专利名称：分离升麻消旋体a的方法分离升麻消旋体A的方法升麻属(Cimicifuga)的许多种已在中国、韩国和日本医学领域中被用作炎性病症的治疗剂。类似地，含有黑升麻(black cohosh)——植物学上称为总状升麻(Cimicifugaracemosa L. Nutt)(又称为类叶升麻属(Actaea racemosa)-的组合物在美国和欧洲被广泛地用作草药膳食补充品。历史上，印第安妇女将黑升麻用于治疗不适(malaise)、疟疾、风湿病、肾功能异常、咽喉痛、月经不调和与分娩相关的疾病(Blementhal et al.，2000)。在一些亚洲国家，该草药和包括兴安升麻(Cimicifuga dahurica(Turcz.)Maxim.)、升麻(Cimicifuga foetida L.)和大三叶升麻(Cimicifuga heracleifolia Kom.)的升麻属的其他种被用于治疗炎症、发热、头痛、疼痛、咽喉痛和受寒(Foster，1999 ；Kusano,2001 ；Kimet al.，2004)。然而，这些草药的内在作用机理仍有待充分地阐述。黑升麻的生物学活性在过去已进行过研究。在体内，已证实黑升麻提取物以剂量依赖的方式抑制斯普拉-道来(Sprague-Dawley)大鼠体内的抗-IgE-诱导的被动皮肤过敏反应(Kim et al.，2004)。在体外，所述草药提取物在HMC-I人白血病肥大细胞中通过炎症因子(例如PMA和A2387)抑制细胞因子(包括IL_4、IL-5和TNF- a )的转录(Kim etal.，2004)。其他研究也证实了黑升麻提取物对组胺、缓激肽和C0X-2介导的炎症作用的抑制效果(Kim and Kim, 2000) 然而，存在于所述提取物中的活性组分是未知的。升麻消旋体A (Cimiracemate A)为异阿魏酸和3_ (30,40-二轻基苯基)_2_酮-丙醇之间所形成的酯(Chen et al.，2005)。升麻消旋体A为具有1，7_ 二芳基骨架的天然存在的化合物。其他具有这种1，7_ 二芳基骨架的化合物具有显著的生物活性(Roughley&Whiting, 1973)。例如，已有报道称,姜黄素-一种从姜黄(Curcuma longa)中分离的天然色素-能抑制多种类型恶性细胞的生长(Chen et al. , 1999 ；Aggarwal etal. ,2004)并且尤其是在HIV感染的情况下(Vlietinck et al. , 1998)。从益智(AlpinaoxyphylIa)的种子中提取的益智酮B (Itokawa et al. , 1982)具有抗血胆固醇过多和动脉粥样硬化的活性(Ohishi et al. ,2001) o已发现升麻消旋体A在人巨噬细胞中抑制LPS诱导的TNF- a并抑制LPS诱导的MAP激酶活性以及特定转录因子的活化。此外，升麻消旋体A可具有另外的健康益处，其包括活性氧簇清除剂(Burdette et al.，2002)。综合考虑，具有1，7_ 二芳基骨架的化合物(如升麻消旋体A)可具有多种能够通过多细胞依赖性机制而起作用的生物活性。在美国和欧洲，总状升麻的消耗量一直在显著增加。其产品以消费者目前可得的异丙醇和乙醇提取物的一系列制剂和剂量的形式制备。该草药的使用是基于提取物而非单独的生物活性组分。虽然已从总状升麻中分离了一些化合物(包括三萜苷和酚类)，但其生物活性以及在所述提取物中的一致存在性仍待确定(Kennelly et al.，2002)。 另一个经分离的总状升麻组分为23-表-26-脱氧升麻烃(deoxyactein)。该23-表-26-脱氧升麻烃组分目前用作化学标记物以使市售的总状升麻产品标准化。其使用原理为其在提取物中丰富(P印ping，1999)。因此，所述用于总状升麻提取物标准化的化学标记物并非必须是该草药生物活性的代表。升麻属的许多不同种通常均用于治疗炎症；然而，如图10所示，其化学成分在相同分析条件下相当不同。虽然已开发不同的方法以通过使用指纹法区分升麻属种(He etal. ,2006 ；Li et al.，2002)，但该草药化学组分的复杂性和多变性限制了上述方法在种鉴别中的应用因此，非常需要提取并分离升麻消旋体A以随后用作治疗剂。此外，还需要可用于鉴别升麻属成员(例如总状升麻、兴安升麻、升麻和大三叶升麻)的生物活性标记物。理想的是该生物活性标记物还可用于使升麻属种的提取物标准化以用作治疗炎症相关疾病的抗炎剂，并可用于基于每种样品的化学特征而区分种。


