胃痛胶囊的质量检测方法，可全面有效保证该胶囊制剂的质量稳定性，从而保证该制剂的临床疗效。