专利名称：一种同时制备牛耳枫总黄酮和总生物碱的工艺的制作方法41^! (.Daphniphyllum calycinum Benth.)为虎皮I南禾斗 Daphniphyllaceae 虎皮楠属植物，主要分布于我过江西、福建、广东、广西、云南等长江以南省区，化学成分主要含有生物碱和黄酮类。在中国和越南北部，牛耳枫作为传统中药，用来治疗哮喘、咳嗽、风湿、 炎症、发热、伤口等疾病。在中国古代，牛耳枫的叶和种子也被用于治疗发梢、炎症及流行性感冒等。在牛耳枫的杀虫活性方面，陈丽丽等研究了牛耳枫对小菜蛾幼虫的拒食活性，生物测定结果表明，牛耳枫茎叶的甲醇粗提物对小菜蛾有较高的拒食活性，24h的非选择性拒食率为92.对％，唐文伟等研究发现牛耳枫茎叶甲醇粗提物对褐飞虱长翅型雌成虫和雄成虫有较好的触杀活性。现有技术中，尚没有同时提取制备牛耳枫总黄酮和总生物碱的方法报道。李晶晶在“牛耳枫活性成分研究”中采用甲醇冷浸，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取物再分别通过硅胶柱层析、凝胶柱层析等方法分离得到单体化合物，该方法提取率低、样品损失较大，不易扩大生产。
本发明要解决的技术问题是提供一种同时制备牛耳枫总黄酮和总生物碱的工艺。本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种同时制备牛耳枫总黄酮和总生物碱的工艺，其特征在于所述工艺是取牛耳枫药材粉碎过10-60目筛，用40-80%乙醇提取2-3次，减压回收试剂，浓缩后得提取物，加水分散，离心，得水溶液和残渣I，残渣I加90-100%乙醇超声溶解，离心，得乙醇溶解液和残渣 II，乙醇溶解液经减压浓缩至无醇味，加稀酸超声溶解，离心，得酸水液和残渣III，残渣III通过聚酰胺树脂分离，酸醇洗脱，洗脱液浓缩干燥得牛耳枫总黄酮；合并上述酸水液和水溶液，浓缩后加碱调PH8-10，通过大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩干燥，得到牛耳枫总生物碱。所述乙醇提取方法可选回流提取、索氏提取、超声提取、微波提取中的一种。所述稀酸选自盐酸、乙酸、硫酸、草酸中的一种，浓度为0. 1%-0. 5%。所述聚酰胺树脂分离步骤中，酸醇为60%_85%体积浓度的乙醇与盐酸水溶液的混合溶液，盐酸浓度为总提取溶剂体积的0. 1-0. 5%。所述大孔吸附树脂选用XAD16、HPD100, HPD300、HPD400等中等极性或非极性树脂。本发明利用黄酮和生物碱在酸液中溶解度的差异同时提取两类成分，提高了原料利用率，且操作简单，具有工业化意义。3下面将结合进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
牛耳枫药材粉碎过60目筛，取1kg，用8L50%乙醇索氏提取2次，每次提取减压回收乙醇，浓缩得到提取物，加水分散，离心得到水溶液和残渣I，残渣I加90%乙醇超声溶解， 离心，得乙醇溶解液和残渣II，乙醇溶解液经减压浓缩至无醇味，加0. 5%草酸超声溶解，离心，得酸水液和残渣III，残渣III通过聚酰胺树脂分离，60%乙醇(含盐酸0. 1%)洗脱，洗脱液浓缩干燥得牛耳枫总黄酮。合并上述酸水液和水溶液，浓缩后加1%氢氧化钠调PH8. 0，通过 HPD300大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩干燥，得到牛耳枫总生物碱。经测定牛耳枫总黄酮中黄酮含量为 78%，牛耳枫总生物碱中生物碱含量为83%。实施例2:
牛耳枫药材粉碎过10目筛，取1kg，用6L70%乙醇微波提取3次，每次提取减压回收乙醇，浓缩得到提取物，加水分散，离心得到水溶液和残渣I，残渣I加95%乙醇超声溶解， 离心，得乙醇溶解液和残渣II，乙醇溶解液经减压浓缩至无醇味，加0.洲硫酸超声溶解，离心，得酸水液和残渣III，残渣III通过聚酰胺树脂分离，85%乙醇(含盐酸0. 5%)洗脱，洗脱液浓缩干燥得牛耳枫总黄酮。合并上述酸水液和水溶液，浓缩后加1%氢氧化钠调ρΗΙΟ.Ο，通过XAD16大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%乙醇溶液洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩干燥，得到牛耳枫总生物碱。经测定牛耳枫总黄酮中黄酮含量为80%，牛耳枫总生物碱中生物碱含量为82%。实施例3:
牛耳枫药材粉碎过20目筛，取lkg，用10L40%乙醇回流提取3次，每次提取减压回收乙醇，浓缩得到提取物，加水分散，离心得到水溶液和残渣I，残渣I加100%乙醇超声溶解， 离心，得乙醇溶解液和残渣II，乙醇溶解液经减压浓缩至无醇味，加0. 3%乙酸超声溶解，离心，得酸水液和残渣III，残渣III通过聚酰胺树脂分离，70%乙醇(含盐酸0. 2%)洗脱，洗脱液浓缩干燥得牛耳枫总黄酮。合并上述酸水液和水溶液，浓缩后加1%氢氧化钠调PH9. 0，通过 HPD400大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩干燥，得到牛耳枫总生物碱。经测定牛耳枫总黄酮中黄酮含量为 79%，牛耳枫总生物碱中生物碱含量为80%。实施例4:
牛耳枫药材粉碎过20目筛，取1kg，用6L80%乙醇超声提取2次，每次提取减压回收乙醇，浓缩得到提取物，加水分散，离心得到水溶液和残渣I，残渣I加90%乙醇超声溶解， 离心，得乙醇溶解液和残渣II，乙醇溶解液经减压浓缩至无醇味，加0. 1%盐酸超声溶解，离心，得酸水液和残渣III，残渣III通过聚酰胺树脂分离，65%乙醇(含盐酸0. 3%)洗脱，洗脱液浓缩干燥得牛耳枫总黄酮。合并上述酸水液和水溶液，浓缩后加1%氢氧化钠调PH8. 5，通过 HPD100大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%乙醇溶液洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收试剂，浓缩干燥，得到牛耳枫总生物碱。经测定牛耳枫总黄酮中黄酮含量为81%，牛耳枫总生物碱中生物碱含量为85%。


本发明公开了一种同时制备牛耳枫总黄酮和总生物碱的工艺，采用乙醇提取，提取液浓缩后加水分散，离心，得水溶液和残渣Ⅰ，残渣Ⅰ经醇溶、离心得醇溶解液和残渣Ⅱ，醇溶解液经浓缩、酸溶、离心，得酸水液和残渣Ⅲ，残渣Ⅲ经聚酰胺树脂分离，酸醇洗脱，浓缩干燥得总黄酮；酸水液和水溶液合并，碱调pH，通过大孔吸附树脂柱，水及乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收试剂，干燥即得总生物碱。采用该方法生产牛耳枫总黄酮和总生物碱，工艺操作简单、能耗低、污染小，且易于工业化生产。