本发明提供了用于从升麻属中分离和提取升麻消旋体A的材料和方法。根据本发明，所述经分离的升麻消旋体A可用作治疗性组合物和/或膳食补充品。此外，所述经分离的升麻消旋体A还可用作多个升麻属种的生物活性化学标记物和标准。在一个优选实施方案中，本发明提供了一种用于纯化升麻消旋体A的方法，其包括以下步骤a)提供足够量的升麻属种的原料；b)研磨所述原料；c)将所述经研磨的原料与水性溶剂混合；且d)分离升麻消旋体A。有利地，本发明提供了更高且更一致的从升麻属种中分离的升麻消旋体A的收率。本发明的新分离步骤也更快更方便。本发明提供了经分离的升麻消旋体A以用于治疗，例如不适、疟疾、风湿病、肾功能异常、咽喉痛、月经不调、与分娩相关的疾病、发热、头痛和受寒以及与这些病状相关的症状和/或综合征。此外，本发明提供了可用作抗炎剂的经分离的升麻消旋体A。在另一个实施方案中，本发明使得可区分升麻属的多个种。根据本发明，所述多个升麻属种的提取物产生了升麻消旋体A生物活性的特有化学特性。一方面，根据本发明，升麻消旋体A可用作化学标记物以使市售的总状升麻产品标准化。升麻消旋体A作为化学标记物以使总状升麻产品标准化的用途可能是基于例如升麻消旋体A作为抗炎剂的生物活性。有利地，通过使用本发明的经改进的提取步骤，可区分升麻属的不同种并且可通过使用升麻消旋体A作为化学标记物而使提取物标准化，以用于这些草药或相关产品作为备选治疗法或膳食补充品的潜在生物活性用途。


图I为升麻消旋体A的化学结构。图 2 示出了以(1)100 O、(2)80 20、(3)60 40、(4)40 60、(5)20 80 和
(6)0 100的比率使用Milli-Q-乙醇提取的总状升麻根的色谱图。*表示在不同的提取条件下在所述总状升麻样品中存在升麻消旋体A。该色谱图是通过以下方式获得将所述样品注入反相高效液相色谱中(Lichrospher 100RP C18EC 5 U , 250X4. 6mm ID)并以ImlmiiT1的流速使用15% CH3CN至100% CH3CN梯度洗脱，且检测波长为210nm。
图3示出了通过在⑴室温、(2)50°C和(3) 100°C下使用mi I Ii-Q提取总状升麻根而得到的提取物的色谱图。*表示在不同的提取条件下在所述总状升麻样品中存在升麻消旋体A。该色谱图是通过以下方式获得将所述样品注入反相高效液相色谱中(Lichrospher 100RP C18EC 5 U ,250X4. 6mm ID)并以 Iml mirT1 的流速使用 15% CH3CN至100% CH3CN梯度洗脱，且检测波长为210nm。图4示出了通过超声处理(1)0分钟、(2)5分钟、(3) 10分钟、(4)20分钟和(5)30分钟而使用milli-Q提取的总状升麻根的色谱图。*表示在不同的提取条件下在所述总状升麻样品中存在升麻消旋体A。该色谱图是通过以下方式获得将所述样品注入反相高效液相色谱中(Lichrospher 100RP C18EC 5 U , 250 X 4. 6mm ID)并以 Iml mirT1 的流速使用15% CH3CN至100% CH3CN梯度洗脱，且检测波长为210nm。图5 示出了以(1)1 5(w/v)、(2)l 10 (w/v), (3) I 15(w/v)和(4)1 20 (w/v)的比率使用milli-Q提取的总状升麻根的色谱图。*表示在不同的提取条件下在所述总状升麻样品中存在升麻消旋体A。该色谱图是通过以下方式获得将所述样品注入反相高效液相色谱中(Lichrospher 100RP C18EC 5 U , 250 X 4. 6mm ID)并以 Iml mirT1 的流速使用15% CH3CN至100% CH3CN梯度洗脱，且检测波长为210nm。图6示出了提取溶剂对升麻消旋体A的提取率的影响(n = 3)。实验条件所述草药(2. Og)是通过在室温下超声处理30分钟而进行提取，且该提取重复进行三次。条上方的不同字母表示Tukey检验的显著性差异(p < 0. 05,单因素AN0VA)。图7示出了温度对升麻消旋体A的提取率的影响(n = 3)。实验条件草药量2. Og ；提取时间30分钟；提取溶剂Milli-Q水(10ml)。该提取重复进行三次。条上方的不同字母表示Tukey检验的显著性差异(p < 0. 