专利名称:一种快速的基因表达载体构建连接方法目前,较常 用的基因表达载体构建方法的步骤为(1)酶切基因酶切体系I:含有目的基因的T克隆载体经限制性内切酶消化,酶切体系II :转基因载体经限制性内切酶消化;以含有双酶切EcoR I与xho I位点的T克隆载体及植物转基因载体为例, 酶切体系I如下本发明涉及生物基因克隆表达技术,具体是一种快速的基因表达载体构建连接方法,弥补了现有的基因表达载体构建方法存在的缺陷,其步骤为(1)酶切基因酶切体系Ⅰ含有目的基因的T克隆载体经限制性内切酶消化,酶切体系Ⅱ转基因载体经限制性内切酶消化;(2)回收获得目的基因片段及酶切载体;(3)酶切产物的连接;(4)连接产物的转化;(5)转化产物的鉴定。本发明所述的快速的基因表达载体构建连接方法简单方便、实用性强,替换了凝胶电泳、EB染色等步骤,提高了科研人员的安全性,提高了工作效率,减少了试验环节所需费用,并能够有效地减少试验用EB对水资源等环境的污染。
一种快速的基因表达载体构建连接方法
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