05,单因素AN0VA)。图8示出了提取时间对升麻消旋体A的提取率的影响(n = 3)。实验条件所述草药(2. Og)是在室温下用Milli-Q水进行提取。条上方的不同字母表示Tukey检验的显著性差异(P < 0. 05，单因素AN0VA)。图9示出了溶剂体积对升麻消旋体A的提取率的影响(n = 3)。实验条件所述草药(2. Og)是在室温下用Milli-Q水提取30分钟。该提取重复进行三次。条上方的不同字母表示Tukey检验的显著性差异(p < 0. 05,单因素AN0VA)。图10A-C示出了兴安升麻、升麻和大三叶升麻的色谱指纹图谱。*表示在所述样品中存在升麻消旋体A。所述色谱图是通过将所述样品注入反相高效液相色谱中(Lichrospher 100RP C18EC 5 U ,250X4. 6mm ID)并以 Iml mirT1 的流速使用 15% CH3CN至100% CH3CN梯度洗脱，且检测波长为210nm。

的干重。提取温度的影响使用三个提取温度(室温、50°C和100°C )研究升麻消旋体A的提取率。将经干燥的总状升麻粉末(2. Og)在各提取温度下用IOml的Milli-Q水超声处理30分钟。每种温度设三个平行实验，且所述提取过程重复进行三次。将所述提取物在4000rpm下离心5分钟并随后通过上文所述的滤纸过滤。然后将得到的滤液冷冻干燥以得到所述提取物的干重。超声时间的影响将总状升麻(2. Og)在室温下用IOml的Milli-Q水进行提取。提取是通过浸溃和/或超声处理5、10、20和30分钟而完成。每种提取时间设三个平行实验，且所述提取过程重复进行三次。将所述提取物在4000rpm下离心5分钟并随后通过上文所述的滤纸过滤。将得到的滤液蒸发并冷冻干燥以得到所述提取物的干重。溶剂与草药比的影响将总状升麻(2. Og)在室温下连续超声处理30分钟进行提取，总状升麻与mi I Ii-Q水的比率为I : 5、1 IOU 15和I : 20(w/v)。每种提取体积设三个平行实验，且所述提取过程重复进行三次。将所述提取物在4000rpm下离心5分钟并随后通过上文所述的滤纸过滤。将得到的滤液蒸发并冷冻干燥以得到所述提取物的干重。定量分析在通过使用反相Lichrospher IOOC18 (250 X 4. 6mm i.d.,5lim)柱的HPLC(Alltech, USA)进行测定前，将所述干燥提取物溶解于甲醇(MeOH)中(25mg/ml)。通过使用ACN(15分钟内25-90% )和Milli-Q水(15分钟内75-10% )的线性梯度洗脱而进行分离。流速为I. Oml/分钟。检测波长和柱温分别设定为210nm和23°C。注射体积为5iU。对运行条件进行优化以得到升麻消旋体A与其他洗脱峰的最佳分离。兴安升麻、升麻和大三叶升麻的提取总状升麻的三个相似物兴安升麻、升麻和大三叶升麻是由PurapharmInternational (H. K.) Ltd提供。将每种草药(2. Og)在室温和超声处理下(30分钟)用40ml的Milli-Q水进行提取。所述提取过程重复进行三次且每种草药设三个平行实验。将所述水性提取物冷冻干燥并随后溶解于MeOH中以获得25mg/ml的最终浓度。所述草药的指纹图谱以及升麻消旋体A的百分比收率是使用如上所述的HPLC-PDA进行测定。统计学分析使用SPSS统计学软件包对数据进行分析。使用Shapiro-Wilk检验对所述提取条件间升麻消旋体A提取率的差异进行了正态性检查，并使用Cochran’ s C检验进行了方差齐性检查。然后使用单因素ANOVA和Tukey检验对其进行比较。在所有情况下，显著性的阈值为5%。以下为示例说明实施本发明的步骤的实施例。提供这些实施例仅用于示例说明的目的，而不应解释为限制性的。实施例I-升麻消旋体A的分离和提取的优化HPLC条件的优化使用根据活性追踪分离和鉴别法，将具有抗炎活性的升麻消旋体A(图I)从总状升麻的水性提取物中分离出。为了对各提取物中的升麻消旋体A定量，得到了范围为0. 15625 M I. 25 u g/u I 的校准曲线(y = 9197. 4x_12. 457，R2 = 0. 9993)。提取条件的优化水醇溶制比的影响总状升麻中升麻消旋体A的百分比收率与提取溶剂中乙醇含量的关系示于图2和6中。如图2所示，升麻消旋体A的峰(标记为* )在乙醇为0% (即100%水)时最高，其随着乙醇含量的增加而明显降低。当所述乙醇含量从0增加至100%时，升麻消旋体A的提取率从I. 36降低至0. 19% (图6)。该结果表明乙醇含量影响了从总状升麻中提取升麻消旋体A，提取效率随所述提取溶剂中乙醇含量的增加而降低。因此，使用水作为进一步研究的提取溶剂。提取温度的影响为了研究温度如何影响升麻消旋体A的提取率，将总状升麻在三种不同热条件下进行提取室温、50和100°C。在图3中，示出了由经优化的HPLC条件所得到的提取物的色谱图。升麻消旋体A的峰(标记为* )在室温时最高，且在温度从室温至50°C并随后至100°C时明显降低(图3)。此外，室温、50和100°C时升麻消旋体A的提取率分别为I. 24、
0.51和0. 11% (图7)。该结果表明温度显著影响升麻消旋体A的提取率(Tukey检测，p<0.05)且升麻消旋体A的提取效率随温度的升高而明显降低。因此，选择室温用于进一步的研究。超声时间的影响通过不同超声时间从总状升麻中提取的升麻消旋体A的百分比收率示于图4和8中。在图4中，升麻消旋体A的峰在所有提取物中均具有相似的强度。超声时间为0、5、10、20和30分钟时，所测定的升麻消旋体A的百分比收率分别为I. 20、0. 96、I. 39、I. 56和
1.34% (图8)。该结果表明超声处理不会明显提高升麻消旋体A的提取率(Tukey检验，p> 0. 05)。溶剂与草药比率的影响 溶剂体积对总状升麻中升麻消旋体A的提取效率的影响是通过以I : 5、1 : 10、I 15和I : 20(w/v)的比率使用milli-Q提取所述草药而测定。该结果显示由I : 15和I : 20 (w/v)得到的升麻消 旋体A的峰强度高于剩余两个比率(图5)。在图9中，升麻消旋体A的百分比收率在总状升麻与水的比率为I : 5、1 IOU 15和I : 20 (w/v)时分别测定为0. 98,0. 93、I. 68和I. 52%。该结果表明总状升麻与水的比率应高于I : 15 (w/v)以得到更高的升麻消旋体A的提取率。实施例2-用于确定升麻属种的种类和生物活性的升麻消旋体A分离和指纹图谱兴安升麻、升麻和大三叶升麻中的升麻消旋体A的测定兴安升麻、升麻和大三叶升麻的参考指纹图谱是通过以下方式测定的在相同的且经优化的提取条件下提取所述草药，并随后进行与黑升麻相同的HPLC设置。该结果显不,如图10所不,兴安升麻不包含升麻消旋体A,而升麻和大三叶升麻包含不同水平的升麻消旋体A。一般而言，通过使用相同的且经优化的提取和HPLC条件，很容易鉴别总状升麻及其相似物——即升麻和大三叶升麻——的草药原料中的所述化合物。实施例3-升麻消旋体A的治疗用途本发明的化合物可用于治疗与感染相关的炎症，其包括但不限于由病毒、细菌、真菌、酵母和其他微生物引起的感染。另外，本发明的化合物可用于治疗由多种促炎因子介导的炎症，所述促炎因子包括但不限于肿瘤坏死因子、干扰素、白细胞介素、白细胞三烯和环
境毒素。本发明的化合物和药物组合物可用于治疗或改善任意疾病、病症或障碍中的炎性症状，在所述疾病、病症或障碍中免疫和/或炎症抑制是有利的。其中本发明的化合物和组合物可用于抑制不想要的免疫反应和炎症的炎性疾病、病症或障碍包括但不限于，关节炎(包括但不限于类风湿性关节炎)，以及其中免疫和/或炎症抑制是有利的其他关节或肌骨骼系统的疾病、病症或障碍。此外，所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症动脉粥样硬化；动脉硬化；动脉粥样硬化性心脏病；再灌注损伤；心脏停搏；心肌梗塞；血管炎性障碍，包括脑血管疾病(中风)；呼吸窘迫综合征；和其他心肺疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制(例如移植物抗宿主疾病和过敏病症)是有利的。此外，所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症消化性溃疡；溃疡性结肠炎、克罗恩病、肠易激综合征、其他炎性肠病和其他胃肠道疾病、病症或障碍，其中免疫炎症抑制是有利的；肝脏纤维化；肝硬化和其他肝脏疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；甲状腺炎和其他腺体疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；肾小球性肾炎以及其他肾脏和泌尿系疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的。此外，所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症创伤后炎症；感染性休克；传染病，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；手术的炎性并发症和副作用，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；骨髓移植和其他移植并发症和/或副作用，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；基因治疗的炎症和/或免疫并发症和副作用，例如由于病毒载体感染而导致；以及与获得性免疫缺陷综合征(AIDS)相关的炎症。此外，所述化合物和组合物还可用于抑制与炎症无关的免疫应答的与巨噬细胞或T细胞相关的方面。所述化合物和组合物能抑制巨噬细胞或T细胞活性，其包括但不限于巨噬细胞的抗原呈递活性、巨噬细胞的细胞因子生成、T细胞的细胞因子生成、T细胞的粘着活性、T细胞的增殖等。因此，所述肽、肽衍生物和组合物可用于抑制体液和/或细胞的免
疫应答 。所述化合物和组合物还可用于通过降低单核细胞和淋巴细胞的量而治疗或改善单核细胞和白细胞增殖性疾病，例如白血病。本发明的化合物和药物组合物还可用于在天然细胞或人造细胞、组织和器官(例如角膜、骨髓、器官、晶状体、起搏器、天然和人造皮肤组织等)的移植情况下预防和/或治疗移植物排斥。所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症超敏反应；过敏反应；哮喘；系统性红斑狼疮；胶原病；和其他自身免疫性疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的。所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症耳炎和其他耳鼻喉疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；皮肤炎和其他皮肤疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；牙周病和其他牙科疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的。此外，所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症后葡萄膜炎；中间葡萄膜炎；前葡萄膜炎；结膜炎；脉络膜视网膜炎；葡萄膜视网膜炎；视神经炎；眼内炎症，例如视网膜炎和囊样黄斑水肿；交感性眼炎；巩膜炎；视网膜色素变性；退行性眼底疾病的免疫和炎性成分；眼外伤的炎性成分、由感染引起的眼部炎症；增生性玻璃体视网膜病变；急性缺血性视神经病；过度瘢痕化，例如在青光眼滤过手术后；对眼部植入物的免疫和/或炎症反应；以及其他免疫和炎症相关的眼科疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的。此外，所述化合物和组合物还可用于治疗或改善与以下疾病相关的炎症自身免疫性疾病和病状或障碍，其中在中枢神经系统(CNS)和任意其他器官中免疫和/或炎症抑制均是有利的；帕金森氏病；帕金森氏病治疗的并发症和/或副作用；AIDS_相关的痴呆复合征(HIV-相关的脑病)；德维克氏病；西登哈姆氏舞蹈病；阿耳茨海默氏病和其他中枢神经系统的退变性疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的；中风的炎性成分；脊髓灰质炎后综合征；精神障碍的免疫和炎性成分；脊髓炎；脑炎；亚急性硬化性全脑炎；脑脊髓炎；急性神经病；亚急性神经病；慢性神经病；格_巴二氏综合征；西登哈姆氏舞蹈病；重症肌无力；脑假瘤；唐氏综合征；亨廷顿氏舞蹈病；肌萎缩性侧索硬化；中枢神经系统(CNS)压迫或CNS创伤或脑血管意外(中风)或CNS的感染或CNS的缺氧-局部缺血的炎性成分；肌萎缩和营养不良的炎性成分；与中枢和周围神经系统的免疫和炎症相关的疾病、病症或障碍，其中免疫和/或炎症抑制是有利的。在又一个实施方案中，本发明的化合物和组合物可用于在已失去其免疫赦免的免疫赦免部位(例如脑、眼和睾丸)处恢复免疫赦免。实施例4-制剂在一个实施方案中，本发明提供了经分离的化合物。如本文所使用的，“经分离的”指的是已从化合物天然可存在于其中的任意环境中分离出的化合物。例如，经分离的升麻消旋体A不会指存在于总状升麻中的升麻消旋体A化合物。在一些优选的实施方案中，本发明的化合物至少有75%纯度、优选至少90%纯度、更优选大于95%纯度并且最优选大于99%纯度(基本上纯净的)。本发明还提供了治疗性或药物组合物，其包含本发明的化合物，所述化合物的形式为可与可药用载体结合。在本文的上下文中，该化合物可为例如经分离的或基本上纯净的。术语“载体”指的是与所述化合物一起给药的稀释剂、佐剂、赋形剂或运载剂(vehicle)。这类药物载体可为无菌液体,例如水和油,包括石油(例如矿物油)、植物油(例如花生油、大豆油和芝麻油)、动物油或合成油。盐水溶液以及葡萄糖和甘油水溶液也可用作液体载体，特别是用于注射用溶液。特别优选的用于治疗或改善中枢神经系统炎症的药物载体是可穿透血/脑屏障的载体。本文所使用的载体不包括以其天然形式存在的天然植物材料。合适的药用赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻、面粉、白垩、硅 胶、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、滑石、氯化钠、经干燥的脱脂乳、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。所述治疗性组合物——如果需要的话——还可包含极少量的润湿剂、乳化剂或PH缓冲剂。这些组合物可采取溶液剂、悬浮剂、乳剂、片剂、胶囊剂、粉剂、缓释制剂等形式。所述组合物可用常规粘合剂和载体(例如甘油三酯)进行配制。合适的药用载体的实例记载于E. W. Martin 的 “Remington, s Pharmaceutical Sciences”。该组合物包含治疗有效量的治疗性组合物与合适量的载体，以便为患者提供合适的给药形式。所述剂型应适合于所述给药的方式。在一个实施方案中，根据常规方法将所述组合物配制为适合于对人类进行局部注射给药的药物组合物。通常，用于局部注射给药的组合物是无菌等渗水性缓冲液中的溶液。需要时，所述组合物还可包含增溶剂和局部麻醉剂(例如利多卡因)以减弱注射部位的疼痛。一般而言，所述成分单独提供或混合在一起以单位剂型提供，例如密封容器(例如标明活性剂的量的安瓿或药袋)中的干燥冻干粉末或不含水的浓缩物。当所述组合物通过注射给药时，可提供注射用无菌水或盐水的安瓿以便所述组分可在给药前进行混合。本发明的治疗性或药物组合物可配制成中性或盐形式。可药用盐包括与游离氨基基团形成的那些盐，例如衍生自盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等的那些；以及与游离羧基基团形成的那些盐，例如衍生自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等的那些盐。本发明还提供了对所述化合物的修饰以使其一旦给予受试者则更加稳定，即一旦给药则其与未修饰的化合物相比具有更长的有效时间。所述修饰是本领域技术人员公知的，例如聚乙二醇衍生化(PEG化)、微囊化等。在一些具体的实例中，本发明的活性化合物可通过使用交联剂(linker)而偶联至大分子量或小分子量的PEG。现在已知的这类结构的实例包括PEG-伊立替康(irinotecan)和PEG-多西他赛(docetaxel)。可有效治疗具体疾病、病症或障碍的本发明治疗性或药物组合物的用量取决于所述疾病、病症或障碍的性质并可由标准临床技术确定。一般而言，所述剂量在约0. OOlmg/kg至约2mg/kg范围内。此外，可任选地采用体外测定法来帮助鉴别最佳剂量范围。在所述制剂中使用的精确剂量还取决于给药途径和所述疾病、病症或障碍的严重程度，并应根据医师的判断和各患者的情况而决定。有效剂量可由来源自体外或动物模型测试体系的剂量-应答曲线而推断得出。例如，为了基于由大鼠研究所生成的数据而得到用于人的有效mg/kg剂量，将大鼠的有效mg/kg剂量除以六。本发明还提供了包含装有一种或多种本发明的药物组合物的成分(例如化合物、载体)的一个或多个容器的药包或药盒。本发明的化合物还可按照中医实践进行配制。可有效治疗具体疾病、病症或障碍的制剂的组成和剂量取决于根据标准临床技术确定的所述疾病、病症或障碍的性质。处方用量的中药可容易地制成任意形式的药，适于对人类或动物给药。合适的形式包括，例如酊剂、煎剂和干浸膏。这些可口服、通过静脉注射或粘膜施用。所述活性组分还可制成胶囊剂、粉剂、片剂(pallet)、锭剂、栓剂、口服溶液剂、巴氏灭菌的胃肠悬浮液注射剂、包含静脉给药制品的少量或大量注射剂、冻结粉状(frozen power)注射剂、巴氏灭菌的粉状注射剂等。所有上述方法是本领域技术人员已知的，且记载于书中并由中药医师普遍使用。酊剂是通过将草药悬浮于醇(例如酒或饮料酒)的溶液中而制备。悬浮一段时间后，所述液体(醇溶液)可例如一天给药两或三次，每次一茶匙。煎剂是草药制品的常规形式。其通常是在粘土罐中制备，但也可在玻璃、釉质或不锈钢容器中制备。可将所述制剂在水中浸泡一段时间并随后使其沸腾并慢沸直至水量减少例如一半。提取物是草药的基本组分的浓缩制品。通常，所述基本组分是通过将所述草药悬浮于所选择的合适溶剂中而从所述草药中提取得到，所述溶剂通常为水、乙醇/水混合物、甲醇、丁醇、异丁醇、丙酮、己烷、石油醚或其他有机溶剂。所述提取方法还可进一步借助浸溃法、渗滤法、再渗滤法、逆流提取法、涡轮提取法(turbo extraction)或二氧化碳超临界(温度/压力)提取法。过滤去除草药碎屑后，所述提取液可被进一步蒸发并从而浓缩以得到软提取物(湿浸膏(extractum spissum))和/或最终通过喷雾干燥、真空箱干燥、流化床干燥或冷冻干燥得到的干燥提取物、干浸膏。所述软提取物或经干燥的提取物可被进一步溶解于合适液体中至给药所需浓度或者被加工成例如丸剂、胶囊剂、注射剂等形式。本文中涉及或引用的所有专利、专利申请、临时申请和公开文本通过引用方式全部——包括所有附图和表格——纳入本申请，至与本说明书的明确教导不相抵触的程度。应理解，本文所述的实施例和实施方案只是为了示例说明的目的，多种改进或变化对本领域技术人员将是显而易见的并包括在本申请的主旨和范围内。参考文献1. Aggarwal S,Takada Y,Singh S,Myers JN,Aggarwal B. Inhibition of growthand survival of human head and neck squamous cell carcinoma cells by curcuminvia modulation of nuclear factor—kappaB signaling.Int J Cancer 2004，111:679-92.2.Blumenthal M,Goldberg A,Brinckmann J (eds.) Herbal Medicine ExpandedCommission E Monographs. Newton, MA Integrative Medicine Communications，2000，pp22-27.3. Burdette JE, Chen SN，Lu ZZ, Xu H，White BE，Fabricant DS, Liu J，FongHS，Farnsworth NR, Constantinou Al，Van Breemen RV, Pezutto JM, Bolton JL. Blackcohosh(Cimicifuga racemosa L.)protects against menadione-induced DNAdamagethrough scavenging of reactive oxygen speeies bioassay-directed isolation andcharacterization of active principles. J Agric Food Chem 2002，50 :7022-7028.
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本发明公开了一种用于从升麻属种中分离升麻消旋体A的方法，其包括步骤a)提供足够量的获自所述升麻属种的原料，b)在约20℃至约28℃的温度下将获自所述升麻属种的原料与水性的极性溶剂混合以得到包含升麻消旋体A的溶剂提取物；和c)从所述溶剂提取物中分离升麻消旋体A。